[小学教育]促甲状腺激素(TSH)定量试剂盒(化学发光法)

[小学教育]促甲状腺激素(TSH)定量试剂盒(化学发光法) 标题:促甲状腺激素(TSH)测定版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-001 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 1 页～共 6 页 【概述】 促甲状腺素,TSH,是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素～其主要作用是调控甲状腺的功能活动。测定血清中TSH的浓度是判断甲状腺功能是否正常的首选指标～也是研究下丘脑—垂体—甲状腺轴反馈调节机制等的重要参数～临床上多用于甲状腺功能亢进,甲亢,和减退,甲减,的诊断、原发与继发性甲减的鉴别诊断、监测甲亢和甲减的疗效、亚临床甲亢的诊断、新生儿甲低的筛查以及垂体TSH瘤的实验室诊断等。 【测定原理】 本试剂盒采用双抗夹心法测定血清中TSH水平～用两株不同的单克隆抗体分别与TSH分子上不同的抗原决定簇发生反应。用一株单抗包被微孔板制成固相抗体～用另一株单抗标记酶制成酶标抗体。在包被板微孔中加入校准品或待测血清及酶标抗体～温育后即形成固相抗体—抗原—酶标抗体的复合物～充分洗涤后加入化学发光底物液～于30—90分钟内测定其发光强度,RLU,～根据校准曲线即可算出样品中TSH的含量～样品的RLU值随TSH浓度的增加而升高。 标题:促甲状腺激素,TSH,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-001 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 2 页～共 6 页 【试剂组成和配制】 数量 48孔 96孔 包被板 1块 48孔/块 96孔/块 校准品 7瓶 0.5ml/瓶 0.5ml/瓶 浓度0、0.1、0.5、2.5、10、40、120uIU/ml 酶标记物 1瓶 3ml/瓶 6ml/瓶 化学发光底物1瓶 3ml/瓶 6ml/瓶 液 浓缩洗涤液 1瓶 30ml/瓶 30ml/瓶 使用时用蒸馏水稀释20倍,水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水, 说明 1份 1张/份 1张/份 封板膜 1份 1张/份 2张/份 【样本】 病人标本无需特殊处理～采用正确医用技术收集全血标本～离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用～可于 。。2—8C保存～若需长期存放应保存在-20C以下～并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。 标题:促甲状腺激素,TSH,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-001 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 3 页～共 6 页 【测定方法】 。自4C冰箱中取出试剂盒～室温平衡15分钟～然后按下表程序操作: TSH加样测定程序表 单位:ul 包被板 空白孔 校准孔 样品孔 校准品 — 50 — 待测样品 — — 50 酶标记物 — 50 50 。 用微量震荡器充分振荡混匀～用封板膜封板37C温育2小时。 用稀释后的洗涤液洗板5次～最后在干净的吸水纸上扣干。 发光底物液 50 50 50 。 用微量震荡器充分振荡混匀～室温,20—27C,避光反应30分钟。 测量 必须于加化学发光底物液后的第30—90分钟内测量～在化学发光测 量仪上依序测量各孔的发光强度,RLU,～测量时间1秒/孔。 。。注:若室温低于20C～加入化学发光底物液后应将微孔板臵于20~30C烘箱内温育30分钟后再测量,加入化学发光底物液后其发光强度,RLU,在30—90分钟之间比较稳定～此段时间为可靠测量期。 【适用仪器】 微孔板光子计数分析仪～微孔板洗板机。 【结果计算】 待测样品的浓度按下方法计算: 用化学发光测量仪中的数据处理程序,拟合类型:线性拟合～坐标选择:log(x)—log(Y),实验方法:夹心法,直接给出校准曲线及样品的浓度值。 标题:促甲状腺激素,TSH,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-001 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 4 页～共 6 页 【正常参考值】 各实验室应建立自己的临床正常值～下列正常值范围仅供参考。 正常参考值:0.3—5.0uIU/ml 【对实验结果的解释】 本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标～应结合临床症状及其它检测指标综合判定。 【方法的局限性】 1、 本试剂盒仅限用于血清样本的测定～对于其它体液样本测定的 可靠性尚未得到充分的实验确认。 2、 本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围～超 出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。 3、 通过其它方法得到的TSH浓度值与本试剂盒的测定结果不具 有直接的可比性。 【技术参数】 1、 灵敏度:?0.02uIU/ml 2、 精密性:用本方法检测低、中、高三组样品,n=10,。 批内变异系数:CV%,15.0%,批间变异系数:CV%,20.0% 3、 线性:r,0.9900 标题:促甲状腺激素,TSH,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-001 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 5 页～共 6 页 【注意事项】 1、 检测必须符合实验室管理的～严格防止交叉污染。