低温胁迫下戊唑醇和苯醚甲环唑种子包衣对玉米种子出苗和幼苗的影响

低温胁迫下戊唑醇和苯醚甲环唑种子包衣对玉米种子出苗和幼苗的影响 玉米适宜生长的温度为18,25? ，在环境温度低于l2?时即有低温伤害发生，而玉米对低温最敏感的时期为发芽和幼苗阶段 。已有的研究结果明，低温胁迫能促进植物体内活性氧(reactive oxygen species)的产生，活性氧的累积对植物细胞结构可产生不可逆伤害，其中细胞内的膜系统为最容易受到伤害的位点，原因在于活性氧能对膜脂质中的不饱和脂肪酸产生过氧化作用，使膜上的脂质由液晶态转变为凝胶态，从而使生物膜的通透性增加。 在实际农业生产中，玉米种子包衣作为一项植物病虫害防治被广泛采用，但中国北方地区玉米种子包衣发生低温药害的现象时有发生，已有的研究也表明烯唑醇在低温下可影响玉米种子萌发和出苗。近年来，三唑类杀菌剂戊唑醇广泛用于玉米种子包衣，其有效剂量为6,24 g,100 kg种子，也发现其同类化合物苯醚甲环唑包衣玉米种子后可防治玉米丝黑穗病 ，有效剂量为10,30 g,100 kg种子。在实际生产中关于戊唑醇种子包衣玉米种子后发生低温药害的事件已有发生，但关于戊唑醇和苯醚甲环唑种子包衣后在低温胁迫下对玉米种子萌发及幼苗生长影响的理论研究还未见报道。本研究以玉米适宜生长温度为对照，研究不同低温胁迫下戊唑醇和苯醚甲环唑包衣后对玉米种子出苗和玉米幼苗的影响，以期对玉米种子包衣和玉米播种提供一定的指导作用。 1 材料与方法 1(1 试验材料 玉米品种为农大108，供试药剂为3,苯醚甲环唑(difenoconazole)和3,戊唑醇(tebuconazole)悬浮种衣剂，均为本实验室自制。两种悬浮种衣剂采用相同助剂配伍，即5(O, 悬浮分散剂(烷基酚聚氧乙烯醚+烷基萘磺酸盐甲醛缩合物，江苏钟山化工有限公司)、4(0, 乙二醇(北京化学试剂公司)、0(17, 黄原胶(江苏金湖黄原胶厂)和8(0, 聚乙二醇(北京化学试剂公司)。 1(2 试验方法 1(2(1 试验设计3, 苯醚甲环唑种衣剂包衣剂量(有效剂量，下同)分别为10、20、30 g,lO0 kg种子，3, 戊唑醇种衣剂包衣剂量分别为6、12、24 g,100 kg种子，同时设无药剂空白对照，处理种子播种于塑质花盆( =12 cm，h=10 cm)内，每处理玉米种子100粒，设3次重复。种子播种后置于人工低温培养箱内，于25 oC,20?(白天,晚上，下同)培养60 h后(种子萌动)，调至胁迫温度，分别为17?,6? 、15?,0? 、1O? ,0? ，培养6 d，而后将其温度调至适宜温度(25 oc,20oC);光照周期均为12 h,12 h(白天,晚上)。播后第15 d对玉米幼苗的形态指标(株高、单株鲜重，中胚轴长度)进行调查。 1(2(2 生理指标的测定 丙二醛浓度的测定参照邹琦的方法 ;叶绿素含量的测定参照朱广廉等的方法;相对电导率的测定采用文献的方法;根系呼吸速率的测定参照氧电极法，测定温度25? 。 1(3 数据处理 采用DPS统计软件，分析方法采用一元方差分析，以α =0(05为显著性水平。 2 结果与讨论 2(1 对玉米种子出苗率的影响 从表1(略)中无药剂处理玉米种子在不同温度下的出苗率可以看出，播种后低温胁迫能降低玉米种子出苗率。而与对照相比，戊唑醇和苯醚甲环唑包衣处理在25 oC,20? 下 de boca de dent és més gran que la pinça de canonada de 0.5-0.8M/m 20 1 i pinça mare greus desgast 2 i vareta de cargol, i Eix de rosca per lligar la liquidació és superior a 1-1.5M / m 21 Taiwan cargol 1, cargol canya i liquidació de rosca i la liquidació de distribució corredissa és superior a 1,5 a 2 m/m 2 i ontologia ha cruixit 3 i liquidació de la mandíbula és més gran que 0.3M / m 22 en directe els millors 1 i els millors radial batec és més gran que 0,07 m/m 2 i la part superior de la cua con part greu desgast 3 i que s'executen fracàs 23 tornavís 1 i vora duresa prou o alta 2 i nanses Departament esquerdes 24 Serra de metalls Marc 1 i abans i després responsable galeria trenat, és no un avió dins eina elèctrica 25 1, i Part elèctrica fracàs 2 i mecànica part danyat no pot córrer 26 roda 1 i restants diàmetre diàmetre original de gruix 2 i restant cèntim de gruix original de dos terços 3, segons tramitació situació roda consum força complir no processament requisits 27 1 de diamant