昆明山海棠治疗耳胆脂瘤的实验研究

昆明山海棠治疗耳胆脂瘤的实验研究 昆明山海棠治疗耳胆脂瘤的实验研究 昆明医学院20O6,(4):16—21 JournalofKunmingMedicalCollege 昆明山海棠治疗耳胆脂瘤的实验研究 CN53—1R 汤勇?,展鸿谋?,卿晨,张林,金树珍",杨一兵. (1)昆明医学院第一附属医院耳鼻咽喉科,昆明650032;2)昆明医学院云南 省天然药物药理重点实验室,昆明650031;3)昆明医学院第一附属医院病理科,昆明650032) [摘要]目的应用昆明山海棠对耳胆脂瘤动物模型治疗后,进行TGF一131,C—FOS在耳胆脂瘤上皮中 的达的研究,探讨昆明山海棠在局部治疗耳胆脂瘤方面的价值及应用原理.方法制作耳胆脂瘤动物模型, 以氯霉素,昆明山海棠,生理盐水制剂,进行局部对照治疗,应用免疫组化sP染色法检测TGF一131,C—FOS 分别在以上3组动物模型胆脂瘤上皮中,l7例对照健康耳中的表达,应用计算机图像分析系统对其阳性表达 进行定量分析.结果应用昆明山海棠,氯霉素局部治疗后的动物模型,其耳胆脂瘤C—FOS的表达明显低于 正常外耳道上皮组织(F=7.293,P<0.05),而仅有昆明山海棠制剂使其TGF一81表达增强(F=5.789,P <0.05),同时也发现生理盐水对TGF一131,C—FOS的表达无影响.结论即刻早期基因C—FOS在胆脂瘤中 表达显着增强,并与胆脂瘤侵袭能力的高低相关.而TGF一131名为生长抑制多态因子,当在胆脂瘤中高表达 使其抑制细胞生长,使胆脂瘤的高增殖处于可控制状态.提示应用昆明山海棠制剂通过细胞因子作用于耳胆 脂瘤动物模型,可达到治疗胆脂瘤的目的. [关键词]胆脂瘤;蒙古沙鼠;动物模型;TGF一131;C—FOS;局部治疗 [中图分类号]R282.71;R764.o4[文献标识码]A[文章编号]1003—4706(2006)04— 0016—06 StudyoftheEarCholesteatomeTreatedbyTriptergiulnHypoglaucum TANGYong?, ZHANHong—mou? ,QINGChen,ZHANGLin,JINShu—zhen,YANGYi—bing. (1)ENTDept.ofthe1stAj~liatedHospitalofKunmingMedicalCollege,Kunming650032; 2)YunnanPharmacologicalLaboratoriesofNaturalProducts,KunmingMedicalCollege,Kunming650031; 3)Dept.ofIgathology,The1stAj~liatedHospitalofKunmingMedicalCollege,Kunming650032,China) [Abstract]ObjectiveToinvestigatetheroleoftriptergiamhypoglaucumoncholesteatomeandtheex— pressionofC——FOSandTGF—— 131incholesteatomeepitheliumduringtreatingearcholesteatomeofthemenggu mouse.MethodWeappliedchloramphenicoleyedrops.tripterygiumhypoglaucumor0.9%liquidofthesodi— amchloridetotreattheearcholesteatomeoftheanimalmodel(Menggumouse)whichhavebeenestablished.By