【word】 化瘀消脂止痛膏主要药效学研究

【word】 化瘀消脂止痛膏主要药效学研究 化瘀消脂止痛膏主要药效学研究 2011年1月第8卷第2期 化瘀消脂止痛 ? 药理与毒理? 膏主要药效学研究 李德爱,武刚毅,刘峙,李小纪 (青岛市市立医院,山东青岛266011) 【摘要】目的:探讨化瘀消脂止痛膏降血脂及改善血液流变学的作用.:以日本大耳白家兔为高脂模型,以总胆固 醇(TC),三酰甘油(TG),高密度脂蛋白一胆固醇(HDL—C)和低密度脂蛋白一胆固醇(LDL—C)为指标,研究化瘀消脂止 痛膏降脂作用;以Wistar大鼠为血瘀证模型,测定血液流变学相关指标,研究化瘀消脂止痛膏对血液流变学的影响. 结果:化瘀消脂止痛膏能显着地降低高脂动物的胆固醇和低密度脂蛋白一胆固醇,也可降低血清三酰甘油含量,并能 明显降低血瘀证动物的全血黏度,血浆黏度和血纤维蛋白原含量,降低血小板黏附率.结论:化瘀消脂止痛膏能降血 脂,改善血液流变学. 【关键词1化瘀消脂止痛膏;药效学;血脂;血液流变学 【中图分类号】R968[文献标识码]A【文章编号]1673—7210(2011)01(b) 一053—03 StudyonmainpharmacodynamicofHuayuXiaozhiZhitongOintment LjDe氲WUGangyi*,LIUZhi,LIXiaoji (QingdaoMunicipalHospital,Qingdao266011,China) [Abstract]Objective:ToinvestigatetheeffectofHuayuXiaozhiZhitongOintmentondecreasingthebloodlipidandim— provingthehemorheology.Methods:Themalerabbitswereusedasthehyperlipidemiamodels.Thetotalcholesterol(rI1C), triglyeeride(TG),highdensitylipoproteincholesterol(HDL-C)andlowdensitylipoproteincholesterol(LDL—C)wereused astheindexes.TheeffectofHuayuXiaozhiZhitongOintmentondecreasingbloodlipidwasstudied;theWistarratswere usedasbloodstasismodels.Thehemorheologicalindexesweredetected.TheeffectofHuayuXiaozhiZhitongOintmenton thehemorheologywasstudied.Results:HuayuXiaozhiZhitongOintmentcouldgreatlydecreaseTC,LDL—CandTGcon— eentrationofthehyperlipidemiaanimals,andobviouslydecreasedthewholebloodviscosity,theplasmaviscosity,theplas- mafibrinogendeterminationandtheplateletaggregationofthebloodstasisanimals.Conclusion:HuayuXiaozhiZhitong Ointmentcandecreasethebloodlipidandimprovethehemorheology. 【Keywords]HuayuXiaozhiZhitongOintment;Pharmacodynamic;Bloodli pid;Hemorheology 化瘀消脂止痛膏具有行气活血,软坚散结,消肿止痛 的作用,其降脂功效显着,现将其主要药效学研究报道如下: 1材料与仪器 1.1药品 化瘀消脂止痛膏为棕褐色乳膏,主要成分:桃仁,红花, 川芎,当归,赤芍,沉香,白芷,三棱,莪术,冰片,皂刺,穿山 甲.由青岛市市立医院中药制剂室提供. 1.2饲料 普通饲料为富含各种营养的干饲料(青岛市药检所);高 脂饲料由普通饲料加10%的鸡蛋黄干粉混合制成(青岛市药 检所). 