所 有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。 2、 操作前应仔细阅读使用说明书～严格按照说明书的操作程序进 行～不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要干燥保存～用 完后立刻放回密封袋中封严后保存。 3、 各试剂必须摇匀后使用～用前应平衡到室温～严格控制每步反 应的时间和温度。 4、 加样操作应快速准确手法一致～慢吸快打～不要使溶液粘到孔 壁上～尽量缩短整个加样时间。 5、 每次加样完毕后～应用微量震荡器充分振荡混匀～并避免产生 气泡防止溶液溅出。 6、 以洗板机洗板时～每孔注液量不应少于400ul～洗板次数不少 于5次～浸泡时间不短于10秒～并注意检查加液头是否堵塞。洗 板完后还应在干净的吸水纸上扣干。 7、 以手工洗板时～每次洗液都应加满微孔～最后应在干净的无纸 屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。 8、 加发光底物液的加样器应专用～加样吸头应确保干净无污染～ 标题:促甲状腺激素,TSH,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-001 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 6 页～共 6 页 在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触～以防底物爱到污染而造成本底升高。 9、 为防止样品蒸发及避免污染～温育时应将反应板放于密闭干净 的塑料袋内或用不干胶覆盖。 标题:三碘甲腺原氨酸,T3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-002 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 1 页～共 5 页 【概述】 三碘甲腺原氨酸,T3,是含碘的氨基酸衍生物～由一个分子一碘酪氨酸和一个分子二碘酪氨酸偶联而成～分子量651D。血循环中的T3有80%来自游离T4在外周组织脱去一个碘原子而成～直接来自甲状腺的T3只占20%。血中的T3有99.7%与甲状腺结合球蛋白,TBG,等结合。血清T3浓度的测定对甲状腺功能的评价和早期诊断甲亢很有价值～同时对甲亢的疗效观察及判定预后也有重要价值。 【测定原理】 本试剂盒采用竞争法测定血清中T3水平。将T3抗体包被微孔板制成固相抗体～用酶标记T3抗原制成酶标抗原。在包被板微孔中加入校准品或待测血清和酶标记物～温育后即形成固相抗体—非标记抗 原或酶标记抗原复合物～充分洗涤后加入化学发光底物液测定其发光强度,RLU,～根据校准曲线即可算出样品中T3的含量～样品的RLU值随T3浓度的增加而降低。 标题:三碘甲腺原氨酸,T3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-002 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 2 页～共 5 页 【试剂组成和配制】 数量 96孔 包被板 1块 96块/块 校准品 6瓶 0.5ml/瓶 浓度为:0、0.5、1.0、2.5、5.0、7.5ng./ml 酶浓缩液 1瓶 1.1ml/瓶 酶稀释液 1瓶 11ml/瓶 酶工作液:按1:10用酶稀释液,1.0ml,稀释酶浓缩液,0.1ml,并混合均匀～现用现配。 化学发光底物液A 1瓶 6ml/瓶 化学发光底物液B 1瓶 6ml/瓶 使用前根据需要量将底物液A和B等体积,1:1,混合～现用现配。 浓缩洗涤液 1瓶 30ml/瓶 使用时用蒸馏水稀释20倍,水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水, 说明书 1份 1张/份 封板膜 1份 2张/份 【样本要求】 病人标本无需特殊处理～采用常规医用技术收集全血标本～离心 分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用～可于2 。。—8C保存～若需长期存放应保存在-20C以下～并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。 标题:三碘甲腺原氨酸,T3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-002 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 3 页～共 5 页 【测定方法】 。自4C冰箱中取出试剂盒～室温平衡15分钟～然后按下表程序操作: T3加样测定程序表 单位:ul 包被板 空白孔 校准孔 样品孔 校准品 — 50 — 待测样品 — — 50 酶工作液 — 100 100 。 用微量震荡器充分振荡混匀～用封板膜封板室温,20~27C,温育45分钟。 用稀释后的洗液洗板5次～最后在干净的吸水纸上扣干。 发光底物混合液 100 100 100 。 用微量震荡器充分振荡混合均匀～室温,20~27C,避光反应5分钟。 。测量 必须于加化学发光底物液后的第5~30C 分钟内测量～在化学发光 测量仪上依序测量各孔的发光强度,RLU,～测量时间1秒/孔。 【适用仪器】 微孔板光子计数分析仪～微孔板洗板机。 【结果计算】 待测样品的浓度计算按下列方法进行:用化学发光分析仪中的数据处理程序,拟合类型:线性拟合～坐标选择:log(X)—logit(Y)～实验方法:竞争法,直接给出校准曲线及样品的浓度值。 【正常参考值】 各实验室应建立自己的正常参考值～下列正常值仅供参考。 正常参考值:0.52—1.90ng/ml (单位换算:1nmol/L=0.651ng/mL) 标题:三碘甲腺原氨酸,T3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-002 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 4 页～共 5 页 【对实验结果的解释】 本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标～应结合临床症状及其它检测指标综合判定。 