i per la direcció de diamant acostar implementació 28 diversos mesura 1 i els plans de sector verificació de mesura d'aplicació individual de ferralla 29 altra eina 1 i per la situació específica mitjançant l'ús que va proposar fer supervisor de tecnologia eina validació 18 article màquina i proporciona eina de treball equipades amb: Eines equipades amb fixes es refereix a la màquina, tipus i grup un nombre fix d'eines comuns utilitzats, raonablement equipades i pagat, per tal de facilitar la producció, gestió d'enfortir, eines de desenvolupament proporcionen proves importants per quota de consum i d'emmagatzematge. 19 equipades amb principi és: basat 对玉米种子出苗无不利影响，但随处理温度的降低，戊唑醇和苯醚甲环唑均表现出对玉米种子出苗的抑制作用，且在相同的包衣剂量下，胁迫温度越低，对出苗的抑制越严重。即戊唑醇和苯醚甲环唑包衣处理玉米种子能加剧低温胁迫所致的玉米种子出苗率下降。 2(2 对玉米幼苗生长发育的影响 曾有报道指出，戊唑醇在低于1(2 g,100 kg种子的包衣剂量以下对小麦幼苗生长无影响，而高于此剂量则有抑制作用 。从表2(略)可知，在25 ?,20?下，戊唑醇和苯醚甲环唑对玉米幼苗株高和植株鲜重均无显著影响，但在l7?,6? 、15?,0?、1O?,0?下则有显著的抑制作用(α =0(05)，且随处理剂量的增加，对株高和植株鲜重的抑制也相应增强。 在相同剂量下比较不同胁迫温度的影响，可以发现l5?,0? 时戊唑醇和苯醚甲环唑对玉米幼苗株高和植株鲜重的抑制作用最严重。相比同温度下的无药剂对照，在24 g,lO0 kg剂量下，戊唑醇在l7?,6? 下对幼苗株高的抑制率为20(85, ，对植株鲜重的抑制率为16(70, ;15~C,0?下对幼苗株高的抑制率为27(26, ，对植株鲜重的抑制率为25(50, ;10?,0?下对株高的抑制率为13(6, ，对鲜重的抑制率为11(00, 。在6和l2 g,100 kg剂量下，15 ?,0?时戊唑醇对玉米幼苗株高和植株鲜重的抑制作用亦最严重。不同剂量下苯醚甲环唑对玉米幼苗株高和鲜重的抑制亦如此。 在玉米组织中，中胚轴相比其他组织更容易受到低温胁迫伤害 。表2显示戊唑醇在25?,2O?下对中胚轴的生长具有一定促进作用，但在低温胁迫下则表现为抑制作用，且以15~C,0~C下的抑制最严重。苯醚甲环唑在25?,20 oC下对中胚轴的生长无显著影响(α =0(05)，在低温胁迫下则与戊唑醇的抑制作用相似，且在15?,0?下的抑制最严重。 2(3 对玉米幼苗中丙二醛含量的影响 植物在遭受低温胁迫以后，细胞内的生物膜系统很容易受到活性氧的攻击，使膜上的脂质发生过氧化作用，产生丙二醛，而丙二醛的产生又进一步加剧对膜系统的伤害。因此，植物组织中丙二醛的含量越多说明由于低温胁迫下生物膜上的脂质过氧化越严重，受到的伤害也越严重。由图1(略)可看出，低温胁迫后的各药剂处理与同温度下的无药剂对照相比，丙二醛含量均有显著增加(P<0(05)，且随处理药量的增加，玉米幼苗中的丙二醛含量亦相应增加。由此说明在有效处理剂量下，戊唑醇和苯醚甲环唑包衣处理种子能加剧低温胁迫所致脂质过氧化作用。 进一步比较可以发现，在相同剂量下当低温胁迫温度为l5?,0? 时膜脂质的过氧化表现最为突出。在戊唑醇的有效包衣剂量为12 g,100 kg时，15?,0? 胁迫下幼苗组织中丙二醛含量为0(015 0 txmol,g，高于17?,6? 和10?,0? 胁迫下幼苗组织中丙二醛含量;在6和12 剂量下的结果亦类似。同样，苯醚甲环唑在不同包衣剂量下亦是15?,0?胁迫时幼苗组织中丙二醛含量高于l7?,6?和10?,0?下丙二醛的含量。出现这一现象可能与生物对逆境的适应性有关，因为在3个低温胁迫温度区间中，15?,0? 的 o变换幅度最大。而H0l6等研究发现，玉米幼苗经低温(14,18,0,5 C ，白天,夜晚)处理后出现光合抑制作用，但快速升温至适宜生长温度的玉米幼苗比缓慢逐渐升温的玉米幼苗恢复性差。 