thelocaltherapy,wedetectedtheexpressingofC—FOSandTGF— p1incholesteatomeusingImmunohisto— chemicalstaining(SPmethod).Theexpressionofthemwasobservedundermicroscope,afterthat,wescanned itbyanimagescannerandquantifiedthegrayofthemusingcommercialsoftware.ResultTheexpressionofC— FOSonepitheliumofthenormalexternalauditorymeatuswasnotablyhigherthanthatoncholesteatomeepitheli— amofthesickear,whichwastreatedbytriptergiamhypoglaucumandchloramphenicoleyedr ops(F=7.293, P<0.05).What'Smore,theexpressionofTGF一 131washigheronlyontriptergiamhypoglaucumtreatingteam (F=5.789,P<0.05).Inthemeantime,wedetectedthat0.9%hq~idofthesodiamchlorideco uldnot [基金项目]云南省教育厅科研基金资助(02ZD255) [作者简介]汤勇(1976一),男,云南曲靖人,医学学士,主治医师,主要从事耳科临床 与研究工作. 第4期汤勇,等.昆明山海棠治疗耳胆脂瘤的实验研究l7 effecttheexpressionoftheC—FOSandTGF一 131.ConclusionIthadbeendefinitethattheexpressionofthe C—FOSoncholesteatomewashigheronthenormalepithelium,TGF一 131,growthrestrainfactor,couldrestrain andcontrolthegrowthofcellanditshishproliferation.SoitWasconcludethatTriptergiumhyp oglaucumcould playaimportantroleintreatingearcholeasteatomeofanimalmodelthroughcellfactorssucha sC—FOSandTGF — B1. [Keywords]Cholesteatome;Menggumouse;Animalmodel;TGF一131;C— FOS;Localtherapy 耳胆脂瘤是耳鼻咽喉科常见多发病,其本质 是耳粘膜鳞状上皮化生,并不断脱屑,又不能排 空,以致不断堆集,侵袭破坏周围骨质及外,中, 内耳结构,引起广泛破坏,甚至出现致命性颅内, 外并发症.手术是目前治疗胆脂瘤的唯一有效手 段.寻找某种局部用药,以延缓或阻止胆脂瘤角 化多层鳞状上皮的增殖和分化,则胆脂瘤的治疗 将得到突破性进展….本试验旨在,于蒙古沙鼠 动物模型中寻找一种有效的局部用药.昆明山海 棠其化学成分具有较强的抗炎和免疫抑制作用, 临床上主要用作免疫抑制剂,其疗效已被广泛认 可,另一方面,昆明山海棠又通过作用于某些细 胞因子,达到对机体的免疫抗炎作用.同时近年 来,国内外针对胆脂瘤的发病机制进行了大量的 基础研究,发现胆脂瘤的发病可能与炎症反应的 长期存在,使上皮产生大量的细胞因子,在排空 受阻的情况下,不断刺激,引发C—FOS的持续 表达相关,同时TGF—B1的表达又受到抑制,以 至于胆脂瘤的形成. 在此,应用昆明山海棠治疗耳胆脂瘤动物模 型,观察TGF一131,C—FOS细胞因子的表达情 况,从而探讨昆明山海棠制剂如何通过细胞因子 TGF—B1,C—FOS对胆脂瘤的增殖产生影响. 1材料与方法 1.1材料 标本:成功制作蒙古沙鼠耳胆脂瘤动物模型 20只,取其右耳为实验组而左耳作为对照组(实 验过程中自然死亡3只蒙古沙鼠). 