1.3动物 日本大耳白家兔(体重2.0,2.5kg,雌,雄均有)和Wistar 大鼠(体重260,300g,雌,雄均有)由青岛市市立医院动物饲 养中心提供. 1.4仪器 日立7170S全自动生化分析仪:LG型旋转筒式血液黏 度测试仪,血小板黏附仪,中科院传感技术公司;3F一3型高 速微量离心机,华兴机轮公司. 2方法与结果 2.1给药方法 实验前24h动物腹部用脱毛膏脱毛(家兔脱毛面积约 通讯作者 15cmxlOcm,大鼠脱毛面积约5cmx3cm),给药时,按组别 不用分别在脱毛区敷药(大,中,小剂量分别为0.9…060.3g/kg), 外用无刺激性纱布,医用胶带固定,使药物与皮肤接触24h, 换药,换药时将局部清洗干净. 2.2对实验性高脂血症兔血脂的影响【1】 取正常日本大耳白家兔50只,在实验环境下喂普通饲 料稳定1周后,通过空腹耳缘静脉取血2.5ml,用Et立7170S 全自动生化分析仪测定兔血清总胆固醇(TC),三酰甘油 (TG),高密度脂蛋白一胆固醇(HDL—C)和低密度脂蛋白一胆 固醇(LDL—C)的含量,然后随机分为5组,每组10只,分笼 饲养.正常对照组:实验全程每El喂普通饲料100g/ks;高脂 模型组:实验开始喂高脂饲料(内含80%基础饲料,15%蛋黄 粉,0.5%胆固醇和5%猪油)100g/kg,待高血脂症形成后(14d), 继续给同量高脂饲料28d,28d后高脂喂养剂量减半;化瘀 消脂止痛膏组:给高脂饲料和喂养方法同高脂模型组, 14d后按”2.1”项下方法加敷化瘀消脂止痛膏,连续用药 42d.在高脂喂养第14天,用药第28,42天分别从兔耳缘静 脉取血测定上述各项指标,结果见表1,4. 结果表明,大耳白家兔摄食高脂饲料前,模型组及给药 组与正常对照组动物血脂水平相比较均无显着性差异摄食 高脂饲料14d后,模型组及给药组动物的血清TC,TG, LDL—C含量均明显高于正常对照组,表明喂高脂饲料家兔 已形成了高脂模型.在喂高脂饲料的同时,外用化瘀消脂止 CHINAMEDICALHERALD由国医药导提53 ? 药理与毒理? 痛膏28d后,小剂量组即有降低血清TC和LDL—C的作用, 但与高脂模型组比较,无显着性差异:中剂量组和大剂量组 对降低血清TC和LDL—C均有显着性差异.继续给药至42d 时,小剂量组对降低血清TC和LDL—C的作用就非常明显: 中剂量组和大剂量组对这些指标的影响则更为明显:同时也 可降低血清TG含量. 2.3对血瘀证大鼠血液流变学的影响 取大鼠60只,称重,随机分成6组,每组10只.正常对 照组,血瘀证模型组均正常喂养,化瘀消脂止痛膏组除正常 喂养外按给药方法外用化瘀消脂止痛膏于第8天,正常对 照组动物继续正常喂养,其他各组均皮下注射肾上腺素 (1mg/kg),共2次,间隔2h,中间将动物置5?冰水中5rain, 取出,禁食20h后,用20%乌拉坦腹腔注射麻醉(5ml/kg), 腹主动脉取血,其中将1.5ml血迅速注入肝素抗凝管内,摇 匀后静置待用(用于测定各项血液流变学指标),1.2ml血迅 速注入枸橼酸钠抗凝管内.摇匀后静置待用(用于测定血小 板黏附率).用旋转简式血液黏度测试仪测定血液和血浆黏 度值;用温式法测定血沉值;毛细管离心法测定红细胞压积 值;以全血高切黏度与红细胞压积之比计算全血还原黏度: 将1ml枸橼酸钠抗凝血加入容量为5ml的长茎园球形瓶 中,将其置于血小板黏附仪转盘上,以5dmin的转速旋转 15rain,测定旋转前后血中的血小板,按下式计算血小板黏 附率:血小板黏附率(%)=(旋转前血小板计数一旋转后血小 板计数)/旋转前血小板计数xl00%.测定结果见表5. 结果表明,模型组大鼠的全血高切黏度,全血低切黏度, 血浆黏度,全血还原黏度,纤维蛋白原和血小板黏附率均明 显高于正常组,血沉和红细胞压积差异无统计学意义.化瘀 消脂止痛膏3个剂量组纤维蛋白原含量均显着低于模型组, 血小板黏附率明显小于模型组,表明该药能明显降低血纤维 蛋白原含量,降低血小板黏附率.大剂量组全血高切黏度,全 血低切黏度,血浆黏度和全血还原黏度显着低于模型组,血 沉低于模型组;中剂量组的全血高切黏度,血浆黏度和全血 还原黏度明显低于模型组:小剂量组的全血低切黏度低于模 型组,表明该药能明显降低全血黏度和血浆黏度. 