低张性慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物研究

低张性慢性缺氧对心肌功能影响的动物研究 上海第二医科大学博士学位论文低张性慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物研究姓名赵鹏军申请学位级别博士专业儿科学心血管指导教师孙锟20050401论文独创性声明飞本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名论文使用授权声明日期塑叫本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定即学校有权保留送交论文的复印件允许论文被查阅和借阅学校可以公布论文的全部或部分可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名导师签名丝日期矽嗨宅低张性慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物实验研究中文详细摘要目的临床上许多疾病如青紫型先心病、阻塞性肺病、睡眠呼吸暂停和先天性支气管肺发育不良等可导致机体出现慢性缺氧缺氧可通过神经一体液等多种途径影响心、肺功能。但是各种慢性缺氧尤其是青紫型先心病所造成的慢性低张性缺氧对心脏结构、功能以及电生理的影响及其机制尚不明了。临床上缺氧对心血管系统的影响主要表现为血压增高右心室心肌肥厚以及心律失常等。有研究表明慢性缺氧情况下主要由血管内皮合成、分泌的血浆内皮素浓度增高长期作用机体可导致肺小动脉收缩中层平滑肌增生内膜增厚从而使血管阻力增加最终形成肺高压和肺心病。同时有实验证实心肌细胞的肥厚、收缩功能异常以及心律失常的发生常和细胞内循环异常有关。是心肌细胞内重要的第二信使细胞内浓度的变化可影响心肌细胞的收缩活动而钙调素和钙钙调素依赖性蛋白激酶是心肌细胞内调节循环的主要蛋白酶其作用于心肌细胞内多种蛋白酶通过调控肌浆网的释放和重摄取来维持细胞内稳态。由个亚基组成分别由四个基因编码和心脏中主要为。当负荷增加导致心肌肥厚时细胞内表达可增加酸中毒时心肌细胞内活性增强通过调节细胞内循环防止蓄积从而维持细胞内稳态。其次还通过调节细胞核的基因表达影响心肌细胞的代谢和合成。临床研究发现通过调控的活性可以增强心衰病人心肌细胞收缩功能和逆转某些病理情况下的心肌肥厚现象。因此本研究通过吸入低氧浓度气体建立缺氧大鼠动物模型模拟临床低张性慢性缺氧疾病的病理改变观察低张性慢性缺氧对心脏结构、心肌细胞超微结构及心功能的影响同时应用酶联免疫吸附法、、等分别研究慢性缺氧情况下血浆、心肌细胞、、和改变并通过激光共聚焦法检测心肌细胞内活动以探讨低张性慢性缺氧对心肌功能的影响机制为上海笫二医科大学博士论文堑畔慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物实验研究临床治疗慢性缺氧性心功能改变提供一个新思路。方法雄性 大鼠天只随机分成三组分别为正常对照组、缺氧周组和缺氧周组。慢性缺氧组大鼠生活在自制缺氧箱中通入的混合气体小时天通气流量升分钟以减少、和水蒸汽在箱中的蓄积从而建立慢性缺氧大鼠模型。对照组大鼠生活在正常环境中两组大鼠喂养条件相同。在实验和周时分别处死相同数量的对照组和慢性缺氧组大鼠进行以下实验观察慢性缺氧对大鼠生长发育和心肌组织形态结构的影响先称量体重然后麻醉大鼠开胸取出心脏剪去心房组织分离右心室肌称量并比较右心室和左心室室间隔。将右心室组织剪成组织块固定后进行电镜检查。观察慢性缺氧对大鼠血浆和心肌组织及表达的影响穿刺心脏抽取血液离心后取血浆用酶联免疫吸附方法检测血浆中浓度用盯一方法检测心肌组织中和的表达。观察慢性缺氧对大鼠心肌组织、的影响用方法检测心肌组织中和的表达用方法检测心肌组织中和蛋白合成。观察慢性缺氧对心肌细胞内循环的影响用简 易酶解法酶解分离心肌组织差速贴壁法纯化心肌细胞培养天用激光共聚焦法检测心肌细胞内活动状况并用处理细胞观察细胞内对循环的影响。结果慢性缺氧对大鼠生长发育和心肌组织形态结构的影响和正常大鼠比较慢性缺氧大鼠体重增长缓慢缺氧周组和周组与对照组比较均有差异??