依托泊苷自乳化胶囊体外评价-中国医药指引

依托泊苷自乳化胶囊体外 陈晓梅 安徽环球药业股份有限公司，安徽 蚌埠 233010 【摘要】目的 测定自制依托泊苷自乳化胶囊的药物含量及体外释放。方法 高效液相色谱法测定制剂中依托泊苷的含量及自乳化胶囊的体外溶出度。结果 三批样品标示量百分含量分别为97.8%、97.5%和99.9%；水溶液中，供试制剂在20min时释药完全。结论 制备的自乳化胶囊含量符合药典规定；自乳化胶囊的体外溶出度明显高于市售胶囊。 【关键词】依托泊苷；自乳化胶囊；含量测定；体外溶出度 中图分类号：R927.2              文献标识码：B 依托泊苷（etoposide）为鬼臼毒素（podophyllotoxin）的糖代谢产物，属细胞周期特异性抗肿瘤药物，主要用于治疗小细胞肺癌、淋巴癌等[1]。目前主要有片剂、胶囊、注射剂等剂型供临床使用，这些剂型在胃肠道溶出度较差，生物利用度不高，制成自乳化微乳制剂可提高其溶出度，有助于药物的吸收，且有望解决临床口服制剂存在的因溶解吸收不同而导致的个体差异较大的问[2]。本文研究测定依托泊苷自乳化胶囊的含量和体外溶出度，以便更好的研究其体内给药情况。 1 仪器与试药 岛津高效液相色谱仪，色谱柱：VP-ODS色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)，CBM-102色谱工作站。依托泊苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号10）；依托泊苷（江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：070502)；依托泊苷自乳化胶囊：浙江瑞达药业有限公司杭州赛利药物研究所制备（批号：081009，081025，081106，规格：25mg/粒）；进口依托泊苷胶囊(参比制剂，日本化药株式会社，规格25mg/粒，批号：RH0312)。 2 实验方法 2.1 依托泊苷自乳化胶囊的制备 经预试验[3]，以自乳化时间和乳化粒径为指标，以表面活性剂吐温80、助表面活性剂丙二醇与油相硬脂酸作为研究的3 因素，每因素设计3水平，即3×3析因设计，按照L9（34）正交设计表试验。最终确定处方为：1g/粒胶囊中依次加入25mg依托泊苷原料药和10%苯甲醇、2%枸橼酸、13%吐温80、10%丙二醇、62.5%油相硬脂酸，混匀，经含量测定合格后装入胶囊，制备成25mg/粒的托泊苷自乳化胶囊。 2.2 样品测定 2.2.1 样品的制备 对照品溶液的制备：精密称取依托泊苷对照品2.51mg，置10mL容量瓶中加甲醇定容，制得251μg·mL-1的对照品贮备液。精密量取贮备液1mL置10mL容量瓶中，用流动相稀释，定容，即得。 供试品溶液的制备：精密称定依托泊苷胶囊内含物1.0g，置10mL容量瓶中，加甲醇8mL，超声10min，放至室温，加甲醇至刻度，精密量取上述溶液1mL置100mL容量瓶中，加流动相定容，制得供试品溶液。 2.2.2 色谱条件 日本岛津高效液相色谱仪(LC-10ATVP、SPD-10AVP、CBM-102色谱工作站)，VP-ODS色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)；流动相 甲醇-水(70∶30)；波长：284nm；流速：1.0mL/min；柱温：室温；进样量：20μL[4]。取对照品溶液、供试品溶液和空白溶液分别进样，记录色谱图，见图1。由图1可见，依托泊苷与其他成分分离完全，专属性好。 A：空白溶液                  B：供试品溶液                  C：对照品溶液 图1 专属性HPLC谱图 2.2.3 线性关系考察 分别精密量取对照品贮备液0.1、0.5、1、1.5、2mL各置25mL容量瓶中，加流动相至刻度，制成梯度浓度的依托泊苷对照品溶液，依次测定。以对照品溶液浓度（C）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，绘制曲线，得回归方程为A=19682C–6846 (R=0.9998)。表明依托泊苷在1～20 μg/mL范围内具有良好的线性关系。 2.2.4 精密度、重现性和稳定性试验 取对照品溶液，按2.2.2条件连续进样测定10次，计算得依托泊苷峰面积的相对标准差（RSD）为0.7％（n＝10）。精密称取依托泊苷胶囊内容物0.5、1.0、1.5g，各3份，各置50mL容量瓶中，按2.2.1配制方法制备，分别进样测定，计算得依托泊苷的平均含量为98.6％，RSD为0.8％（n＝9）。取同一浓度供试品溶液，分别于0、1、2、4、6、8、10和12h进样测定，计算得依托泊苷的平均含量为98.2％，RSD为0.56％（n＝8），结果表明供试品溶液在12h内稳定。 2.2.5 加样回收率试验 取依托泊苷对照品20、25、30mg，各3份，置50mL容量瓶中，加入适量空白微乳，超声溶解10min，放冷至室温，加空白溶液定容，得待测溶液。按2.2.1配制方法处理，进样测定，计算得依托泊苷平均回收率为99.8％，RSD为0.9％（n＝9）。 2.2.6 样品含量测定 取供试品内容物约1.0g，精密称定，按“2.2.1”项下供试品溶液方法处理，精密量取续滤液20μL，进液相，计算含量。结果见表1。 2.3 释放度的测定 2.3.1 测定方法： 照中国药典2005 年版溶出度测定法第二法（桨法），以水900mL为溶出介质，转速200r/min，37℃，依法操作。分别于5、10、20、30、40min 取溶出液10mL（补充同体积、同温介质），0.45μm 滤膜滤过。取续滤液用高效液相色谱法（HPLC）测定，计算溶出度。分别测定供试制剂和参比制剂在各取样点的溶出度，溶出曲线见图2。 3 结 果 3.1 样品含量测定 三批样品的含量测定结果，含量占标示量的百分比分别为97.8%、97.5%和99.9%。符合药典有关胶囊剂的要求，见表 1。 表1 样品含量测定结果 批号 含量（mg/粒） RSD（%）n=3 081009 24.46 1.26 081025 24.38 1.21 081106 24.98 0.95       3.2 体外溶出度结果 供试制剂在20min时释药完全，而参比制剂较供试制剂慢10min左右释药完全。可能是由于乳化剂的加入增加了依托泊苷的溶解性，使得依托泊苷更多更快的进入释放溶液中，见图 2。 图2　依托泊苷胶囊释药曲线 4 讨 论 药物自乳化工艺是一种现代化的制药技术，国外研究不多，国内也正起步，现在上市的药品仅有环孢素软胶囊等品种。自乳化释药系统作为一种非常有前景的新剂型，对那些水中不稳定，水溶性差，生物利用度又低的药物意义重大，具有很大的经济和社会效益。 依托泊苷自乳化胶囊在水溶液，使药物自乳化形成乳剂，使得很好的分散在水溶液中。而且，乳剂的形成，较大程度增加了依托泊苷的溶出度，有利于提高药物生物利用度。 参考文献 [1] Aisner J，Lee EJ.Etoposide.Current and future status[J].Cancer，1991，67(1 Suppl):215-219. [2] 袁开红，曹德善，李萌等.依托泊苷软胶囊的研制及人体生物利用度的研究[J].中国医药工业杂志，2004，35(5):279-281. [3] 张桂侠，杜青.依托泊苷自微乳的处方研究 [J].河北医科大学学报，2008，32（3）:401-403. [4] 尹东东，王杏林，赵广荣等.依托泊苷微乳的HPLC测定[J].中国医药工业杂志，2007，38(2):121-122.