【方法的局限性】 1、 本试剂盒仅限用于血清样本的测定～对于其它体液样本测定的 可靠性尚未得到充分的实验确认。 2、 本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围～超 出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。 3、 通过其它方法得到的T3浓度值与本试剂盒的测定结果不具有 直接的可比性。 4、 待测血清中存在抗T3等自身抗体以及人抗鼠等异嗜抗体会干 扰测定结果。 【技术参数】 1、 灵敏度: ?0.04ng/ml 2、 精密度:用本方法检测低、中、高三组样品,n=10,。分析内 变异系数:CV%,15%,分析间变异系数:CV%,20% 3、 线性:| r | ?0.9900 4、 特异性:与10ug/ml的T4交叉反应率小于0.02% 【注意事项】 1、 检测必须符合实验室管理规范的规定～严格防止交叉污染。所 标题:三碘甲腺原氨酸,T3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-002 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 5 页～共 5 页 有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。 2、 操作前应仔细阅读使用说明书～严格按照说明书的操作程序进 行～不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要干燥保存～用 完后立刻放回密封袋中封严后保存。 3、 各试剂必须摇匀后使用～用前应平衡到室温～严格控制每步反 应的时间和温度。 4、 加样操作应快速准确手法一致～慢吸快打～不要使溶液粘到孔 壁上～尽量缩短整个加样时间。 5、 每次加样完毕后～应用微量震荡器充分振荡混匀～并避免产生 气泡防止溶液溅出。 6、 以洗板机洗板时～每孔注液量不应少于400ul～洗板次数不少 于5次～浸泡时间不短于10秒～并注意检查加液头是否堵塞。洗 板完后还应在干净的吸水纸上扣干。 7、 以手工洗板时～每次洗液都应加满微孔～最后应在干净的无纸 屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。 8、 加发光底物液的加样器应专用～加样吸头应确保干净无污染～ 在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触～以 防底物受到污染而造成本底升高。 9、 为防止样品蒸发及避免污染～温育时应将反应板放于密闭干净的 塑料袋内或用不干胶覆盖。 标题:甲状腺素,T4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-003 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 1 页～共 6 页 【概述】 甲状腺素(T4)是甲状腺分泌的两种主要激素之一～分子量777D～全部由甲状腺产生。T4的主要作用是促进合成和能量代谢～使基础代谢和耗氧量增加～促进生长和发育。在血中的T4有99.97%与甲状腺结合球蛋白,TBG,及甲状腺结合前蛋白,TBPA,结合。T4的合成和分泌主要受下丘脑及垂体的控制。T4是甲状腺功能亢进,甲亢,和减退,甲减,的诊断和疗效评价的指标之一。 【测定原理】 本试剂盒采用竞争法测定血清中T4水平～用T4抗体包被微孔板制成固相抗体～用T4抗原标记酶制成酶标记物。在包被微孔中加入T4校准品或待测血清和酶标抗原～温育后竞争形成固相抗体—非标记抗原或标记抗原复合物～充分洗涤后加入化学发光底物液于5—30分钟内测定其发光强度,RLU,～根据标准曲线即可算出样品T4的含量～样品的RLU值随T4浓度的增加而降低。 标题:甲状腺素,T4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-003 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 2 页～共 6 页 【试剂组成和配制】 数量 96孔 包被板 1块 96孔/块 校准品 6瓶 0.5ml/瓶 浓度为:0、2、5、10、15、25ug/dl 酶浓缩液 1瓶 1.1ml/瓶 酶稀释液 1瓶 11ml/瓶 酶工作液:按1:10用酶稀释液,1.0ml,稀释酶浓缩液,0.1ml,并混合均匀～现用现配。 化学发光底物液A 1瓶 6ml/瓶 化学发光底物液B 1瓶 6ml/瓶 使用前根据需要量将底物液A和B等体积,1:1,混合～现用现配。 浓缩洗涤液 1瓶 30ml/瓶 使用时用蒸馏水稀释20倍,水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水, 说明书 1份 1张/份 封板膜 1份 1张/份 【样本要求】 病人标本无需特殊处理～采用常规医用技术收集全血标本～离心 。分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用～可于2~8 。C保存～若需长期存放应保存在-20C以下～并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。 标题:甲状腺素,T4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-003 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 3 页～共 6 页 【测定方法】 。自4C冰箱中了出试剂盒～室温平衡15分钟～然后按下表程序操作: T4加样测定程序表 单位:ul 包被板 空白孔 校准孔 样品孔 校准品 — 25 — 待测样品 — — 25 酶工作液 — 100 100 。 