2(4 对玉米幼苗叶绿素含量的影响 光合系统对低温胁迫的敏感性是影响玉米产量最重要的因素之一，玉米植株遭受低温 de boca de dent és més gran que la pinça de canonada de 0.5-0.8M/m 20 1 i pinça mare greus desgast 2 i vareta de cargol, i Eix de rosca per lligar la liquidació és superior a 1-1.5M / m 21 Taiwan cargol 1, cargol canya i liquidació de rosca i la liquidació de distribució corredissa és superior a 1,5 a 2 m/m 2 i ontologia ha cruixit 3 i liquidació de la mandíbula és més gran que 0.3M / m 22 en directe els millors 1 i els millors radial batec és més gran que 0,07 m/m 2 i la part superior de la cua con part greu desgast 3 i que s'executen fracàs 23 tornavís 1 i vora duresa prou o alta 2 i nanses Departament esquerdes 24 Serra de metalls Marc 1 i abans i després responsable galeria trenat, és no un avió dins eina elèctrica 25 1, i Part elèctrica fracàs 2 i mecànica part danyat no pot córrer 26 roda 1 i restants diàmetre diàmetre original de gruix 2 i restant cèntim de gruix original de dos terços 3, segons tramitació situació roda consum força complir no processament requisits 27 1 de diamant i per la direcció de diamant acostar implementació 28 diversos mesura 1 i els plans de sector verificació de mesura d'aplicació individual de ferralla 29 altra eina 1 i per la situació específica mitjançant l'ús que va proposar fer supervisor de tecnologia eina validació 18 article màquina i proporciona eina de treball equipades amb: Eines equipades amb fixes es refereix a la màquina, tipus i grup un nombre fix d'eines comuns utilitzats, raonablement equipades i pagat, per tal de facilitar la producció, gestió d'enfortir, eines de desenvolupament proporcionen proves importants per quota de consum i d'emmagatzematge. 19 equipades amb principi és: basat 胁迫后能诱导产生光合抑制作用，影响光合电子传递。此外，低温胁迫产生的活性氧对叶绿体类囊体膜上的不饱和脂肪酸产生过氧化作用，导致叶绿素降解。由图2(略)可以看出，25?,20?时，戊唑醇在6、12、24 g,lO0 kg包衣剂量下处理的植株中叶绿素的含量分别为3(13、3(17、3(35 mg/g，苯醚甲环唑在10、20、3O g,100 kg包衣剂量下处理的植株中叶绿素的含量分别为3(23、3(37、3(34 mg,g，而在此温度下对照植株叶绿素的含量为3(12 mg,g。表明戊唑醇和苯醚甲环唑在适宜温度下可提高玉米幼苗叶绿素含量，且随包衣处理剂量的增加，叶绿素含量相应增加。 但低温胁迫下戊唑醇和苯醚甲环唑对叶绿素含量的促进作用消失。在17?,6? 和10?,0? 时，戊唑醇和苯醚甲环唑处理的玉米幼苗中叶绿素含量与对照差异不显著(α =0(05);在l5? ,0? 下，叶绿素的含量则出现下降，其中戊唑醇包衣处理的幼苗比对照下降了7(29, ,20(74, ，而苯醚甲环唑处理的幼苗比对照下降了8(61, ,24(98, 。 结合前面提到的玉米幼苗中的丙二醛含量分析可以推测，戊唑醇和苯醚甲环唑在不同温度下对玉米幼苗中叶绿素含量的影响存在差异，可能是因为戊唑醇和苯醚甲环唑能加剧低温胁迫下的玉米幼苗体内的过氧化作用，从而加剧对幼苗体内叶绿素的破坏。 2(5 对玉米幼苗叶片中电解质外渗情况的影响 低温胁迫能引起低温敏感型植物的膜脂质发生相变，导致细胞内电解质外渗，而玉米属于对低温敏感性非常强的植物，叶片细胞在低温胁迫时产生的电解质外渗现象比较严重 。细胞内电解质的外渗程度可以通过细胞相对电导率的大小来表征。细胞电导率越高，细胞内电解质的外渗越严重，植物或细胞的膜系统受到的伤害也越严重。从图3看出，经系 列低温胁迫后，各处理整体表现为胁迫温度越低，细胞的电导率越大，细胞的膜系统受损程度越重。但戊唑醇和苯醚甲环唑包衣处理后对叶片细胞电导率的影响不同。戊唑醇包衣剂量为6 g,100 kg时，叶片细胞电导率与对照无显著性差异(Ot=0(05)，但在12、24 g,100 kg下包衣处理的叶片细胞电导率比对照高7(00,一l6(31, ，且处理剂量越大叶片细胞电导率越高，表明戊唑醇处理加剧了由低温胁迫导致的细胞电解质外渗。苯醚甲环唑在1O g,100 kg剂量下包衣处理的叶片细胞电导率与对照差异不显著( a=0(05)，但在20、30 g,100 kg剂量下处理的叶片细胞电导率比对照的低，且处理剂量越大叶片细胞电导率越低，表明苯醚甲环唑包衣处理玉米种子能有效减少由低温胁迫导致的细胞电解质外渗。