试剂:鼠抗人TGF—B1单克隆抗体,鼠抗人 C—FOS单克隆抗体,昆明山海棠制剂(自制), 氯霉素制剂(由昆明振华制药厂提供),生理盐 水,sP试剂盒. 仪器:全自动脱水机,切片机,恒温箱,压 力锅,冰箱,孵育盒,日产OlympusBH一2光学 显微镜及照相系统,HPIAS一1000计算机图像分 析仪. 1.2实验方法 方法:选用健康蒙古沙鼠,右耳制做耳胆脂 瘤模型,左耳作为健康对照,取动物模型胆脂瘤 标本,制做石蜡标本并切成5pan厚切片,进行病 理检验看是否形成耳胆脂瘤,对于形成者分别应 用昆明山海棠,生理盐水,氯霉素进行局部治疗, 再行免疫组化试验,光镜下观察TGF—B1,C— FOS蛋白的表达情况.取每张切片3个阳性视野, 应用计算机图像分析系统在20倍镜和6.O46×10测量窗下对其阳性细胞表达光密度和灰度进行定 量分析,并根据数据作统计分析. 1.3试验步骤 制作耳胆脂瘤动物模型:?选用40只健康纯 种蒙古沙鼠(粤检证2001A013号),体重在78, 92g,双侧外耳道及鼓膜检测均正常;?手术方 法:蒙古沙鼠固定术野剪毛后,用1%戊巴比妥 钠按35mg/kg体重腹腔注射,麻醉成功后,用 75%乙醇消毒右耳廓及外耳道,环行切开右外耳 道人口处皮肤及皮下组织,但不伤及外耳道软骨, 将皮肤连同皮下组织,用1号丝线对端缝合,彻 底封闭外耳道,仔细检查确认缝合严密后,以 75%乙醇消毒伤口,两周后检查伤口是否愈合, 外耳道是否完全封闭,如未完全封闭需再次切开 手术缝合;?动物饲养:将右外耳道结扎成功的 蒙古沙鼠分笼饲养,每天均给予专用鼠动物饲料 饲养,其间动物均未见明显异常反应.饲养时间 为半年(2004年1月一6月);?检验:75%乙 醇消毒手术部位,眼科精细剪剪开原缝合伤口, 暴露外耳道,取其内组织常规石蜡切片检查,并 取左外耳道组织(对照耳)作病理学检查.取出 标本用10%甲醛固定,石蜡包埋切片,HE染色, 光镜下观察部分蒙古沙鼠外耳道胆脂瘤形成(20 只)且对照耳正常. 治疗阶段:?制备试剂:取昆明山海棠去皮 根木质部,交药剂科煎液,将药液在蒸馏水中浸 l8昆明医学院第27卷 泡1h,文火煎30min,药液浓度为1g/mL,0.25 孑L筛过滤,无菌分装;?分3组治疗:耳胆脂瘤 动物模型蒙古沙鼠17只(实验过程中自然死亡3 只蒙古沙鼠动物模型),患侧外耳道(右侧)分 别滴加氯霉素(7只),昆明山海棠(7只),生 理盐水(3只),每次3滴,每天3次,时间长达 1个月;?组织学标本制备:将经过治疗后的蒙 古沙鼠患侧耳取胆脂瘤上皮组织,以备试验. sP免疫组化技术:?石蜡脱腊和水化后, PBS(pH7.4)冲洗3次,每次3min;?每张切 片加一滴过氧化物阻断液(试剂A),室温下孵育 10min,阻断内源性过氧化物酶的活性,PBS液冲 洗3次,每次3min;~PBS冲洗3次,每张切片 加一滴正常非免疫动物血清,(试剂B);?除去 血清,每张切片分别加一滴第一抗体(TGF—B1, C—FOS单克隆抗体),室温下孵育60min;? PBS液冲洗3次,每次3min,除去PBS液,每张 切片加一滴生物素标记的第二抗体(试剂c),室 温下孵育10min,PBS液冲洗3次,每次3min; ?除去PBS液,每张切片加一滴链霉素抗生物素 一 过氧化物酶溶液(试剂D),室温下孵育10 min,PBS液冲洗3次,每次3min;?除去PBS 液,每张切片加一滴新鲜配置的DAB溶液,显微 镜下观察3—10min;?自来水冲洗,苏木素复 染,PBS冲洗返蓝.经梯度乙醇脱水干燥,二甲 苯透明,中性树胶封固. 计算机图像分析:高倍镜下取每张切片取3 个视野,采用VideoPro32彩色多媒体图像分析系 统,在20倍物镜和6.046×10测量窗下对其阳 性细胞表达光密度和灰度进行定量分析,并根据 数据作统计分析(图1—6见封二). 