高效液相色谱法同时测定通宣理肺丸中橙皮苷_柚皮苷的含量

ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ为１．４％，明方法的重复性良好。 ２．８　加样回收率试验　分别精密称取０．５　ｇ已知苦参碱含 量的同一批（批号２０１００５２９，含量为０．４０２　ｍｇ·ｇ－１）样品粉 末６份，分别精密加入１．０ｍＬ１９６　ｍｇ·Ｌ–１（另行配制）的苦 参碱对照品贮备溶液，按“２．２．２”项方法处理后进样２０μＬ 测定，计算苦参碱回收率，结果见表１。 表１　加样回收率试验结果（ｎ＝６） Ｔａｂ　１　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ（ｎ＝６） 样品含量 ／ｍｇ 加入量 ／ｍｇ 测得量 ／ｍｇ 回收率 ／％ 平均回收率 ／％ ＲＳＤ／％ ０．２００８　 ０．１９６０　 ０．３９２７　 ９７．９１ ０．１９５０　 ０．１９６０　 ０．３８９４　 ９９．１８ ０．１９７７　 ０．１９６０　 ０．３９６６　 １０１．５　 ９９．４２　 １．５ ０．２０４９　 ０．１９６０　 ０．４０１７　 １００．４ ０．１８６３　 ０．１９６０　 ０．３８２１　 ９９．９０ ０．１９１４　 ０．１９６０　 ０．３８２７　 ９７．６０ ２．９　样品的测定　取３个批号样品，按“２．２．２”项方法进行 处理，然后分别精密吸取２０μＬ苦参碱对照品溶液和供试品 溶液，进样，测定峰面积，按外标法计算苦参碱的含量，结果 见表２。 表２　样品测定结果（ｎ＝３） Ｔａｂ　２　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ（ｎ＝３） 批号 称样量／ｇ 含量／ｍｇ·ｇ－１ ２００７０３１２　 ０．５００４　 ０．３８６ ２００８０８０５　 ０．５０１２　 ０．３９２ ２０１００５２９　 ０．５００１　 ０．４０２ ３　讨论 以紫外可见分光光度计扫描苦参碱对照品溶液，其最大 吸收波长为２０３　ｎｍ，考虑到甲醇在此波长处的吸收值较大， 故选取检测波长为２１０　ｎｍ，减少溶剂的干扰，基线较稳。 在流动相选择的过程中，参考有关文献尝试采用乙腈－ ０．１％磷酸溶液［２］、乙腈－０．０２　ｍｏｌ·Ｌ－１三乙胺溶液［３］、乙腈－ 水［４］、甲醇－水－氨水［５］、甲醇－０．０４　ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸溶液［６］作为 流动相，但苦参碱的峰形不佳。经反复试验，最后当采用文 中的条件时，苦参碱的峰形对称，且与其他组分分离良好。 比较了无水乙醇和氯仿提取后的样品溶液中苦参碱的 含量，结果无水乙醇提取的样品含量高于氯仿提取的样品， 最终采用无水乙醇提取样品。 分别测定了超声提取２０，３０，４０　ｍｉｎ的样品，结果提取 ３０，４０　ｍｉｎ的样品测得的结果比较接近，所以最后采用超声 ３０　ｍｉｎ。 ［作者简介］李玉琴，女，副主任药师，电话：０９５１－６４７３２６０，Ｅ－ｍａｉｌ：８９１０５８４７３＠ｑｑ．ｃｏｍ 参考文献： ［１］　白清云．中国医学百科全·蒙医学［Ｍ］．上海：上海科技出版 社，１９９２：２６０． ［２］　原永芳，潘勇华，胡晋红，等．ＨＰＬＣ测定肝力注射液中苦参碱 和盐酸川芎嗪的含量［Ｊ］．华西药学杂志，２００３，１８（５）：３６７－ ３６９． ［３］　吴春红，唐卫文．ＨＰＬＣ法测定苦参药材中苦参碱的含量［Ｊ］． 药物分析杂志，２００８，２８（７）：１１４７－１１４９． ［４］　梁燕，屈蓉，刘华章．