戊唑醇和苯醚甲环唑同属于三唑类杀菌剂，但对细胞电解质外渗的影响截然相反，其原因还有待进一步研究。仅从这一点分析，苯醚甲环唑用于玉米种子包衣可能比戊唑醇更安全。 2(6 对玉米幼苗根系呼吸速率(耗氧速率)的影响 呼吸作用是植物重要的生理活动，呼吸作用的强弱可影响植物的各项生理活动。玉米幼苗受到低温胁迫后，重置于适宜温度下的呼吸作用强弱代表着幼苗对伤害的补偿和修复 oo能力。图4显示玉米幼苗从不同低温胁迫环境转移到适宜温度环境(25 C,20C)后根系的耗氧速率，耗氧速率越大则根系的呼吸作用越快。如图4(略)所示，在l7? ,6? 、15?,0? 和10? ,0? 低温下，戊唑醇6 g,100 kg剂量处理与同温度下的无药剂对照相比具有提高根系呼吸速率的作用，但在12、24 g,lO0 kg剂量下则表现为抑制作用，且随剂量的增大抑制作用加强。在17?,6? 、15?,0? 和l0?,0?低温下，苯醚甲环唑包 de boca de dent és més gran que la pinça de canonada de 0.5-0.8M/m 20 1 i pinça mare greus desgast 2 i vareta de cargol, i Eix de rosca per lligar la liquidació és superior a 1-1.5M / m 21 Taiwan cargol 1, cargol canya i liquidació de rosca i la liquidació de distribució corredissa és superior a 1,5 a 2 m/m 2 i ontologia ha cruixit 3 i liquidació de la mandíbula és més gran que 0.3M / m 22 en directe els millors 1 i els millors radial batec és més gran que 0,07 m/m 2 i la part superior de la cua con part greu desgast 3 i que s'executen fracàs 23 tornavís 1 i vora duresa prou o alta 2 i nanses Departament esquerdes 24 Serra de metalls Marc 1 i abans i després responsable galeria trenat, és no un avió dins eina elèctrica 25 1, i Part elèctrica fracàs 2 i mecànica part danyat no pot córrer 26 roda 1 i restants diàmetre diàmetre original de gruix 2 i restant cèntim de gruix original de dos terços 3, segons tramitació situació roda consum força complir no processament requisits 27 1 de diamant i per la direcció de diamant acostar implementació 28 diversos mesura 1 i els plans de sector verificació de mesura d'aplicació individual de ferralla 29 altra eina 1 i per la situació específica mitjançant l'ús que va proposar fer supervisor de tecnologia eina validació 18 article màquina i proporciona eina de treball equipades amb: Eines equipades amb fixes es refereix a la màquina, tipus i grup un nombre fix d'eines comuns utilitzats, raonablement equipades i pagat, per tal de facilitar la producció, gestió d'enfortir, eines de desenvolupament proporcionen proves importants per quota de consum i d'emmagatzematge. 19 equipades amb principi és: basat 衣处理的幼苗与同温度下无药剂对照相比，根系的呼吸速率均得以提高，且在处理剂量范围内随剂量加大促进作用增强。这一点也证明苯醚甲环唑用于玉米种子包衣比戊唑醇更安全。 3 结论 用戊唑醇和苯醚甲环唑进行种子包衣，在适宜生长温度(25 ?,20?)下对玉米种子出苗具有促进作用，虽然对玉米幼苗的株高和鲜重无抑制作用，但能提高玉米幼苗植株的叶绿素含量。在低温胁迫下，戊唑醇和苯醚甲环唑均能加剧由低温胁迫导致的过氧化作用和对叶绿素的分解。然而，苯醚甲环唑能抑制由低温导致的细胞内电解质外渗，戊唑醇却会加剧电解质的外渗。研究根系的呼吸作用也可以发现，苯醚甲环唑比戊唑醇更有利于玉米幼苗补偿和修复低温胁迫所致的伤害。