1.4结果判定 TGF—B1阳性表达为呈棕黄色颗粒的胞浆阳 性产物,C—FOS阳性表达为呈棕黄色颗粒的胞核 阳性产物. 灰度值测定:每张切片取3个阳性视野,用 图像分析软件分析其灰度,平均值,灰度值 随阳性表达量的增多而减少. 统计学分析:分别应用昆明山海棠,氯霉素, 生理盐水制剂治疗蒙古沙鼠耳胆脂瘤动物模型右 耳(治疗组),比较3组C—FOS和TGF—B1表 达量是否有差异,此3组治疗组分别与对照组 (左耳)进行显着性比较.均使用SPSS11.5软 件,完全随机资料方差分析的统计方法. 2结果 2.1TGF一阻表达情况 阳性产物定位于细胞胞浆,胞核无着色.正 常鼠外耳道皮肤,TGF—B1阳性表达主要位于远 离基底层的棘细胞,颗粒细胞,密度低,而胆脂 瘤上皮中TGF—B1蛋白表达位于上皮全层,表达 密度高,呈棕色强阳性.分别应用昆明山海棠, 氯霉素,生理盐水制剂治疗蒙古沙鼠耳胆脂瘤动 物模型右耳(治疗组),比较3组TGF一131表达 量是否有差异,此3治疗组分别又与对照组进行 显着性比较,结果见图1—4(封二),表1. 表1TGF—B1表达情况 Tab.1TheexpressionofTGF—B1 分组有效例数平均灰度最低灰度最高灰度差 昆明山海棠治疗组 昆明山海棠对照组 氯霉素治疗组 氯霉素对照组 生理盐水治疗组 生理盐水对照组 105.37 l29.18 101.15 l18.97 121.5O l21.32 94.99 102.1O 87.8O ll5.00 l20.60 l20.60 l14.5O 142.8O l14.60 l22.40 l22.40 l22.O5 7.88 l5.65 9.72 3.73 1.27 1.O3 以上统计可以得出结论,对蒙古沙鼠耳胆脂瘤模型分别进行昆明山海棠,氯霉素滴 眼液局部 第4期汤勇,等.昆明山海棠治疗耳胆脂瘤的实验研究l9 治疗与用生理盐水治疗相比,对于提高TGF—B1 表达量方面有显着性差异,3组治疗组又分别与 所对应的对照组比较,昆明山海棠显着提高TGF — B1表达量(F=5.789,P=0.002),而氯霉 素,生理盐水则起不到此种效果. 2.2C—FoS的表达情况 阳性产物定位于细胞胞核,少数胞浆着色. 正常鼠外耳道皮肤中仅角化细胞,颗粒细胞及角 化产物表达阳性,基底层和棘细胞层无明显阳性 表达,而胆脂瘤上皮C—FOS蛋白位于上皮全层, 以角化层和颗粒层表达密度高,呈棕色强阳性. 分别应用昆明山海棠,氯霉素,生理盐水制剂治 疗蒙古沙鼠耳胆脂瘤动物模型右耳(治疗组), 比较3组C—FOS表达量是否有差异,此3组治 疗组分别又与对照组进行显着性比较,结果见图 5—6(封二)及表2. 表2C—FOS的表达情况 Tab.2TheexpressionofC—FOS 以上统计可以得出结论,对蒙古沙鼠耳胆脂 瘤模型分别进行昆明山海棠,氯霉素滴眼液局部 治疗与用生理盐水治疗相比,对于降低C—FOS 表达量方面昆明山海棠制剂作用明显,3组治疗 组又分别于所对应的对照组比较,昆明山海棠制 剂及氯霉素均降低C—FOS表达量(F=7.293. P=0.001),而生理盐水则无法起到此种效果. 3讨论 许多研究者均认同中耳胆脂瘤是一种炎性病 变,但同时也具有肿瘤的特征,即其不断扩展且 有很明显的侵袭性,以此破坏中耳结构和颞骨骨 质,甚至出现致命性的颅内,外并发症.但胆脂 瘤的发病机制至今仍不明确.据目前的研究发现, 在中耳胆脂瘤上皮及上皮下结缔组织中,各种细 胞因子含量显着增加,如C—FOS.而同时人们也 发现昆明山海棠制剂可以通过抑制细胞因子而达 到抑制组织炎症的作用...据此,将昆明山海 棠局部应用于治疗耳胆脂瘤,来观察其治疗效 果. 昆明山海棠为卫茅科雷公藤属的一种,又名 六方藤,火把花根等,该植物资源丰富,广泛分 布在我国西南地区,多集中于云南楚雄,红河, 玉溪及昆明等地.其化学成分具有较强的抗炎和 免疫抑制作用.