用微量震荡器充分振荡混匀～用封板膜封板室温,20~27C,温育45分钟。 用稀释后的洗液洗板5次～最后在干净的吸水纸上扣干。 发光底物混合液 100 100 100 。 用微量震荡器充分振荡混合均匀～室温,20~27C,避光反应5分钟。 。测量 必须于加化学发光底物液后的第5~30C 分钟内测量～在化学发光 测量仪上依序测量各孔的发光强度,RLU,～测量时间1秒/孔。 【适用仪器】 微孔板光子计数分析仪～微孔板洗板机。 【结果计算】 待测样品的浓度计算按下列方法进行: 用化学发光分析仪中的数据处理程序,拟合类型:线性拟合～坐标选择:log(X)—logit(Y)～实验方法:竞争法,直接给出校准曲线及样品的浓度值。 【正常参考值】 各实验室应建立自己的正常值～下列正常值仅供参考。 正常参考值:男性4.4~10.8ug/dl,女性4.8~11.6ug/dl ,单位换算1nmol/L=0.077ug/dL, 标题:甲状腺素,T4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-003 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 4 页～共 6页 【对实验结果的解释】 本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标～应结合临床症状及其它检测指标综合判定。 【方法的局限性】 1、 本试剂盒仅限用于血清样本的测定～对于其它体液样本测定的 可靠性尚未得到充分的实验确认。 2、 本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围～超 出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。 3、 通过其它方法得到的T4浓度值与本试剂盒的测定结果不具有 直接的可比性。 4、 血清中存在抗T4等自身抗体以及人抗鼠等异嗜抗体会干扰测 定结果。 【性能指标】 1、 灵敏度:?0.1ug/dL 2、 精密度:用本方法检测低、中、高三组样品,n=10,。 分析内变异系数:CV%,15%,分析间变异系数:CV%,20% 3、 线性相关系数绝对值 | r | ?0.9900 4、 特异性:与浓度为100ug/dL右旋三碘原氨酸交叉反应率为 1.5%～与浓度为100ug/dL的左旋三碘原氨酸交叉反应率为3.0%。 标题:甲状腺素,T4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-003 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 5 页～共 6 页 【注意事项】 1、 检测必须符合实验室管理规范的规定～严格防止交叉污染。所 有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。 2、 操作前应仔细阅读使用说明书～严格按照说明书的操作程序进 行～不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要干燥保存～用 完后立刻放回密封袋中封严后保存。 3、 各试剂必须摇匀后使用～用前应平衡到室温～严格控制每步反 应的时间和温度。 4、 加样操作应快速准确手法一致～慢吸快打～不要使溶液粘到孔 壁上～尽量缩短整个加样时间。 5、 每次加样完毕后～应用微量震荡器充分振荡混匀～并避免产生 气泡防止溶液溅出。 6、 以洗板机洗板时～每孔注液量不应少于400ul～洗板次数不少 于5次～浸泡时间不短于10秒～并注意检查加液头是否堵塞。洗 板完后还应在干净的吸水纸上扣干。 7、 以手工洗板时～每次洗液都应加满微孔～最后应在干净的无纸 屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。 8、 加发光底物液的加样器应专用～加样吸头应确保干净无污染～ 在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触～以 标题:甲状腺素,T4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-003 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 6 页～共 6 页 防底物受到污染而造成本底升高。 9、 为防止样品蒸发及避免污染～温育时应将反应板放于密闭干净 的塑料袋内或用不干胶覆盖。 标题:游离三碘甲腺原氨酸,FT3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-004 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 1 页～共 6 页 【概述】 三碘甲腺原氨酸,T3,是含碘的氨基酸衍生物～由一个分子一碘酪氨酸和一个分子二碘酪氨酸偶联而成～分子量651D。血循环中的T3有80%来自游离T4在外周组织脱去一个碘原子而成～直接来自甲状腺的T3只占20%。血中的T3有99.7%与甲状腺结合球蛋白,TBG,等结合。同TBG等蛋白质结合的T3无生物活性～而0.3%未结合的T3即游离T3,FT3,的生物活性则比游离T4强5~10倍。因此测定血清FF3对于甲亢的诊断、疗效和预后的判断具有重要的临床价值～对甲减的诊断也有一定的参考价值。 【测定原理】 本试剂盒采用竞争法测定血清中FT3水平。用T3抗体包被微孔板制成固相抗体～酶标记T3抗原制成酶标记物～该酶标记物不能够与TBG和白蛋白结合。在包被板微孔中加入FT3校准品或待测血清和酶标记物～酶标记物与样品的FT3竞争性结合出样品中FT3的含量～样品的RLU值随FT3浓度的增加而降低。 