随缺氧时间延长右心室逐渐肥厚右心室左心室室间隔比值增加低张性慢性缺氧对一肌功能影响机制的动物实验研究和对照组比较有显著差异??电镜检查发现慢性缺氧可导致心肌细胞肌丝断裂线粒体变性且随缺氧时间延长而逐渐加重。慢性缺氧对大鼠血浆和心肌组织及表达的影响慢性缺氧使大鼠血浆中浓度升高与缺氧时间成正比。和对照组比较缺氧周时两者即有差异缺氧周时差异更显著。同样慢性缺氧使心肌组织中、表达也升高但两者表现略有差异。在心肌组织中表达随缺氧时间延长而逐渐增加缺氧周、周组和正常组以及缺氧周组和缺氧周组之间比较结果均有差异表达在缺氧、周时和正常组比较结果有差异但缺氧周和缺氧周组之间比较结果无差异。慢性缺氧对大鼠心肌组织、的影响和正常大鼠比较慢性缺氧大鼠心肌组织中、 和的表达随缺氧时间延长而逐渐增加缺氧、周组大鼠和正常比较均有差异缺氧周组和缺氧周组比较和的表达有显著差异的表达水平无差异。检测心肌组织中、和蛋白含量的变化趋势与检测结果相似。慢性缺氧对心肌细胞内循环的影响胰酶和胶原酶混合酶解液分离心肌细胞对细胞损伤小酶解后细胞存活率可达以上差速贴壁法纯化心肌细胞纯度可达。激光共聚焦法检测细胞内活动发现正常心肌细胞和慢性缺氧细胞在作用下其钙波振幅无差异但慢性缺氧细胞钙波时程较正常细胞明显延长。应用后慢性缺氧细胞钙波振幅下降明显和正常细胞比较有差异慢性缺氧细胞钙波变化时程也明显延长和正常细胞比差异更显著。结论吸入低浓度含氧气体可模拟临床低张性缺氧疾病的病理改变。长期缺氧可影响机体的生长发育造成发育迟缓同时可使右心室肥厚、心肌超微结构出现改变从而影响心脏功能并且这种改变髓缺氧时间的延长而逐渐加重。上海第二医科大学博士论文低张性慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物实验研究慢性缺氧导致血浆中含量增加和缺氧时间成正比同时缺氧也使心肌组织中和表达上调。慢性缺氧使心肌细胞内和的和蛋白表达均增加。慢性缺氧可影响心肌细胞内循环在慢性缺氧时对维持心肌细胞内钙稳态起一定作用。关键词慢性缺氧内皮素钙调素钙钙调素依赖性蛋白激酶钙稳态上海第二医科大学博士论文低张性慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物实验研究 ’ 。 斗 — ” — ”一 矿’ “一 上海第二医科大学博士论文低张性慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物实验研究? 瑾戟绐濯岐妾妾飒岐妾飒戟飒皙瑾戟氇氇岐绐妾绐濯岐妾戟氇氇岐妾飒瞠妾飒戟岐愍洫戟飒岐氇氇愍愍妾戟绐妾岐飒岐绐妾绐戟岐癃瑾戟飒戟绐瑾癃氇戟氇愍洫飒绐岐飒戟洫绐瑾戟愍洫飒岐绐妾绐飒岐瞠岐飒癃岐妾岐绐氇岐妾瑾戟瞠妾飒愍濯愍洫飒岐绐妾纭豹岐妾戟岐绐癃飒氇癃戟愍洫飒岐妾洫岐愍濯癃洫岐妾绐戟绐瞠戟岐氇飒绐戟铼岐瑾戟绐愍氇氇绐濯飒氇绐妾飒濯飒绐洫岐氇濯绐濯癃绐戟岐洫洫洫癃戟愍洫飒岐妾皙瑾戟氇氇岐绐妾绐氇绐濯妾氇岐妾飒洫洫妾愍洫岐氇洫岐妾岐洫氇飒愍岐氇氇绐铼飒飒飒濯癃绐戟岐洫绐妾飒戟飒岐洫岐洫岐飒癃铼岐洫洫岐妾戟氇岐妾瑾飒岐妾飒氇铼岐飒戟飒岐洫愍戟妾戟岐癃瑾戟飒戟绐瑾癃铼岐岐岐戟瞠戟氇愍妾戟氇绐濯瑾飒绐洫绐岐洫绐妾岐飒岐绐妾氇飒戟绐愍戟愍洫飒岐妾飒岐瞠岐飒瞠戟绐戟铼氇飒愍癃飒飒氇绐戟绐妾岐癃瑾绐皙岐绐妾飒戟飒氇飒戟愍飒愍辍,飒愍洫飒戟氇飒戟愍飒愍戟绐戟岐绐濯癃绐癃飒氇妾飒戟飒愍妾飒岐绐妾癃氇飒洫岐氇岐妾癃瑾绐皙岐妾岐濯洫氇飒戟绐愍岐妾洫岐妾癃瑾绐皙岐氇濯岐皙飒愍戟绐戟岐飒绐濯岐濯岐飒瑾飒绐洫绐岐洫妾绐氇绐濯癃瑾绐皙岐岐氇氇氇岐氇氇飒愍瞠岐妾洫愍飒氇飒愍癃绐岐妾瑾洫氇濯癃飒濯皙瑾戟氇氇岐绐妾绐妾瘛 飒瑾戟绐飒岐妾皙瑾戟氇氇岐绐妾绐洫妾癃铼氇飒戟妾洫绐飒妾飒洫岐愍濯癃洫岐妾岐妾飒戟岐绐濯癃绐癃飒癃洫氇戟绐妾绐洫楠愍岐瑾濯妾飒铼妾飒飒绐岐妾瞠氇飒岐飒飒濯妾岐氇濯绐瑾飒绐洫绐岐洫妾愍妾戟癃瑾绐皙岐绐妾岐飒岐绐妾氇妾飒绐皙瑾洫绐戟妾铼瑾绐氇氇岐濯飒绐绐戟飒戟飒濯妾飒绐飒岐濯瑾岐戟濯妾飒绐 ? — 卜 —。 — 上海第二医科大学博士论文低张性慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物实验研究 — — — — — 上海第二医科大学博士论文低张性慢性缺氧对心肌功能影响机制的动物实验研究 .