ＨＰＬＣ法测定消炎止痢灵片中苦参碱和 氧化苦参碱的含量［Ｊ］．药学进展，２００８，３２（１１）：５０９－５１２． ［５］　张惠清，付文焕，陈珍凤，等．用ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定除湿注射剂 中苦参碱的含量［Ｊ］．药学服务与研究，２００９，９（１）：１７，２１，２７． ［６］　江海，吴三桥，李新生，等．ＨＰＬＣ法测定狼牙刺种子中苦参碱 和氧化苦参碱的含量［Ｊ］．齐鲁药事，２００８，２７（１２）：７２２－７２４． ［收稿日期］２０１１－０１－１０ 高效液相色谱法同时测定通宣理肺丸 中橙皮苷、柚皮苷的含量 李玉琴，陈磊　（宁夏医科大学附属医院，宁夏 银川 ７５０００４） ［摘要］　目的：利用 ＨＰＬＣ法同时测定通宣理肺丸中橙皮苷 与柚皮苷的含量。方法：以Ｃ１８键合硅胶为填充剂，甲醇－醋 酸－水（３５∶４∶６１）为流动相，检测波长２８３　ｎｍ，流速１．０ｍＬ· ｍｉｎ－１。结果：橙皮苷在进样量０．０８５～１．７μｇ范围内，呈良 好的线性关系Ｙ＝３　１４５．５　Ｘ－３６．５９４（ｒ＝０．９９９　７），平均回 收率为９９．０３％，ＲＳＤ 为１．５９％（ｎ＝６）；柚皮苷在进样量 ０．０６３～１．２６μｇ范围内，呈良好的线性关系Ｙ＝２　６３０．８　Ｘ＋ ７３．１６３（ｒ＝０．９９９　１）；平均回收率为９８．７６％，ＲＳＤ为０．９７％ （ｎ＝６）。结论：本法快速、准确，简便，重复性良好，可用于测 定通宣理肺丸中橙皮苷、柚皮苷的含量控制。 ［关键词］　通宣理肺丸；橙皮苷；柚皮苷；高效液相色谱法； 含量测定 ［中图分类号］Ｒ９２７　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３ （２０１１）２３－１９７８－０３ 　　通宣理肺丸为中国药典２０１０年版一部收载的中成药品 种，是由紫苏叶、前胡、桔梗、苦杏仁、麻黄、甘草、陈皮、半夏 （制）、茯苓、枳壳（炒）、黄芩等１１味中药材组方的丸。功能 主治为解表散寒，宣肺止咳。用于风寒束表，肺气不宣所至 的感冒咳嗽等症。临床较常使用，中国药典中制定了显微鉴 别项、麻黄、紫苏叶、黄芩的薄层色谱鉴别及麻黄的含量测 定，未对方中的陈皮及枳壳进行鉴别或含量测定。作者经过 试验摸索，建立了采用 ＨＰＬＣ法同时测定通宣理肺丸中橙皮 苷（陈皮）、柚皮苷（枳壳）含量，操作快捷、准确，方法可行，可 用于通宣理肺丸的质量控制。 １　材料 Ａｇｉｌｅｎｔ　１１００高效液相色谱仪（包括四元梯度泵，ＤＡＤ 检测器，Ａｇｉｌｅｎｔ　１１００色谱数据工作站，Ａｇｉｌｅｎｔ　１１００　Ｇ１３１３Ａ 自动进样器）；橙皮苷、柚皮苷对照品均购自中国药品生物制 品检定所，批号分别为１１０７５６－２００１１０（供含量测定用）；样 品：通宣理肺丸为市售样品。所用试剂甲醇、乙腈为色谱纯， 其他均为分析纯。 ２　方法与结果 ２．１　色谱条件　色谱柱为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充 剂 （Ａｇｉｌｅｎｔ　ＺＯＲＢＡＸ，４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ×５μｍ，美国安捷 伦公司）；流动相：甲醇－醋酸－水（３５∶４∶６１）；检测波长：２８３ ｎｍ；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样量：１０μＬ。 ２．２　溶液的制备 ２．２．