标题:游离三碘甲腺原氨酸,FT3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-004 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 2 页～共 6 页 【试剂组成和配制】 数量 96孔 包被板 1块 96孔/块 校准品 6瓶 0.5ml/瓶 浓度为:0、1.2、2.5、5.0、8.5、18pg/mL,1pg/mL×1.536=pmol/L, 酶标记物 1瓶 1ml/瓶 化学发光底物液A 1瓶 6ml/瓶 化学发光底物液B 1瓶 6ml/瓶 使用前根据需要量将底物液A和B等体积,1:1,混合～现用现配。 浓缩洗涤液 1瓶 30ml/瓶 使用时用蒸馏水稀释20倍,水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水, 说明书 1份 1张/份 封板膜 1份 1张/份 【样本要求】 病人标本无需特殊处理～采用常规医用技术收集全血标本～离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用～可于可 。。于2~8C保存～若需长期存放应保存在-20C以下～并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。 标题:游离三碘甲腺原氨酸,FT3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-004 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 3 页～共 6 页 【测定方法】 。自4C冰箱中了出试剂盒～室温平衡15分钟～然后按下表程序操作: FT3加样测定程序表 单位:ul 包被板 空白孔 校准孔 样品孔 校准品 — 50 — 待测样品 — — 50 酶工作液 — 100 100 。 用微量震荡器充分振荡混匀～用封板膜封板室温,20~27C,温育45分钟。 用稀释后的洗液洗板5次～最后在干净的吸水纸上扣干。 发光底物混合液 100 100 100 。 用微量震荡器充分振荡混合均匀～室温,20~27C,避光反应5分钟。 。测量 必须于加化学发光底物液后的第5~30C 分钟内测量～在化学发光 测量仪上依序测量各孔的发光强度,RLU,～测量时间1秒/孔。 【适用仪器】 微孔板光子计数分析仪～微孔板洗板机。 【结果计算】 待测样品的浓度计算按下列方法进行: 用化学发光分析仪中的数据处理程序,拟合类型:线性拟合～坐标选择:log(X)—logit(Y)～实验方法:竞争法,直接给出校准曲线及样品的浓度值。 【正常参考值】 各实验室应建立自己的正常值～下列正常值仅供参考。 正常参考值:正常成人1.4~4.2pg/mL,妊娠期:1.8~4.2pg/mL。 ,单位换算:1pg/mL×1.536=pmol/L, 标题:游离三碘甲腺原氨酸,FT3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-004 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 4 页～共 6 页 【对实验结果的解释】 本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标～应结合临床症状及其它检测指标综合判定。 【方法的局限性】 1、 本试剂盒仅限用于血清样本的测定～对于其它体液样本测定的 可靠性尚未得到充分的实验确认。 2、 本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围～超 出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。 3、 通过其它方法得到的FT3浓度值与本试剂盒的测定结果不具 有直接的可比性。 4、 血中TBG含量的高低不会影响FT3的测定～但血清中存在抗 T3等自身抗体以及人抗鼠等异嗜抗体会干扰测定结果。 【性能指标】 1、灵敏度:?0.05pg/mL 2、精密度:用本方法检测低、中、高三组样品,n=10,。 分析内变异系数:CV%,15%,分析间变异系数:CV%,20% 3、线性相关系数绝对值 | r | ?0.9900 4、 特异性:与10ug/mLT4的交叉反应率小于0.02%～与10ug/mLT3 的交叉反应率小于0.01% 标题:游离三碘甲腺原氨酸,FT3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-004 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 5 页～共 6 页 【注意事项】 1、 检测必须符合实验室管理规范的规定～严格防止交叉污染。所 有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。 2、 操作前应仔细阅读使用说明书～严格按照说明书的操作程序进 行～不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要干燥保存～用 完后立刻放回密封袋中封严后保存。 3、 各试剂必须摇匀后使用～用前应平衡到室温～严格控制每步反 应的时间和温度。 4、 加样操作应快速准确手法一致～慢吸快打～不要使溶液粘到孔 壁上～尽量缩短整个加样时间。 5、 每次加样完毕后～应用微量震荡器充分振荡混匀～并避免产生 气泡防止溶液溅出。 6、 以洗板机洗板时～每孔注液量不应少于400ul～洗板次数不少 于5次～浸泡时间不短于10秒～并注意检查加液头是否堵塞。洗 板完后还应在干净的吸水纸上扣干。 7、 以手工洗板时～每次洗液都应加满微孔～最后应在干净的无纸 屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。 8、 加发光底物液的加样器应专用～加样吸头应确保干净无污染～ 在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触～以 标题:游离三碘甲腺原氨酸,FT3,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-004 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 6 页～共 6 页 防底物受到污染而造成本底升高。 