穴位埋线对海洛因依赖大鼠戒断症状、CD4^＋及CD8^＋细胞的影响

穴位埋线对海洛因依赖大鼠戒断症状、CD4^＋及CD8^＋细胞的影响 穴位埋线对海洛因依赖大鼠戒断症状、 CD4^，及CD8^，细胞的影响 6新疆中医药2010年第28卷第1期(总第125期) 4.9用药简约度b. 医家用药有繁有简,却以减少证内治疗药,且 少用证外多余药为优,故引入用药简约度概念,用 下式定义并计算: 6?尺 ?+1 (24) 4.10证治效应度b2 提高疗效,减少副作用或负效应,乃医家治疾 所企望者,故引人证治效应度概念以测度之,用下 式定义并计算: 6昔(25) 4.11辨证论治效价B 精于辨证,善于论治,取舍得宜,权衡有致,规 避风险,以较少药物,收较高疗效,乃大医治疾境界 所在,特引入辨证论治效价概念,以尝试测度之.用 下式定义并计算: 船6l6) 本文所述证势内容尚欠完备,仅适宜于方药一 般功能与证候之对应研究,欲行方药四气,五味,归 经与证候之相关研究,则需建立八纲证势与病位证 势指标,容以另文阐述. 参考文献 【1】周铭心.古今医家临证处方模式方剂计量学研究概述叨.中国中 医基础医学,2008,14(12):950-952. [2]周铭心.古今医家临证处方模式类型分析田新疆中医药,2008,26 (5):1—5. [3]周铭心.方剂计量学研究与指标体系概论叨.中国中医基础 医学,2003,9(7):23—27. [4】周铭心.不同诊治策略的评价—辨证论治计量化研究尝试叨.贵 阳中医学院,1992,14(4):12. [5】周铭心.旁治法概论叨.新疆中医药,2008,26(6):4—7. [6]周铭心.用计量化方法探讨《傅青主女科》方药特点及作者真伪 [J】.中国中医基础医学杂志,1996,2(6):55. 【7】王燕,马燕,周铭心(通讯作者).刘完素治疗中风病方药特色方剂 计量学分析[J]冲医杂志,2009,50(10):945—947. [8】王燕,李杰,周铭心(通讯作者).从《宣明论方》方剂计量学分析刘 完素寒温用药特点叨.中华中医药,2009,24(11):1426—1429. 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(收稿日期:2009—10—28) 穴位埋线对海洛因依赖大鼠戒断症状,CD4圾 CD8细胞的影响 马光明,尹改珍.,蒋凯正,阿斯哈尔, (1.新疆医科大学中医学院研究生,新疆乌鲁木齐830011;2.新疆医科大学中医学院, 新疆乌鲁木齐830011; 3.新疆医科大学附属中医医院,新疆乌鲁木齐830000) 摘要目的:通过观察不同干预方法对海洛因依赖大鼠戒断症状及外周血CD4+CD8,和CD4~/CD8值的 影响,为临床治疗的优选提供理论依据.方法:采用逐日递增法建立海洛因成瘾大鼠模型,随机分为自然戒断 组,美沙酮组,针刺组和穴位埋线组,正常对照组注射等量生理盐水.于造模成功和干预结束后进行催促试验,比较 戒断症状积分变化;采用免疫组化检查外周血CD4+和CD8+细胞百分数,CD4/CD8+值.结果:干预后美沙酮组戒 断症状积分明显低于其它各组(P<O.O1),而针刺组和埋线组与自然戒断组比较差异无显着性(P>0.05);针刺和穴位 埋线可以提高外周血CD4细胞百分数和CD4*/CD8+值,降低CD8+细胞百分数.埋线组与针剌组比较也有差异 (P<0.05o而美沙酮组与自然戒断组问比较则无差异(>O.05).结论:美沙酮可以很好地缓解海洛因戒断症状;穴 位埋线能改善其紊乱的T淋巴细胞免疫功能. 关键词穴位埋线;海洛因依赖;戒断综合征;CIM及CD8细胞 海洛因,1~-乙酰吗啡,系鸦片毒品系列中最 纯净的精制品,是目前我国吸毒者吸食和注射的主 要毒品之一.长期滥用海洛因会对机体免疫系统造 成严重伤害.Brown等于1974年首先提出了滥用海 洛因是造成免疫损害的重要原因.