[指南]研究阿胶黄精丸对大脑局灶性脑缺血毁伤爱惜后果

[指南]研究阿胶黄精丸对大脑局灶性脑缺血毁伤爱惜后果 研究阿胶黄精丸对大脑局灶性脑缺血损伤保护效果 李畅军 肖梦薄2 (江西中医学院基础医学院妇产科) 摘要: 目的观察阿胶黄精丸对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤的影响。大鼠提前30天灌胃阿胶黄精丸(相当生药量2—10 g，kg)后，采用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，观察大鼠行为学变化、脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH(Px)、脂质过氧化物丙_二醛(MDA)、白细胞介素(1L)-l 13及肿瘤坏死因子(TNF)-Q水平的变化。结果与缺血再灌注损伤组比较，阿胶黄精丸组脑功能受损程度明显改善，脑组织SOD与GSH(Px水平显著升高，MDA、IL(1 13、TNF(a水平显著下降且呈剂量依赖关系。结论阿胶黄精丸对大鼠大脑缺血再灌注诱导的氧自由基、脂质过氧化、各种炎性因子损伤具有良好的保护作用。 关键词:阿胶黄精丸;缺血再灌注损伤:神经保护 中图分类号:R285(5 文献标识码:A DOI:10(39690(issn(1674—8085(2012(01(022 THE PRoTECTIVE EFFECTS oF HUANG JING W AN oN CEREBRAL INJ1JRY AFTER FoCAL ISCHEM IC REPERFUSIoN IN RATS XIAO Yi(sheng2ZHOU Zhi-jun ， (1(Jiang Xi Ji’an Blood Center,Ji’all，Jiangxi 343000，China; 2(The Basic Medicine College，Jiang xi University ofTCM， Nanchang,Jiangxi 330004，China) Abstract Objective:To study the protective efect of Huang Jing Wan on cerebral inj ury after focal ischemic reperfusion in rats(Methods:The rats were treated with Huang Jing Wan—liquid at dose 2一l 0g他by intragastric administration 30 days before the animal model was established by middle cerebral artery occlusion(MCAO)，the changes of the neurological deficits scores，the activities of SOD，GSH(Px and the content of MDA，IL一1 p，TNF一? were investigated(Results:Compared with the contro1(the neurological deficits scores of cerebral occlusion index was significantly improved in Huang Jing Wan treatment,SOD and GSH-Px levels were significantly enhanced，MDA，IL—l p，TNF— levels significantly decreased and depended on the dosage(Conclusion:Huang Jing Wan has the neuroprotective efect against cerebral ischemia—reperfusion in rats via its antioxidant activity( Key words:HuangJingwan;cerebral focalischemic reperfusion; neuroprotective effect 阿胶黄精丸为《和剂局方》所创建，其药物组成精练，包括黄精、阿胶两味，黄酒浸泡两药，蜜制为丸。全方有补益气血、延年益寿、美容防皱之功效【J J，但其对大脑的保护作用研究甚少。本研究采用大鼠火脑中动脉阻断(MCAO)模型，探讨了阿胶黄精丸抗大脑局灶性脑缺血再灌注炎性损伤作用。 l材料与方法 1(1 试验药物 阿胶黄精丸为《和剂局方》所创建，由江西中医学院基础医学院研制，组方为黄精、阿胶(成份比为2:1)。阿胶黄精丸制法:黄酒充分浸泡黄精、阿胶，蜜制为细丸。 药液制备:取阿胶黄精丸充分碾碎成粉未，加水煎煮两次，每次药渣均榨挤，取汁四层纱布过滤，合并两次药液，浓缩至所需浓度(1 g,mL)。 1(2实验动物及分组 雄性SD大鼠48只， (体重240 4-10 g，江西中医学院实验动物中心提供，清洁级，合格)，每批随机分成假手术对照组，缺血再灌注损伤组，阳性药物(六味地黄丸，5 g,kg灌胃)组，阿胶黄精丸低、中、高剂量组(即灌阿胶黄精丸浓缩液，相当生药量2 g,kg，5 g,kg，10g,kg组)，共6组，每组8只动物。 1(3试剂 阿胶黄精丸为洛阳君山制药有限公司生产，超氧化物歧化酶(SOD)、 丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH(Px)生化检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，白细胞介素(IL)(1p、肿瘤坏死因子(TNF)(0【放免试剂盒购自北京福瑞生物公司。 1(4实验仪器 RF(5000型荧光分光光度计(日本岛津)，752分光光度计(上海医用分析仪器厂产品)，DL(6000B型低速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)，DY89(1型电动玻璃匀浆器(宁波新芝科器研究所)，SN(6930 液体闪烁计数仪(上海核所1。 1(5方法 1(5(1大鼠局灶性脑缺血,再灌注损伤模型建立采用大脑中动脉内线栓阻断法(MCAO)【2J建立大鼠右侧大脑中动脉脑缺血,再灌注损伤模型，大鼠用10,水合氯醛麻醉(300 mg,kg，ip)，分离出右侧颈内动脉后向其插入尼龙线栓塞大脑中动脉，缺血2 h后拔出尼龙线，使血流再通，再灌注24 h后进行检测。造模成功标准:动物清醒后爬行时出现向左转圈(追尾现象)或提尾时出现左前肢内收屈曲。假手术对照组仅进行麻醉和血管分离术，不导入栓线，其余各组均进行右侧大脑中动脉脑缺再灌注损伤处理。 给药方法:试验药物组大鼠提前30罐胃黄精细丸粉未，相当生药量分别为2 g,kg，5 g,kg，10 g,kg，每天1次，连续30 d，30 d后行大脑中动脉脑缺再灌注损伤处理;假手术对照组、缺血再灌注损伤 组于同时点灌胃生理盐水1 mL;再灌注末将大鼠断头处死，迅速取出 大脑，取右大脑皮层，制作10~,6o脑匀浆。按试剂盒说明书比色法测定脑组织MDA、SOD、GSH(Px含量。 1(5(3 脑组织IL一1B、TNF一0【含量测定再灌注末将大鼠断头处死，迅速取出大脑，取右大脑皮层，制作10~,5o脑匀浆。按试剂盒说明书方法采用液相平衡竞争放射免疫分析法(RIA)检测脑组织中IL一113、TNF(0【含量。 1(5(4 统计学处理 实验结果用 ? 示，组间比较采用两样本t检验，P<0(05差异为有统计学意义。 2 结果 2(1 阿胶黄精丸对脑MDA含量和SOD、GSH(Px活力的影响阿胶黄精丸各组可以增加大鼠局灶性脑缺血2 h再灌注24 h后的脑组织的SOD 、GSH(Px活性(P<0(05，P<0(01)，减少其MDA含量(P措施

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