9、 为防止样品蒸发及避免污染～温育时应将反应板放于密闭干净 的塑料袋内或用不干胶覆盖。 标题:游离甲状腺素,FT4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-005 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 1 页～共 6 页 【概述】 甲状腺素(T4)是甲状腺分泌的两种主要激素之一～分子量777D,全部由甲关腺产生。T4的主要作用是促进合成和能量代谢～使基础代谢率和耗氧量增加～促进生长和发育。在血中的T4有99.97%与甲状腺结合球蛋白,TBG,及甲状腺结合前蛋白,TBPA,结合～只有0.03%的T4呈游离状态,FT4,。与蛋白结合的FT4无生物活性～只有FT4才具有生物学效应。因此～测定血清中FT4无疑比总FT4对于甲状腺 疾病的诊断和疗效判断具有更重要的临床意义。 【测定原理】 本试剂盒采用竞争法测定血清中FT4水平。用T4抗体包被微孔板制固相抗体～酶标记T4抗原制成酶标记物～该酶标记物不能够与TBG和白蛋白结合。在包被板微孔中加入FT4校准品或待测血清和酶标记物～酶标记物与样品中的FT4竞争性结合固定在微孔板上的有限数量的抗体结合位点。充分洗涤后加入化学发光底物液测定其发光强度,RLU,～根据校准曲线即可算出样品中FT4的含量～样品的RLU值随FT4浓度的增加而降低。 标题:游离甲状腺素,FT4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-005 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 2 页～共 6 页 【试剂组成和配制】 数量 96孔 包被板 1块 96孔/块 校准品 6瓶 0.5ml/瓶 浓度为:0、0.45、1.1、2.0、5.0、7.5、ng/dL,1ng/dL×12.9=pmol/L, 酶标记物 1瓶 1ml/瓶 化学发光底物液A 1瓶 6ml/瓶 化学发光底物液B 1瓶 6ml/瓶 使用前根据需要量将底物液A和B等体积,1:1,混合～现用现配。 浓缩洗涤液 1瓶 30ml/瓶 使用时用蒸馏水稀释20倍,水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水, 说明书 1份 1张/份 封板膜 1份 1张/份 【样本要求】 病人标本无需特殊处理～采用常规医用技术收集全血标本～离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用～可于可 。。于2~8C保存～若需长期存放应保存在-20C以下～并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。 标题:游离甲状腺素,FT4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-005 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 3 页～共 6 页 【测定方法】 。自4C冰箱中了出试剂盒～室温平衡15分钟～然后按下表程序操作: FT4加样测定程序表 单位:ul 包被板 空白孔 校准孔 样品孔 校准品 — 50 — 待测样品 — — 50 酶工作液 — 100 100 。 用微量震荡器充分振荡混匀～用封板膜封板室温,20~27C,温育45分钟。 用稀释后的洗液洗板5次～最后在干净的吸水纸上扣干。 发光底物混合液 100 100 100 。 用微量震荡器充分振荡混合均匀～室温,20~27C,避光反应5分钟。 。测量 必须于加化学发光底物液后的第5~30C 分钟内测量～在化学发光 测量仪上依序测量各孔的发光强度,RLU,～测量时间1秒/孔。 【适用仪器】 微孔板光子计数分析仪～微孔板洗板机。 【结果计算】 待测样品的浓度计算按下列方法进行: 用化学发光分析仪中的数据处理程序,拟合类型:线性拟合～坐标选择:log(X)—logit(Y)～实验方法:竞争法,直接给出校准曲线及样品的浓度值。 【正常参考值】 各实验室应建立自己的正常值～下列正常值仅供参考。 正常参考值:正常成人0.8~2.0ng/dL,妊娠期:0.76~2.24ng/dL。 ,单位换算:1ng/dL×12.9=1pmol/L, 标题:游离甲状腺素,FT4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-005 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 4 页～共 6 页 【对实验结果的解释】 本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标～应结合临床症状及其它检测指标综合判定。 【方法的局限性】 1、 本试剂盒仅限用于血清样本的测定～对于其它体液样本测定的 可靠性尚未得到充分的实验确认。 2、 本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围～超 出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。 3、 通过其它方法得到的FT3浓度值与本试剂盒的测定结果不具 有直接的可比性。 4、 血中TBG含量的高低不会影响FT3的测定～但血清中存在抗 T3等自身抗体以及人抗鼠等异嗜抗体会干扰测定结果。 【性能指标】 1、灵敏度:?0.05ng/dL 2、精密度:用本方法检测低、中、高三组样品,n=10,。 