大量临床实践也 证实,海洛因依赖者易患各种感染性疾病及免疫缺 新疆中医药2010年第28卷第1期(总第125期)7 陷性疾病. 针灸疗法作为祖国医学的一朵奇葩,其对机体 免疫功能的调节作用已经被国内,外相关研究所证 实.而有关穴位埋线对海洛因成瘾者T淋巴细胞免 疫功能影响的研究尚未见报道.本实验通过观察不 同疗法对海洛因成瘾大鼠戒断症状和CD4~,CD8细 胞及CN4qCD8+的影响,明确穴位埋线改善戒断症 状及T细胞免疫功能的疗效. 1材料与方法 1.1实验动物 健康雄性SD大鼠50只,新疆医科大学实验动 物中心提供,清洁级;9只为空白对照组,4O只制作 海洛因依赖模型. 1.2动物模型复制 参照相关文献【",海洛因(乌鲁木齐市公安局缉 毒大队提供,纯度98.3%)按逐日递增原则给于腹腔 内注射(ip),空白对照组予等量生理盐水ip.造模过 程中有2只大鼠死亡,原因不祥.于末次给药及治 疗结束后,ip盐酸纳洛酮进行催促实验.采用改进 的柳田知司评分《大鼠催促实验戒断症状观察 》进行评分.造模成功大鼠随机分为自然戒断组, 针刺组,美沙酮组和穴位埋线组. 1.3实验方法 空白对照组,自然戒断组不干预,其余各组第 10d开始给予相应处理.美沙酮组:按逐日递减原 则,每天给予美沙酮灌胃,共14d;针刺组:取关元, 足三里(双侧),每日1次,每次留针20min,7d一个 疗程,共4个疗程;埋线组:关元,足三里(双侧)埋 入"o0"羊肠线,7d一次,共4次.第38d实验结束, 腹主动脉取血lmL. 1.4外周血 T淋巴细胞亚群的检测:将抗凝血置于大鼠淋 巴细胞分离液(北京索来宝)面上,提取单核细胞, 洗2次后所得沉淀即为淋巴细胞.取5uL悬液直接 涂片.将玻片放入固定液(丙酮:甲醛=1:1)中固定, 晾干.免疫组化严格按照北京中杉公司SP试剂盒 所附操作步骤. 1.5结果判断 CD4~,CD8壤达于细胞膜及细胞浆,呈明显的 棕黄色沉淀.随机观察10个高倍(10x40)视野,计 数不少于100个阳性细胞数,计算其百分率. 1.6统计学处理 采用SPSS13.0软件进行统计处理,数据用 表示,满足正态性和方差齐性,采用单因素方差分 析,两两比较用q检验.检验水准仅=0.05. 2结果 2.1戒断症状积分变化 造模成功后各组戒断症状积分与空白组比较 差异有统计学意义(P<0.01).干预后除空白组外各 组积分明显下降,美沙酮组最为明显(尸<O.O1),埋线 和针刺组与自然戒断组间比较无统计学意义 (P>0.05). 2.2干预后各组大鼠外周血 T淋巴细胞亚群变化:海洛因成瘾大鼠CD4圾 CD4VCD8+比值明显下降,CD8+升高.经不同方法干 预后,美沙酮组CD4~,CD4qCD8~~-步下降,CD8 仍呈升高趋势,但与自然戒断组比较,差异无统计 学意义(0.05).而针刺和埋线可以反转上述变化, 与美沙酮组比较差异有统计学意义(P<0.05),以埋 线组尤为明显(P<O.01).见表1. 表1各组戒断症状积分和CD4*,CD8,CIMYCD8~![ 注:与空白组比较.P<0.01;与美沙酮组比较.P<0.01,与自然戒断组比较 "P>O.05;与美沙酮组比较IP>0.05,.l<0.01;与美沙酮组比 较Ap<0.05,"P<0.01 3讨论 中医认为,鸦片辛香苦涩,性燥热而有毒,归十 二经.辛香走窜,苦温燥烈,最能伤阴耗气.在祖国 医学理论中,很早即有"大烟瘾","鸦片烟瘾","发 瘾"等相关记载.但至今对鸦片成瘾的中医病机还 未形成统一.相关研究多从鸦片药性来立论网.中医 8新疆中医药2010年第28卷第1期(总第125期) 认为鸦片辛香苦涩,性燥热而有毒,归十二经.初吸 时其气辛香,可开泄气道,振奋精神,一旦成瘾则易 损津耗液,伐伤气血,成瘾日久,气机运行失常,最 终导致元气耗竭,脏腑俱损.辨证论治是中医戒毒 的理论基础.