沙门氏菌检测

沙门氏菌 食品安全国家 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 National food safety standard Food microbiological examination: Salmonella 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 1 范围 本标准规定了食品中沙门氏菌(Salmonella)的检验方法。 本标准适用于食品中沙门氏菌的检验。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下: 2.1 冰箱:2 ?,5 ?。 2.2 恒温培养箱:36 ??1 ?，42 ??1 ?。 2.3 均质器。 2.4 振荡器。 2.5 电子天平:感量0.1 g。 2.6 无菌锥形瓶:容量500 mL，250 mL。 2.7 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头。 2.8 无菌培养皿:直径90 mm。 2.9 无菌试管:3 mm×50 mm、10 mm×75 mm。 2.10 无菌毛细管。 2.11 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。 2.12 全自动微生物生化鉴定系统。 3 培养基和试剂 3.1 缓冲蛋白胨水(BPW): 见附录A 中A.1。 3.2 四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液:见附录A 中A.2。 3.3 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液:见附录A 中A.3。 3.4 亚硫酸铋(BS)琼脂:见附录A 中A.4。 3.5 HE 琼脂:见附录A 中A.5。 3.6 木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂:见附录A 中A.6。 3.7 沙门氏菌属显色培养基。 3.8 三糖铁(TSI)琼脂:见附录A 中A.7。 3.9 蛋白胨水、靛基质试剂:见附录A 中A.8。 3.10 尿素琼脂(pH 7.2):见附录A 中A.9。 3.11 氰化钾 (KCN) 培养基:见附录A 中A.10。 3.12 赖氨酸脱羧酶试验培养基:见附录A 中A.11。 3.13 糖发酵管:见附录A 中A.12。 3.14 邻硝基酚β-D 半乳糖苷(ONPG)培养基:见附录A 中A.13。 3.15 半固体琼脂:见附录A 中A.14。 3.16 丙二酸钠培养基:见附录A 中A.15。 3.17 沙门氏菌O 和H 诊断血清。 3.18 生化鉴定试剂盒。 4 检验程序 沙门氏菌检验程序见图1。 图1 沙门氏菌检验程序 5 操作步骤 5.1 前增菌 称取25 g(mL)样品放入盛有225 mL BPW 的无菌均质杯中，以8 000 r/min,10 000 r/min 均 质 1 min,2 min，或置于盛有225 mL BPW 的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min,2 min。若样 品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH 值，用1 mol/mL 无菌NaOH 或HCl 调pH 至6.8?0.2。 检样 36 ??1 ?，8 h,18 h TSI，赖氨酸，NA， 靛基质， 尿素 (pH 7.2)，KCN 挑取可疑菌落 BS XLD(或HE、显色培养基) 1 mL+TTB 10 mL 1 mL+SC 10 mL 25 g(mL)样品+225 mLBPW H2S+ 靛基质- 尿素-KCN- 赖氨酸 + H2S+ 靛基质+ 尿素- KCN- 赖氨酸+ H2S-靛基质-尿 素-KCN- 赖氨酸+/- 反应结果与左 侧描述不符 生化鉴定试剂盒或全 自动微生物生化鉴定 系统+ 42 ??1 ?，18 h,24 h 36 ??1 ?，18 h,24 h