分析内变异系数:CV%,15%,分析间变异系数:CV%,20% 3、线性相关系数绝对值 | r | ?0.9900 4、特异性:与100ug/mL右旋三碘甲腺原氨酸的交叉反应率为0.015%～与100ug/mL的左旋三碘甲腺原氨酸的交叉反应率为0.030%～与 标题:游离甲状腺素,FT4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-005 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 5 页～共 6 页 40ug/mL人血清白蛋白无交叉反应。 【注意事项】 1、检测必须符合实验室管理规范的规定～严格防止交叉污染。所有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。 2、 操作前应仔细阅读使用说明书～严格按照说明书的操作程序进 行～不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要干燥保存～用 完后立刻放回密封袋中封严后保存。 3、 各试剂必须摇匀后使用～用前应平衡到室温～严格控制每步反 应的时间和温度。 4、 加样操作应快速准确手法一致～慢吸快打～不要使溶液粘到孔 壁上～尽量缩短整个加样时间。 5、 每次加样完毕后～应用微量震荡器充分振荡混匀～并避免产生 气泡防止溶液溅出。 6、 以洗板机洗板时～每孔注液量不应少于400ul～洗板次数不少 于3次～浸泡时间不短于10秒～并注意检查加液头是否堵塞。洗 板完后还应在干净的吸水纸上扣干。 7、 以手工洗板时～每次洗液都应加满微孔～最后应在干净的无纸 屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。 8、 加发光底物液的加样器应专用～加样吸头应确保干净无污染～ 标题:游离甲状腺素,FT4,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-005 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 6 页～共 6 页 在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触～以防底物受到污染而造成本底升高。 9、 为防止样品蒸发及避免污染～温育时应将反应板放于密闭干净 的塑料袋内或用不干胶覆盖。 标题:甲胎蛋白,APF,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-006 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 1 页～共 6 页 【概述】 甲胎蛋白,AFP,是单链糖蛋白～590个氨基酸～含糖4%～MW为70 000kDa。妊娠第6周在胎儿的未分化肝细胞、卵黄囊和胃肠道开始合成AFP～第13周达到高峰后逐渐降低～出生后不久即至成人水平。正常人血清中AFP的含量很低。原发性肝细胞癌、肝炎和肝硬化等良性肝病及某些生殖细胞肿瘤等患者～AFP升高。血清中AFP含量的测定～是诊断原发性肝癌和判断预后的重要指标～通过测定母体血液和胎儿羊水中AFP的含量～对判断胎儿畸形及先天性愚型有一定的价值。 【测定原理】 本试剂盒采用双抗体夹心法测定血清中AFP水平。用一株单抗包被微孔板制成固相抗体～另一株单抗标记酶制成酶标抗体。在包被板微孔中加入AFP校准品或待测血清及酶标记物～温育后即形成固相抗体—抗原—酶标抗体的复合物～充分洗涤后加入化学发光底物液～于30~90分钟内测定其发光强度,RLU,～根据校准曲线即可算出样品中AFP的含量～样品的RLU值随AFP浓度的增加而升高。 标题:甲胎蛋白,APF,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-006 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 2 页～共 6 页 【试剂组成和配制】 数量 48人份 96人份 包被板 1块 48孔/块 96孔/块 校准品 6瓶 0.5ml/瓶 0.5ml/瓶 浓度0、5、20、100、300、600ng/mL 酶标记物 1瓶 4ml/瓶 8ml/瓶 化学发光底物液 1瓶 3ml/瓶 6ml/瓶 浓缩洗涤液 1瓶 30ml/瓶 30ml/瓶 使用时用蒸馏水稀释20倍,水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水, 说明书 1份 1张/份 1张/份 封板膜 1份 1张/份 2张/份 【样本要求】 病人标本无需特殊处理～采用正确医用技术收集全血标本～离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用～可于 。。2—8C保存～若需长期存放应保存在-20C以下～并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。 标题:甲胎蛋白,APF,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-006 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 3 页～共 6 页 【测定方法】 。自4C冰箱中取出试剂盒～室温平衡15分钟～然后按下表程序操作: AFP加样测定程序表 单位:ul 包被板 空白孔 校准孔 样品孔 校准品 — 25 — 待测样品 — — 25 酶标记物 — 75 75 。 用微量震荡器充分振荡混匀～用封板膜封板37C温育1小时。 用稀释后的洗涤液洗板5次～最后在干净的吸水纸上扣干。 发光底物液 50 50 50 。 用微量震荡器充分振荡混匀～室温,20—25C,避光反应30分钟。 测量 必须于加化学发光底物液后的第30—90分钟内测量～在化学发光 测量仪上依序测量各孔的发光强度,RLU,～测量时间1秒/孔。 。。注:若室温低于20C～加入化学发光底物液后应将微孔板臵于20~30C烘箱内温育30分钟后再测量,加入化学发光底物液后其发光强度,RLU,在30—90分钟之间比较稳定～此段时间为可靠测量期。 【适用仪器】 微孔板光子计数分析仪～微孔板洗板机。 