有研究报道,昆明山海棠提取物 (THW24)能有效抑制体外培养的离体血管平滑 肌细胞增殖及诱导其凋亡;而昆明山海棠碱则 更高效地诱导Jurkat多种肿瘤细胞凋亡,凋亡诱 导剂诱导凋亡的机制实际上就是抑制细胞增殖生 长,促使细胞凋亡;另外,近年来国内针对昆 明山海棠的研究还表明:昆明山海棠红素(0.1— 10mL)在试管内可降低LPS诱导的小鼠腹腔 巨噬细胞和细胞内IL一1活性,也能降低Cons诱 导的小鼠脾细胞产生IL一2,对机体免疫抗炎功能 产生影响;李新宇等昆明山海棠有效成分雷 公藤内脂醇可抑制健康人外周血单核细胞IL一 6MRNA及IL一8MRNA表达;王云红等研究证 实昆明山海棠通过影响IL一8表达来治疗无菌性 脓疱病?. 细胞因子则是指由活化的免疫细胞和某些基 质细胞分泌的,介导和调节免疫,炎症反应的小 分子多肽,它包括由淋巴细胞产生的淋巴因子和 由单核/巨噬细胞产生的单核因子.TGF—B1具有 许多重要的生物学特性,几乎存在于所有的细胞 中,是能调节细胞增殖,分化,细胞间质蛋白表 达的一种多功能生长因子.可以可逆性抑制多种 昆明医学院第27卷 细胞的生长,特别是来源于外胚层的细胞如角化 细胞.同时有强大的趋化作用,对巨噬细胞及中 性粒细胞有趋化作用,因此将炎症下调,并减少 其他细胞因子的表达,减缓胆脂瘤的形成,另外 其又刺激上皮引起粘连素,纤维连接蛋白的形成, 而促进了局部肉芽组织的形成,进一步减缓胆脂 瘤的形成?j. C—FOS是一种即刻早期转录基因.在细胞增 殖周期,G0期细胞受到细胞因子等刺激时引发复 杂的信号网络,先表达C—FOS蛋白,然后在这 些转录因子的作用下,细胞开始激活延迟早期反 应基因的表达,再组合成有激酶活性的周期素一 周期素依赖性蛋白激酶复合体,使对G1关卡起 作用的基因产物PRs磷酸化,释放某些转录因子, 激活s期基因的表达,从而使细胞进入增殖周 期.在胆脂瘤上皮全层均有表达,且较其他组织 有显着表达.这说明胆脂瘤上皮周围持续不断的 炎症刺激,引发各种细胞因子的生成,而C—FOS 又促进胆脂瘤上皮的不断增殖_l,从而恶性循 环,促进病变的发展. 即刻早期基因C—FOS在胆脂瘤中表达显着 增强,并与胆脂瘤侵袭能力的高低相关.TGF—B1 名为生长抑制多态因子,当在胆脂瘤中高表达使 其抑制细胞生长,使胆脂瘤的高增殖处于可控制 状态.昆明山海棠制剂又可通过一系列的细胞因 子对机体免疫抗炎功能产生影响.而胆脂瘤的发 病机制,目前认为可能由于长期炎症的刺激导致 胆脂瘤的高度增殖能力,所以,我们应用昆明山 海棠制剂通过细胞因子C—FOS和TGF—pl,作 用于耳胆脂瘤动物模型,'观察其治疗胆脂瘤的效 果.研究发现应用昆明山海棠制剂局部治疗鼠耳 胆脂瘤,会使胆脂瘤上皮TGF一81的表达增加且 c—FOS的表达降低,从而对鼠耳胆脂瘤动物模型 的患耳有一定的治疗作用.由此,我们的研究还 可以进一步延伸,即针对于体外培养的人耳胆脂 瘤,进行有针对性的局部治疗研究,以期寻找到 对人耳胆脂瘤局部有效的治疗方法. (致谢:章宗籍教授在计算机图像分析,张开 宁教授在统计学处理方面给予大力支持,在此表 示衷心感谢!) [参考文献] [1]KOUNTAKISSE,CHANGCY,MINOTHAM,et a1.Effectofverapamiloncholesteatomamigrationin vitro[J].Ot0l柚lg0lHeadNeckSurg,2000,122: 915—919 [2]SUDHOFFH,DAZERTS,GONAZALSAM,eta1. Angiogenesisandangiogenicgowthfactorsinmiddle earchloesteatoma[J].AmJOtol,2000,21(6): 793—798 [3]MASANORISHIWAMD,HIROMAMD,HIROSHI MORIYAMAMD.Expressionoftransferringgrowth factor—ainchloesteatoma[J].TheJournalofbryn. gologyandOtology,1998,112:750—754 [4]李正贤,李学佩,刘庚勋,等.