１　供试品溶液　取通宣理肺丸大蜜丸样品，剪碎；水蜜 丸样品粉碎，取约１　ｇ，精密称定，置具塞锥型瓶中，精密加甲 醇５０　ｍＬ，称定质量，超声处理（功率２５０　Ｗ，频率４０　ｋＨｚ）３０ ｍｉｎ，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过， ·８７９１· 中国医院药学杂志２０１１年第３１卷第２３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１１　Ｄｅｃ，Ｖｏｌ　３１，Ｎｏ．２３ lenovo 高亮 lenovo 高亮 lenovo 高亮 lenovo 高亮 lenovo 高亮 lenovo 高亮 取续滤液即得。 ２．２．２　对照品溶液　精密称取橙皮苷、柚皮苷对照品适量， 加甲醇制成每１　ｍＬ含橙皮苷８５μｇ，含柚皮苷６３μｇ的混合 溶液，即得。 ２．２．３　阴性对照品溶液　按处方及制法，制成缺陈皮、枳壳 药材的阴性对照样品。取相当于供试品的量，按供“２．２．１” 项方法制成阴性对照溶液。 ２．３　系统适应性试验　取对照品溶液、供试品溶液、阴性对 照样品溶液各１０μＬ，在上述色谱条件下进样，理论板数按橙 皮苷峰计算不低于２　０００；按柚皮苷峰计算不低于２　５００；样 品中橙皮苷与柚皮苷及相邻峰的分离度均大于１．５，对供试 品溶液中橙皮苷和柚皮苷的纯度进行检测，橙皮苷峰纯度为 ０．９９９　９，柚皮苷峰纯度为０．９９９　８。结果表明，色谱系统的专 属性及系统适用性良好，色谱图见图１。 图１　高效液相色谱图 Ａ．对照品；Ｂ．样品；Ｃ．阴性对照品；１－橙皮苷；２－柚皮苷 Ｆｉｇ　１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ Ａ．ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ；Ｂ．ｓａｍｐｌｅ；Ｃ．ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｓａｍｐｌｅ；１－ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ； ２－ｎａｒｉｎｇｉｎ ２．４　线性关系考察　精密吸取橙皮苷对照品溶液（８５μｇ· ｍＬ－１）与柚皮苷对照品溶液（６３μｇ·ｍＬ －１）分别进样１，４，８， １０，１６，２０μＬ，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面 积。以进样量（μｇ）为横坐标（Ｘ），峰面积为纵坐标（Ｙ），绘制 曲线计算回归方程为：橙皮苷：Ｙ＝３１４５．５　Ｘ－３６．５９４，ｒ ＝０．９９９　７；柚皮苷：Ｙ＝２　６３０．８　Ｘ＋７３．１６３，ｒ＝０．９９９　１。结 果表明橙皮苷进样量在０．０８５～１．７μｇ，柚皮苷进样量在 ０．０６３～１．２６μｇ的范围内呈良好的线性关系。 ２．５　重复性试验　取同一批通宣理肺丸样品，按“２．１．１”项 下平行制备供试品溶液６份，按上述色谱条件分别测定橙皮 苷与柚皮苷的峰面积，结果橙皮苷的 ＲＳＤ为０．８％（ｎ＝６）， 柚皮苷的ＲＳＤ为０．３％（ｎ＝６），结果表明精密度良好。 ２．６　中间精密度　由３位不同分析人员分别取同一批通宣 理肺丸样品共６份，按“２．１．１”项下制备供试品溶液，以 “２．１”项下色谱条件，分别在不同的时间，用同一高效液相色 谱仪测定，吸取１０μＬ进样，结果ＲＳＤ为０．３０％，试验结果表 明，该方法中间精密度良好。 ２．７　准确度试验　精密量取已知含量的样品 ６份（０．５ ｇ），分别准确加入质量浓度为１．