【结果计算】 待测样品的浓度按下方法计算: 用化学发光测量仪中的数据处理程序,拟合类型:线性拟合～坐标选择:log(x)—log(Y),实验方法:夹心法,直接给出校准曲线及样品的浓度值。 标题:甲胎蛋白,APF,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-006 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 4 页～共 6 页 【正常参考值】 各实验室应建立自己的临床正常值～下列正常值范围仅供参考。 正常参考值:,10ng/mL 【对实验结果的解释】 本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标～应结合临床症状及其它检测指标综合判定。 【方法的局限性】 1、 本试剂盒仅限用于血清样本的测定～对于其它体液样本测定的 可靠性尚未得到充分的实验确认。 2、 本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围～超 出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。 3、 通过其它方法得到的TSH浓度值与本试剂盒的测定结果不具 有直接的可比性。 【技术参数】 1、灵敏度:?1.3ng/mL 2、精密性:用本方法检测低、中、高三组样品,n=10,。 批内变异系数:CV%,15.0%,批间变异系数:CV%,20.% 3、线性:r?0.9900 标题:甲胎蛋白,APF,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-006 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 5 页～共 6 页 【注意事项】 1、 检测必须符合实验室管理规范的规定～严格防止交叉污染。所 有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。 2、 操作前应仔细阅读使用说明书～严格按照说明书的操作程序进 行～不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要干燥保存～用 完后立刻放回密封袋中封严后保存。 3、 各试剂必须摇匀后使用～用前应平衡到室温～严格控制每步反 应的时间和温度。 4、 加样操作应快速准确手法一致～慢吸快打～不要使溶液粘到孔 壁上～尽量缩短整个加样时间。 5、 每次加样完毕后～应用微量震荡器充分振荡混匀～并避免产生 气泡防止溶液溅出。 6、 以洗板机洗板时～每孔注液量不应少于400ul～洗板次数不少 于5次～浸泡时间不短于10秒～并注意检查加液头是否堵塞。洗 板完后还应在干净的吸水纸上扣干。 7、 以手工洗板时～每次洗液都应加满微孔～最后应在干净的无纸 屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。 8、 加发光底物液的加样器应专用～加样吸头应确保干净无污染～ 在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触～以 标题:甲胎蛋白,APF,测定 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-006 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 6 页～共 6 页 防底物爱到污染而造成本底升高。 9、 为防止样品蒸发及避免污染～温育时应将反应板放于密闭干净 的塑料袋内或用不干胶覆盖。 标题:源德MPC-1半自动化学发光分析仪操作程序 版本号:A 修订号:0 文件编号:CJYYLAB-FG-SOP-007 发布日期:2007年06月26日 生效日期:2007年07月01日 发布部门:质量管理小组 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码:第 1 页～共 2 页 一、开机:先打开电脑～在发光仪后面将电源开关打开。 1、 在电脑桌面上双击“亮精灵免疫分析软件2.06”快捷方式～ 调出应用程序。 2、 打开新试剂盒时～首先使用配套的IC卡～插入读卡器～然 后点击“试剂卡”～选择“新试剂卡充值”～再点击“充值 入电脑”～试剂盒的测试次数会自动充入电脑中～测试时选 择即可。 3、 在“文件”菜单下点击“新建”菜单～或点击工具栏的新 建按钮来创建一个新的实验。 4、 在“数据”菜单下点击“输入样本信息”进入此界面进行 病人的信息输入。检测项目是必选项目。 5、 在实验上选择要做的孔板对应的项目,空白B、标准品 S、质控Q、标本U、阴性对照-、阳性对照+中的一个或几 个,完成模板定义后～点击确认。 6、 进入标本盘样品及其他信息输入界面～选择实验项目,多 个实验项目时,～左下角选择检验项目～弹出试剂批号对话 框～选择试剂批号～点击“确定”～此时标准品浓度、质控 浓度、测量参数均显示在界面上～点击下一步～输入样品 稀释信息,一般不稀释默认就行,～点击下一步输入阴阳性 界信息系数,如进行阴阳性对照,～点击下一步～录入的病 人样本信息和实验模板上的待测样本孔自动关联～检查是 否对应准确～如不对应～需进行调整～然后点击“完成信 息输入”关闭此界面。 7、 点击工具栏的“ ”图标～或者在“实验”菜单中执行“开 始实验命令”～系统就进入了实验状态。 8、 实验完毕～在“报告”菜单中选择“病人报告”菜单～选 择要打印的报告进行打印。 二、保养、维修 日常保养 1、保持仪器表面清洁～可用柔软棉布进行擦拭～必要时蘸少许清水。 2、检测结束后～务必取出盘中的反应板～反应板在仪器中的存放时间不得超过45分钟。 3、仪器运行温度:14—40C 湿度:?75% 月保养:仪器正常使用情况下～无须进行月保养,如仪器长期不使用情况下～每月至少进行一次月保养,按日常保养进行,。 季保度养:每季度检查一次仪器漂移情况,按仪器正常使用方法检测白色空白板～各孔发光信号不得超过2000RLU。 年度保养:按上述保养程序进行～无须进行特殊的年度保养。 三、相关文件