3讨论 药效学研究表明.化瘀消脂止痛膏能显着地降低高脂动 物的胆固醇和低密度脂蛋白一胆固醇,也可降低血清三酰甘 油含量,并能明显降低血瘀证动物的全血黏度,血浆黏度和 血纤维蛋白原含量,降低血小板黏附率,其作用机制可能与 化瘀消脂止痛膏行气活血,祛瘀止痛的作用有关.有研究表 明,预防性给药在一定程度上能预防高脂血症的形成,治疗 时可降低高脂血症动物血脂和LDL—C,改变载脂蛋白构成 比,调节脂质代谢紊乱.通过调节肝脏低密度脂蛋白受体 转录水平也可预防脂质代谢紊乱,进而达到降血脂的作用旧. 今后更深入的研究还应从作用机制和预防性用药以及对肝 脏的影响等方面考虑,由于老年大鼠比青年大鼠更符合血瘀 症状旧,在血瘀证血液流变学的研究方面可考虑选用老年大 鼠作为血瘀模型. 化瘀消脂止痛膏在降血脂,改善血瘀证血液流变学指标 方面随着使用剂量的增加而增强,如需增强治疗效果.在没 有毒副作用的前提下,使用该药时可适当增加使用剂量. 由于化瘀消脂止痛膏在国内属于首创的外用消脂药物. 54由国医药弓报CHINAMEDICALHERALD 表1 Tab.1Blood 2011年1月第8卷第2期 给高脂饲料前各组动物血脂浓度(mmol/L,?s) pidconcentrationofeveryanimalgroupsbeforegiving highlipidfodder(mmoL,?s) 组别剂量(g)TCTGHDL—CLDL-C 表2连续喂养14d高脂饲料后备组动物血脂浓度(mmoVL,妇) Tab.2Bloodlipidconcentrationofeveryanimalgroupsafterfeeding 堕!旦旦兰!!旦!!皇璺2:苎2 组别剂量 TcTGHDL—cLDL—c (g,kg) 与对照组比较.O.05.”尸?O.0l Comparedwiththecontrolgroup.P<O.05.0.Ol 表3连续给药28d后各组动物血脂浓度(mmol/L,妇) Tab.3Bloodlipidconcentrationofeveryanimalgroupsafter28days 呈堕!型121竺竺2:圭2 组别剂量 TcTGHDL—cIJDL—c (g/kg) 与对照组比较,O.05,?尸<0.O1;与高脂模型组比较,?尸.05,l<嘎 O1 Comparedwiththecontrolgroup.-尸<0.05.P<O.Ol;Comparedwith themodelgroup.尸.<O.05.P<O.0l 表4连续给药42d后各组动物血脂浓度(mmOI/L.露) Tab.4Bloodlipidconcentrationofeveryanimalgroupsafter42days administration(mmol/L,) 组别剂量 cHDL—c TcTGHDL— (g/kg) 与对照组比较,尸<O.05,<o.01;与高脂模型组比较,《嘎O5,p《O1 Comparedwiththecontrolgroup.尸<0.05.P<0.o1;Comparedwiththe modelgroup.Ap<0.05.P<0.Ol 目前还没有类似药物,无法进行药物对照试验,但通过使用 该药前后的数据可以看出,化瘀消脂止痛膏具有较强的降脂 作用. (下转第84页) ? 医学检验? 1.3统计学方法 计量资料采用均数?标准差()表示,所有数据均采用 SPSS15.0软件进行分析.组间比较采用oneway—ANOVA比 较,P<0.05表示差异有统计学意义. 2结果 两种检测方法CMV—IgM阳性率比较.实时荧光定量一 PCR法阳性率高于ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05). 见表1. 表1两种检测方法的GMV—IgM阳性率比较 检测方法阳性例数阴性例数阳性率(%) 实时荧光定量一PCR法802874 量蓬丝堑! 与ELISA法比较.P<O.05 ELISA法检测为阳性的62例妇女采用实时荧光定量一 PCR检测也为阳性,其余l8例实时荧光定量一PCR法检测为 阳性的妇女ELISA法检测均为阴性.笔者分析发现,此18例 标本血清CMV—IgM抗体拷贝数均明显较低(拷贝数<10~/m1). 