肿瘤坏死因子一a 在中耳胆脂瘤中的表达和意义[J].耳鼻咽喉一 头颈外科,2000,7(5),287—289 [5]薛秋红,金康叶,宋海兰.肿瘤坏死因子一a在中 耳胆脂瘤骨质破坏中的作用[J].临床耳鼻咽喉 科杂志,2001,15(1):13—14 [6]TANAKAY,KOJIMAH,MYAZAKIH,etaLRole ofcytokinesandcellcycleregulatingsubstancesinpro- liferationofchloesteatomeepithelium[J].IJartyT scope,1999,109(7):102—107 [7]SASTRYKV,SHAMAC,MannSB,eta1.Aural chloesteatome:roleoftumornecrosisfactor—ain bonedestruction[J].AmJOtol,1999,20(2): 158—161 [8]TANAKAY,SHIVAM,KOJIMAH,eta1.Asmdy onepithemalproliferationabilityinchloesteatome [J].Larygoscope,1998,108(4):537—542 [9]KOTOA,OHASHIY,MASAMOTOH,eta1. Interleukin——6andtumornecrosisfactor——alphasyn- thesizedbychloesteatomecellsaffectmunociharynlnc- tionintheeustachiantube[J].ActaOtohryngol 897 suppl,1998,53:890— [10]江超武,展鸿谋,王文慧,等.C—FOS,TGF— pl,P27在中耳胆脂瘤上皮中的表达及相关性研究 [J].中华耳鼻喉科杂志,2004,39(4):211— 215 [11]喻卓,孟磊,郭艳红,等.昆明山海棠提取物对 血管平滑肌细胞增殖及调亡的影响[J].中国中 西医结合,2004,24(9):827—830 [12]杨录军,敖琳,NuesseMichael,等.昆明山海棠 碱对Jurkart淋巴瘤株的细胞周期和凋亡时相的影 响[J].第三军医大学,2003,25(17): 1505—1507 [13]李新宇,郑家润,高经伟,等.环孢素与雷公藤 对11L—la诱导的人外周血单核细胞IL一6和IL一 8MRNA表达的影响[J].临床皮肤科杂志, 第4期汤勇,等.昆明山海棠治疗耳胆脂瘤的实验研究21 [14] [15] 1999,28(2):77—79 王红云,万屏,李继梅.昆明山海棠对无菌性脓 疱病患者血清IL一8水平的影响[J].皮肤病与 性病,2002,24(2):1—2 MIIASKIC,FEDORONSKIA,SIIANAC,eta1. Basicfibroblstgrowthfactorinthepefimatrisofcho1. esteatoma[J].HNO,1998,46(9):804—8 [16] [17] 杨向茹,李西秦,马敏,等.基质金属蛋白酶 及抑制剂和转化抑制因子一B在中耳胆脂瘤的表 达[J].中华耳鼻咽喉科杂志,2002,37(2): 121一i23 李琦涵,姜莉.细胞因子与即刻早期基因反应 [M].昆明:云南大学出版社,2001:160—175 (20O6—01—10收稿) 自发性脑出血急性期TCD,血压,fVEP 的l临床动态观察与相关性研究(摘要) 研究生杜鑫导师朱榆红 (昆明医学院第二附属医院,昆明650101) [关键词】自发性脑出血;经颅多普勒超声; [中图分类号】R743.34[文献标识码】A 动态血压监测;闪光视觉诱发电位;CT [文章编号】1003—4706(2006)04—0021—01 目的探讨自发性脑出血急性期经颅多普勒超声 (TCD)的动态变化规律,以及与血压,颅内压,出血量, 病情,预后之间的相关性.