４３　ｍｇ·Ｌ－１橙皮苷对照品溶 液０．５　ｍＬ、质量浓度为１．６３　ｍｇ·Ｌ－１柚皮苷对照品溶液０．５ ｍＬ，按“２．１．１”项下制备供试品溶液，在上述色谱条件测 定，计算橙皮苷、柚皮苷的含量及加样回收率，结果橙皮苷 平均回收率为９９．０３％，ＲＳＤ为１．５９％，柚皮苷平均回收率 为９８．７６％，ＲＳＤ为０．９７％，试验结果表明，该方法准确度良 好。 ２．８　稳定性试验　取同一批通宣理肺丸样品，制成供试品 溶液，室温放置，于０，４，８，１２，１６，２４，４８　ｈ分别进样，测定峰 面积，结果橙皮苷峰面积的 ＲＳＤ为１．４０％，柚皮苷的峰面 积的ＲＳＤ为１．６２％，结果表明供试品溶液在室温下４８　ｈ稳 定。 ２．９　范围试验　取同一批已知含量的供试品１２份，按柚皮 苷范围限度的７０％取样，其中低限取６份，每份０．３８　ｇ，高限 取６份，每份１．６０　ｇ，按当前取样含量约１∶１分别精密加入柚 皮苷对照品低限０．２１２　ｍｇ，高限１．８１１　ｍｇ，精密加入橙皮苷 对照品低限０．１２８　ｍｇ，高限１．１６５　ｍｇ，按“２．１．１”项下制备供 试品溶液行色谱测定，分别计算柚皮苷与新橙皮苷的回收 率。结果柚皮苷低限平均回收率为９９．５３％，ＲＳＤ为０．６０％； 高限平均回收率为９９．８６％，ＲＳＤ为０．１０％；新橙皮苷低限平 均回收率为１００．２６％，ＲＳＤ为２．９４％；高限平均回收率为 ９９．５４％，ＲＳＤ为１．４３％。 ２．１０　样品测定　取１６批不同生厂家的通宣理肺丸大蜜 丸，８批水蜜丸按照“２．２”项下制成供试品溶液，按上述色谱 条件分别进样测定，用外标法计算其含量，测得大蜜丸橙皮 苷含量为１０．６～２９．３　ｍｇ／丸，柚皮苷含量为３．１～８．２　ｍｇ／ 丸；水蜜丸橙皮苷含量为２．９７～７．３５　ｍｇ·ｇ－１，柚皮苷含量为 ０．９６～２．２０　ｍｇ·ｇ－１，测定结果见１。 表１　样品测定结果 Ｔａｂ　１　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ 样品 （大蜜丸） 含量／ｍｇ丸 橙皮苷 柚皮苷 样品 （大蜜丸） 含量／ｍｇ丸 橙皮苷 柚皮苷 样品 （水蜜丸） 含量／ｍｇ·ｇ－１ 橙皮苷 柚皮苷 １　 １３．８　 ６．２　 ９　 ２２．４　 ７．２　 １７　 ３．２１　 ２．１４ ２　 １９．２　 ３．８　 １０　 ２１．９　 ６．８　 １８　 ５．９８　 １．９８ ３　 １０．９　 ５．７　 １１　 １８．４　 ５．２　 １９　 ７．３５　 １．９９ ４　 １９．８　 ６．９　 １２　 １６．５　 ４．８　 ２０　 ４．７２　 ２．０１ ５　 ２１．４　 ７．８　 １３　 ２１．０　 ６．１　 ２１　 ６．５４　 ０．９９ ６　 ２２．６　 ５．９　 １４　 ２９．３　 ８．１　 ２２　 ６．３２　 １．２３ ７　 １８．０　 ８．２　 １５　 ２０．１　 ７．８　 ２３　 ４．６５　 １．５９ ８　 １７．８　 ７．９　 １６　 １８．７　 ４．２　 ２４　 ６．２３　 １．９７ ３　讨论 ３．１　测定波长的选择　由二极管阵列检测器于２００～ ４００　ｎｍ波长范围内分别对橙皮苷、柚皮苷进行光谱扫描。 结果二者均在２８３　ｎｍ 处有最大吸收，故选作为测定波 长。 ３．２　提取时间的选择考察了在“２．２．１”项相同条件下，不同 提取时间的提取效果，结果表明，超声提取３０　ｍｉｎ可提取完 全。 ３．