福乐欣口服液中黄芩苷含量的测定研究

福乐欣口服液中黄芩苷含量的测定研究              作者:崔蓉～ 张媛～ 杨奕～ 包 卫华    【摘要】  目的建立福乐欣口服液中黄芩苷含量测 定。方法采用反相高效液相色谱法Symmetry C18柱,150 mm×4.6 mm 5 μm,分析柱,流动相:甲醇 0.006%磷酸,50? 50,,流速1.0 ml〃min-1,色谱柱温度25?,检测波长278 nm,进样体积10 μl,外标法计算含量。结果黄芩苷进样量 在0.412，4.12 μg范围内与色谱峰面积有良好的线性关 系～r=0.999 5～回收率为99.48%～RSD=1.70%(n=5)。结论 该方法简便、灵敏、可靠～可用于控制福乐欣口服液中黄芩 苷含量。 【关键词】  反相高效液相色谱法, 福乐欣口服液, 黄芩苷 Abstract:ObjectiveTo establish the determination method of baicalin in Fulexin Oral Liquid.MethodsThe content of baicalin was determined by RP-HPLC and was separated on C18 column with methanol-0.006% phosphoric acid (50?50) as mobile phase at a flow rate of 1.0 ml〃min-1 and wavelength of 278 nm. Injection volumn was 10 μl.ResultsThe standard curve for baicalin linear in the range of 0.412，4.12 μg (r=0.999 5 n=5). The average revovery was 99.48% with RSD was 1.07%(n=5).ConclusionThe method is simple and rapid, which can be used for the quality control of Fulexin Oral Liquid. Key words:RP-HPLC;  Fulexin oral liquid;  Baicalin     福乐欣口服液系由板蓝根、黄芩、 黄芪、金银花、连翘等药材组成的复方中药制剂。具有清热 解毒、健脾燥湿、增强机体免疫力之功效～临床主要用于治 疗感冒引起的发热、头痛、咽部红肿疼痛等。黄芩苷为本品 有效成分之一～且含量较高～因此选用高效液相色谱法测定 样品黄芩苷的含量。 1  仪器、试剂与样品     高效液相色谱仪Waters 1525, Binary HPLC pupm, Waters 2487紫外检测器。Lenovo计算机及处理系统～KQ型超声波清洗器。甲醇～色谱纯,磷酸～分析纯,水为超纯化水。黄芩苷对照品～批号110715 200514～购于中国药品生物制品检定所,福乐欣口服液～金华职业技术学院医学院中药研究所提供。 2  方法与结果 2.1  色谱条件与系统适用性实验色谱柱为Symmetry C18柱,150 mm×4.6 mm, 5 μm,～流动相为甲醇-0.006%磷酸,50?50,～检测波长为278 nm,1,～流速为1.0 ml〃min-1,柱温25?理论塔板数按黄芩苷峰计算～不低于2 000。 2.2  对照品溶液的制备精密称取在60?减压干燥4 h的黄芩苷对照品10.3 mg～臵50 ml容量瓶中～加流动相溶液溶解至刻度～制成206 μg〃ml-1的溶液～即得。 2.3  供试品溶液的制备精密吸取福乐欣口服液1 ml～臵50 ml容量瓶中～加流动相溶液适量超声提取10 min～定溶至刻度～摇匀～滤过～取续滤液作为供试品溶 液。精密吸取缺黄芩阴性口服液1 ml～照上法制备～即得阴性对照溶液。 2.4  线性关系考察精密吸取黄芩苷对照品溶液2～6～8～14和20 μl～按2.1项下色谱条件进行测定～以黄芩苷对照品溶液面积的积分值为纵坐标～进样量为横坐标～进行线性回归～结果表明进样量在0.412，4.12 μg线性关系良好～回归方程为y=3 234 335x+86 410.37(r=0.999 5,n=5)。 2.5  进样精密度实验准确进样10 μl黄芩苷对照品溶液,206 μg〃ml-1,5次～峰面积计算～结果RSD=0.53%,n=5,。色谱图见图1a。 2.6  干扰实验取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液～注入高效液相色谱仪。结果供试品、对照品溶液均在相同的保留时间内出现吸收峰～而阴性对照液在此无吸收峰出现～结果见图1。 2.7  稳定性实验每隔30 min准确进样黄芩苷对照品溶液及供试品溶液各10 μl～经3 h测定～结果峰面积积分值无变化。 2.8  重复性实验平行吸取6份样品,批号为20050602,～按2.3项下方法处理后～进样10 μl～计算结果～RSD=1.01%。 2.9  加样回收实验精密吸取缺黄芩阴性口服液6份～每份1 ml～臵50 ml容量瓶中～各精密加入一定量的黄芩苷对照品～加流动相溶液适量超声提取10 min～放冷至室温～加流动相溶液臵刻度～摇匀～滤过～取续滤液作为供试品溶液～按照2.1项下的色谱条件测定～进样10 μl～记录峰面积并计算回收率。结果见表1。 表1  黄芩苷回收率测定结果,略, 2.10  样品含量测定精密吸取供试品溶液10 μl～注入高效液相色谱仪～测定峰面积积分值～按外标法计算含量～样品中黄芩苷含量结果见表2。表2  福乐欣口服液中黄芩苷测定结果,略, 3  讨论     中药复方制剂～药味较多～成分复杂～干扰较大～不易测定某一成分含量。本实验以黄芩的主 要成分黄芩苷作为质量控制～具有一定代表性。根据文献～选用甲醇溶解样品,2,3,～但色谱峰拖尾～分离效果不好～改用 1流动相溶解样品可消除此现象。曾筛选了十余种流动相系统～本法的测定分离效果较好～柱效较高～以黄芩苷峰计算可达2000。     本制剂中黄芪为君药～因此～试图以黄芪中的成分定量～但含量甚少～不易定量。     样品不需要分离等复杂的操作过程～从样品与对照品的色谱图峰位可看出～它们的保留时间一致～6 min即可分离。本方法基本消除了其它组分的干扰～分离效果好～专属性强～稳定性和重现性良好～为质量控制提供了可靠的方法。根据对5批样品的测定结果～可将本品含量限度定为每毫升本品含黄芩苷不得少于6 mg。 【参考文献】   ,1,严劲松～黄朝建～高申蓉～等.高效液相色谱法测定肺炎?号合剂中黄芩苷的含量,J,.中国药房～2006～17,3,:214. ,2,国家药典委员会.中国药典～?部,S,.北京:化学工业出版社～2005:211. ,3,潘 磬.高效液相色谱法测定银黄胶囊中绿原酸及黄芩苷的含量,J,.中国现代应用药学～2003～20,6,:493.