方法对54例首次发病且发病 24h内人院的幕上自发性脑出血患者,于人院第1,7,21 天进行床旁TCD检测,并与24h动态血压监测(ABPM), 闪光视觉诱发电位无创颅内压监测(fVEP),CT和神经功 能缺损评分(MESSS),13常生活能力评分(BI)进行对比 研究及相关性分析.结果自发性脑出血急性期TCD异常 以大脑前循环为主,主要表现为高阻力低流速的血流频谱, 出血侧更明显,两侧血流明显不对称.连续TCD监测发现, 降低的血流速度逐渐增高,同时增高的脉动指数(vI)则 逐渐降低,至发病3周后TCD检测基本恢复至正常范围 . ABPM检查发现24h平均收缩压与大脑中动脉平均血流速 度(Vm)呈负相关,与PI呈正相关.无创颅内压监护仪 所得颅内压值与大脑中动脉Vm呈负相关,与PI值呈正相 关.出血量,MESSS评分与大脑中动脉Vm呈负相关,与 PI值呈正相关.而BI评分与大脑中动脉Vm呈正相关,与 PI值呈负相关.结论脑出血后TCD检查血流显着降低, 说明脑供血低灌注,不宜常规降血压治疗.TCD检查可用于 脑出血患者急性期脑血流动力学的监测,并在降血压治疗 时提供有用的参考信息.fVEP法无创颅内压监护与TCD两 者结合使用有助于判断颅内压的动态变化并指导降颅压治 疗.TCD异常程度与出血量,临床神经功能评分显着相关, 有助于病情判断和预后评估. (2OO6—06—10收稿) 昆明山海棠治疗耳胆脂瘤的实验研究 图1胆脂瘤上皮TGF一131浆表达SPx200图2 Fig.1TheexpressionofTGF一131inFig.2 cholesteatomeepitheliumSPx200 图4胆脂瘤上皮TGF一131角化物SPX400 Fig4Theexpressionof1_GF一131in cholesteatomeepitheliumkeratinization SPx400 (正文见第16页) 胆脂瘤上皮_『.GF一131浆表达SPx400图3 Theexpressionof1.GF一131inFig.3 cholesteatomeepitheliumSPx400 图5胆脂瘤上皮C—FOS核表达SPx200 Fig.5TheexpressionofC-FOSin cholesteatomeepitheliumSPx200 『.GF一131角化物SPx200 胆脂瘤上皮_ Theexpression cholesteatome ofTGF-131_n epitheliumkera- tinizationSPx200 图6胆脂瘤上皮C—FOS核表达SPx400 Fig.6TheexpressionofC—FOSin cholesteatomeepitheliumSPx400 TGF-I3;1与膀胱癌发生发展的相关研究 图1膀胱癌(GT)TGF一131呈弱阳性表达, 定位于胞膜及胞质(S—P法,×400) Fig.1TGF一131weaklypositiveexpressionintransitionalcell carcinomaofthebladder(G1T1),stainincellmembrane andcytoplasma(S-P法,×400) (正文见第22页) 图2膀胱癌(G,T.)TGF一131呈阳性表达, 定位于胞膜及胞质(S—P法,×400) Fig.2TGF一131positiveexpressionintransitionalcellcarcinoma ofthebladder(G4T3),stainincellmembraneandcytoplasma (S—P法,x400)