本实验以扶正固本培元为治则,选用 足三里和关元穴.足三里是足阳明胃经的合穴,有 调脾胃,养气血,扶正壮阳之功,穴位刺激足三里, 可以调补脾胃,脾胃乃后天之本,气血化源之地,脾 胃强健,气血生化有源,则气血调和,阴阳平衡,营 卫通达,经络疏利;关元穴归于任脉,为小肠募穴, 乃人体元阴元阳关藏之处,"卫气出于下焦,而行于 表,元阴元阳之交点,故名关元"(《内经》).因任脉 为阴脉之海,关元为三阴经与任脉交会处,故刺激 该穴,能调节机体一身阴经气血,使气血充足,运行 有度,为补肾培元,益气保健之要穴.现代实验研究 表明,足三里和关元穴可以提高人外周血中T淋巴 细胞活性,调节机体的免疫功能.穴位埋线是在针 灸理论的指导下,将人体可吸收降解的生物医用肠 线埋入相应穴位,通过羊肠线在俞穴内的生理物理 作用和生物化学变化所产生的刺激信息和能量,经 人体经络腧穴系统作用于全身.它融合了穴位封 闭,针刺,刺血,机体组织损伤的后作用,留针(埋 针)及组织疗法等多种刺激效应.因而,其对海洛因 成瘾者紊乱的免疫功能应有较好的调节作用. 鸦片类物质依赖完整的治疗体系应包括脱毒, 康复和回归社会三个阶段.目前,国内治疗主要集 中在如何帮助其脱毒,并尽可能缓急和控制戒断症 状.临床最常见的脱毒药物为阿片受体激动剂美沙 酮.它的机理是用维持时间长,成瘾性较低的鸦片 受体激动药来部分满足吸毒者的要求,然后将药 量逐渐减少,使戒断症状逐渐消失.美沙酮虽能有 效地控制戒断症状,但它属于鸦片类物质的替代 品,长期使用易产生新的药物依赖.本实验我们观 察到经过美沙酮替代治疗后,戒断症状积分明显低 于其它各组,很好地缓解了戒断症状.而单纯埋线 或针刺未能很好地改善戒断症状.这与国内相关报 道不一致,其原因可能是本实验中所采用的扶正固 本培元之腧穴,可增强机体免疫功能,但不能改善 戒断症状.这仍需要进一步研究验证. 大量的流行病学和临床研究表明,海洛因成瘾 者对感染性疾病存在异常的敏感性,其原因为海洛 因对机体免疫功能的直接影响和致病微生物等因 素共同作用的结果[3].从目前研究来看,阿片类药物 对免疫系统损伤和神经,内分泌系统密切相关嗍.当 长期摄人大量外源性鸦片样物质(EOC)后,会竞争 性地与机体内鸦片受体结合,在神经系统和内分泌 系统的共同参与下,通过直接和间接途径,对免疫 细胞产生抑制作用,导致机体免疫功能紊乱同.本实 验中造模后大鼠外周血CD4+.CD4~/CD8+较空白组 明显下降,CD8增高,提示海洛因对T细胞介导的 细胞免疫产生明显的抑制作用.经不同方法干预 后,针刺和穴位埋线能翻转上述变化,纠正紊乱的 免疫功能,埋线组尤为明显;而美沙酮组则无显着 变化.根据上述结果我们可以看出,穴位埋线可以 通过经络—神经内分泌免疫网络调节机体免疫功 能;此外,羊肠线作为一种异体被埋人体内后,会使 局部淋巴细胞致敏,致敏的CD4+,CD8+fllt胞,通过识 别APC或靶细胞表明抗原肽一MHC?或I类分子 复合物而被活化.目前有关美沙酮对免疫功能影响 的研究结果仍不一致同,通过本实验我们认为美沙 酮具有阿片类物质相似的药理作用,也会通过直接 和间接途径影响免疫系统的多个环节,导致免疫功 能紊乱. 综上所述,美沙酮可以很好地改善海洛因依赖 者脱毒期戒断症状,但长期使用不仅容易形成新的 药物依赖,同时还会损伤机体免疫功能.而穴位埋 线可以很好改善海洛因依赖者紊乱的T淋巴细胞 功能.二者联合应用对改善戒断症状及提高T细 胞功能应有较好的疗效,因此,探讨二者联合的临 床疗效及其机理应成为我们进一步研究的方向 之一. 参考文献 【1】郑春兰,赵永娜,张晓冬,等.海洛因致大鼠依赖及戒断反应的时 效,量效关系叽.中国药物滥用防治杂志,2000,2(25):7-9. 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