３　流动相的选择　比较了以乙腈－水（２０∶８０）（用磷酸调 节ｐＨ至３）与甲醇－醋酸－水（３５∶４∶６１）为流动相，结果表明 后者可将橙皮苷与柚皮苷有效分离，保留时间为１６～１８ ·９７９１·中国医院药学杂志２０１１年第３１卷第２３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１１　Ｄｅｃ，Ｖｏｌ　３１，Ｎｏ．２３ ｍｉｎ。 本文采用 ＨＰＬＣ法同时测定通宣理肺丸中橙皮苷与柚 皮苷的含量，快速简便、准确灵敏，可用于通宣理肺丸的质量 控制。 参考文献： ［１］　中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：１７ ［２］　中国药典．一部［Ｓ］．２００５：５８８． ［３］　赵陆华．中药高效液相色谱法应用［Ｍ］．北京：中国医药科技 出版社，２００５： ［收稿日期］２０１１－０８－１２ ［作者简介］赖艳，硕士，药师，电话：１３６３８３０７６７６，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌａｉｙａｎ＿ｂｌｕｅ＠１６３．ｃｏｍ　［通讯作者］蒋学华，男，博士，Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｘｈ１０１３＠ｖｉｐ．１６３．ｃｏｍ 泰诺福韦大鼠在体肠吸收 赖艳１，王凌２，温悦１，蒋学华２　（１．第三军医大学第三附 属医院药剂科，重庆４０００４２；２．四川大学华西药学院临床药 学与药事管理系，四川 成都６１００４１） ［摘要］　目的：研究泰诺福韦在大鼠肠道的吸收。方法：采 用在体单向灌流模型，对泰诺福韦进行了大鼠小肠吸收实 验，以紫外可见分光光度法和高效液相色谱法分别测定循 环液中酚红和泰诺福韦的含量。结果：高（１５０　ｍｇ·Ｌ－１）、中 （１００　ｍｇ·Ｌ－１）、低（５０　ｍｇ·Ｌ－１）泰诺福韦灌注液，各时间点 剩余药量的ＲＳＤ小于８％，含量几乎不变。结论：泰诺福韦 高、中、低３个浓度浓度在大鼠肠道中２　ｈ无明显的吸收。 ［关键词］　泰诺福韦；在体肠吸收；高效液相色谱法 ［中图分类号］Ｒ９６　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３ （２０１１）２３－１９８０－０２ 　　泰诺福韦（９－［２－（Ｒ）－（ｐｈｏｓｐｈｏｎｏｍｅｔｈｏｘｙ）ｐｒｏｐｙｌ］ａｄｅ－ ｎｉｎｅ，Ｔｅｎｏｆｏｖｉｒ，ＰＭＰＡ）是 ＨＢＶ聚合酶和 ＨＩＶ逆转录酶的 无环核苷酸抑制剂，与阿德福韦相似［１］，在临床上被批准用 于 ＨＩＶ感染的治疗。本实验采用大鼠在体肠模型，考察泰 诺福韦在大鼠肠道的吸收情况，为泰诺福韦及其类似物的研 究开发提供生物药剂学的信息。 １　材料 ＬＣ－ＨＴ２０１０Ｃ高效液相色谱仪（日本Ｓｈｉｍｄａｚｕ）；ＴＵ－ １８００紫外可见分光光度仪（北京普析通用仪器有限公司）；泰 诺福韦对照品（江苏正大天晴药业，批号２００７０７０１，纯度 ９９．９％，含水量６．３％）；ＨＰＬＣ方法所用有机溶剂均为色谱 纯，水为注射用水，试验中涉及的其他试剂均为分析纯；ＳＤ 大鼠，雌性，体质量（２００±２０）ｇ，实验前未用任何药物，购自 四川大学试验动物中心。 ２　方法 ２．１　溶液配制 ２．１．１　Ｋｒｅｂｓ－Ｒｉｎｇｅｒ液（Ｋ－Ｒ液，ｐＨ７．４）　称取 ＮａＣｌ　７．８ ｇ，ＫＣｌ　０．３５　ｇ，ＣａＣｌ２０．３７　ｇ，ＮａＨＣＯ３１．３７　ｇ，ＮａＨ２ＰＯ４０．３２ ｇ，ＭｇＣｌ２０．０２　ｇ，葡萄糖１．４　ｇ，加适量纯化水使成１　０００　ｍＬ。 ２．１．２　酚红Ｋ－Ｒ液（灌注液）　取酚红约２０．００ｍｇ精密称 定，置量瓶中，Ｋ－Ｒ试液稀释定容，得到质量浓度为２０　ｍｇ· Ｌ－１的酚红Ｋ－Ｒ液。 ２．１．３　泰诺福韦供试液　取泰诺福韦对照品适量，置量瓶 中，酚红Ｋ－Ｒ液溶解稀释至刻度，得质量浓度为５０，１００，１５０ ｍｇ·Ｌ－１泰诺福韦供试液１，２，３。 ２．２　灌注液中酚红含量的测定　取样品液０．５　ｍＬ，加入５ ｍＬ０．２　ｍｏｌ·Ｌ－１　ＮａＯＨ溶液，摇匀，０．８μｍ微孔滤膜过滤，弃 去初滤液，取续滤液在ＴＵ－１８００紫外可见分光光度计于５５８ ｎｍ处测定吸光度。灌注液中的其他成分不干扰酚红测定。 ２．３　灌注液中泰诺福韦的含量测定 ２．３．１　色谱条件　色谱柱：Ｄｉａｍｏｓｉｌ钻石Ｃ１８柱 （１５０　ｍｍ× ４．６　ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇－０．０２　ｍｏｌ·Ｌ －１　ＫＨ２ＰＯ４水溶 液（加入０．１％四丁基氢氧化铵，磷酸调ｐＨ６．００）＝１７∶８３； 测定波长：２６０　ｎｍ；柱温：２５℃ ；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样 量：２０μＬ。 ２．３．２　泰诺福韦肠灌注液样品处理　取样品液０．５　ｍＬ，加 入６％的高氯酸０．５　ｍＬ，混旋３　ｍｉｎ，１２　０００　ｒ·ｍｉｎ－１离心５ ｍｉｎ，取上清液０．５　ｍＬ，加入０．２　ｍｏｌ·Ｌ－１　ＮａＯＨ８７５μＬ，混 旋，１２　０００　ｒ·ｍｉｎ－１离心５　ｍｉｎ，取上清液２０μＬ进样，在“２． ３．１”色谱条件下分离测定。 ２．３．３　方法专属性考察　分别取空白循环液、泰诺福韦对 照品溶液、样品液（按“２．３．２”处理后）进样。色谱图见图１。 由图可见泰诺福韦保留时间约为７．７　ｍｉｎ。循环液中成分不 干扰连泰诺福韦的测定。 图１　泰诺福韦的高效液相色谱图 Ａ．空白循环液；Ｂ．泰诺福韦对照品溶液；Ｃ．样品 Ｆｉｇ　１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｔｅｎｏｆｏｖｉｒ Ａ．ｂｌａｎｋ　ｐｅｒｆｕｓａｔｅ；Ｂ．ｔｅｎｏｆｏｖｉｒ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ；Ｃ．ｓａｍｐｌｅ ２．３．４　标准曲线制备　精密称取泰诺福韦对照品，置２５ ｍＬ量瓶中，用 Ｋ－Ｒ 液稀释至刻度，得质量浓度为８．００， ２４．０，４０．０，６０．０，８０．０，１００，２００　ｍｇ·Ｌ－１的泰诺福韦对照 品工作液；处理后进样。以质量浓度Ｃ为横坐标，峰面积Ａ 为纵坐标，得到泰诺福韦的标准曲线方程，Ａ＝９　３２２Ｃ ＋ ２４６．４，ｒ＝０．９９９　９６，在８．００～２００　ｍｇ·Ｌ－１范围内，泰诺福韦 峰面积与浓度线性关系良好；高（２００　ｍｇ·Ｌ－１）、中（１００　ｍｇ· Ｌ－１）、次低（２４　ｍｇ·Ｌ－１）、低浓度（８　ｍｇ·Ｌ－１）泰诺福韦方法 回收率（ｎ＝５）分别为９９．９２％、９８．９１％、１００．１％、９９．３８％； 高、中、次低、低浓度日内ＲＳＤ小于０．１０％（ｎ＝５），日间ＲＳＤ ≤５．４３％（ｎ＝５）。 ２．３．５　大鼠在体肠实验［２］　ＳＤ大鼠（禁食一夜，自由饮 水），麻醉后固定。打开腹腔，将肠管内容物冲净后在试验肠 管下端小口处插入玻璃管并结扎。将两端的玻璃管与蠕动 泵的胶管连接，形成回路，以５　ｍＬ·ｍｉｎ－１流速循环１０　ｍｉｎ ·０８９１· 中国医院药学杂志２０１１年第３１卷第２３期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１１　Ｄｅｃ，Ｖｏｌ　３１，Ｎｏ．２３