3讨论 本研究表明.采用实时荧光定量一PCR检测孕前筛查妇 女外周血CMV—IgM抗体水平较传统的ELISA法敏感性及 准确率高,对于孕前筛查可能具有较好的临床价值. 我国是CMV感染高发的国家.且多数人感染后无明显 临床症状,表现为潜伏感染日.然而,孕妇近期感染CMV后, 不仅会对孕妇产生严重影响,如流产,早产,死胎等I引,CMV 还可通过胎盘屏障到达胎儿体内,导致胎儿畸形,发育迟缓 和神经系统发育异常等.检测孕前妇女外周血CMV—IgM抗 体水平是评价CMV近期感染的重要检测指标圈,目前也为广 大临床医师所重视.CMV—IgM抗体一般在病毒感染3,5d 后出现,可维持12,16周,具有出现早,消失快的特点嘲.病毒 2011年1月第8卷第2期 采用敏感性高的检测手段对CMV感染的早期准确诊断具有 重要的临床意义.既往多采用ELISA法,近年来随着实时荧 光定量一PCR技术的普及.有研究报道实时荧光定量一PCR检 测血清CMV—IgM抗体水平也具有较好的敏感性及准确率. 笔者选择108例孕前妇女,同时采用实时荧光定量一 PCR和ELISA法检测外周血CMV—IgM水平,其中实时荧光 定量一PCR阳性率为74%,而ELISA法为57%,两者差异有 统计学意义(P<O.05).进一步分析发现,其中18例实时荧光 定量一PCR阳性的妇女外周血CMV—IgM抗体水平均为低拷 贝数(拷贝数<lO~/m1),提示对于病毒低拷贝数的人群.采用 实时荧光定量一PCR法检测可在一定程度上提高诊断的敏感 性及准确率.实时荧光定量一PCR具有快速,准确,敏感性高 的特点,笔者认为利用其这些特点可以在一定程度上提高 CMV感染检测的敏感性及准确率,但其费用较传统ELISA 法高.这可能也在一定程度上限制了这种技术的临床运用. 总之,笔者认为.实时荧光定量一PCR对孕前妇女CMV— IgM抗体水平的检测较传统ELISA法具有较高的敏感性及 准确率,值得临床推广使用. f参考文献】 …1方峰,董永绥.巨细胞病毒和巨细胞病毒感染的诊断『J].中华儿科杂志, 1999,37(7):397-399. 【2]王德智.巨细胞病毒感染与妊娠fJ】.中国实用妇科与产科杂 志,1995,11 f31:132-134. 『31方群,杜涛.先天巨细胞病毒感染胎儿的临床研究fJ】.中国优生与遗传 杂志,2004,24(1):72—73,76. 【4]尚世强,陶然?L童巨细胞病毒感染的诊断【J】.实用儿科临床杂志,2006, 21(22):1598—1600. 【5】消育权,叶小雅,邱秀群,等.993例女性巨细胞病毒抗体检测分析m.现 代医院.2009,9(5):79—80. [6]应慧强.5826名孕妇巨细胞病毒近期感染检测分析[J].中国优生与遗 传杂志,2005,250):71. 感染的早期或恢复期,血中CMV—IgM抗体水平较低.因此,(收稿日期:2010—11—18) 与正常对照组比较,O.05,O.O1;与血瘀证模型组比较,氏O.05,心O.Ol Comparedwiththecontrolgroup,’P<0.05,P<0.01;Comparedwiththe modelgroup,ap<o.0,Ap<0.01 【参考文献】 【1】俞发荣,石清芳,连秀珍.血脂散对家兔血脂调节作用的实验研究『J1.中 草药.2001.32(5):432—434. 【2]陈奇.中药药理研究方法学fM].北京:人民卫生出版社,2000:564— 566. [3】韩峰,顾振纶,周文轩,等.百草降脂灵对实验性高脂血症的影响及机制 研究【J】.中草药,2000,31(9):689—692. 84中国医药弓报CHINAMEDICALHERALD [4】王文详,顾振纶.百草降脂灵胶囊对实验性高血脂症兔的治疗作用明. 中草药.2002.33(3):253—255. f5】淳泽,李佳楠,陈东辉,等.温胆汤对高脂血症大鼠脂质代谢的影响们. 中国中药杂志,2003.28(12):1184—1187. [6】赵瑛,张宁滨,金成,等.御风胶囊对老年血瘀大鼠活血化瘀作用的实验 研究『J].中成药,2005,27(10):1186—1189. (收稿日期:2010—09—30)