蒡芩慢咽滴丸中黄芩苷的含量测定

蒡芩慢咽滴丸中黄芩苷的含量测定 作者:汪旭～金向群～岳峻威～于翠翠 【摘要】 目的建立高效液相色谱法测定蒡芩慢咽滴丸中黄芩苷含量的方法。方法采用十八烷基键合硅胶色谱柱(250 mm ×4.6 mm～5 μm) ～以甲醇-0.2%磷酸溶液,45?55,为流动相,流速为1.0 ml〃min - 1 ,检测波长为280 nm。结果黄芩苷的线性范围为0.23，1.14 μg( r= 0.999 5)～平均回收率( n=6)为100.05 % (RSD= 0.84 %)。结论该方法简单、迅速、可靠。 【关键词】 高效液相色谱 蒡芩慢咽滴丸 黄芩苷 蒡芩慢咽滴丸是由蟾酥、黄芩、牛蒡子等3味药组成～其中蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍的干燥分泌物～含华蟾酥毒基和脂蟾毒配基。蒡芩慢咽滴丸具有解毒、止痛、开窍醒神之功效～用于痈疽疔疮、咽喉肿痛、中暑神昏、腹痛吐泻。黄芩为方中君药～黄芩苷是黄芩中主要成分～因此本实验采用高效液相色谱法对该制剂中黄芩苷进行含量测定～为其建立质量标准提供了依据。 1 仪器与试药 岛津SPD-10A 高效液相色谱仪,LC-10AT 紫外检测器,KQ-250D 数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。 对照品黄芩苷,批号:0736-200117,购于中国药品生物制品检定所(供含量测定用)～甲醇为色谱纯,其它试剂均为分析纯。 2 方法与结果,1, 2.1 色谱条件 以迪马公司钻石C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm) 柱为色谱柱,甲醇-0.2%磷酸溶液,45:55,为流动相～检测波长为280 nm,柱温为40?。理论板数按黄芩苷(C21H18O11)峰计算应不低于2 500。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36 h的黄芩苷对照品适量～用甲醇制成每毫升含57μg的溶液～摇匀～即得。 2.3 供试品溶液的制备 滴丸研碎～取约20 mg～精密称定～置25 ml量瓶中～精密加入甲醇20 ml～超声处理30 min～放冷～用甲醇定容至刻度～摇匀～ 精密移取1 ml于10 ml容量瓶中～甲醇定容至刻度～摇匀～用微孔滤膜,0.45 μm,滤过～取续滤液～即得。 2.4 阴性对照溶液的制备 按照蒡芩慢咽滴丸的制备工艺制备不含黄芩的药粉,按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。 2.5 阴性干扰实验 将配置好的对照品、供试品及阴性对照溶液按上述色谱条件分别进样10μl～结果表明～阴性样品在与黄芩苷对照品相应的位置上(约43 min)无干扰峰出现,说明处方中其它药味对测定结果无影响。以上3种溶液的色谱图见图1，3。 2.6 线性关系的考察 精密称取黄芩苷对照品适量～用甲醇制成每毫升含57 μg的溶液～分别精密吸取黄芩苷对照品溶液4～8～12～16～20 μl～分别注入液相色谱仪～测定。以进样量为横坐标～以峰面积值为纵坐标绘制标准曲线～其回归方程为Y=3 994 585.53X-13 868～r=0.999 5～结果表明～黄芩苷进样量在0.23，1.14 μg范围内～进样量与峰面 积呈良好的线性关系。 2.7 精密度考察 取同一供试品溶液,重复进样5次,每次10 μl～计算相对标准偏差,RSD为1.14% ,表明精密度良好。 2.8 稳定性实验 分别取放置4～8～12～16～24 h的供试品溶液～测定黄芩苷的含量～以考察其稳定性。RSD为2.40%～表明供试品溶液至少在24 h内稳定。 2.9 重复性实验 取批号为20040205的蒡芩慢咽滴丸～研碎～取适量～6份～精密称定～依法制备供试品溶液～进行测定,计算黄芩苷的平均含量为100.15 mg〃g-1～RSD为1.06%～结果表明重复性良好。 2.10 加样回收率实验 精密称取黄芩苷对照品适量～加入到已测知黄芩苷含量滴丸样 品,批号:20040205～黄芩苷含量为100.15 mg〃g-1～详见重现性实验,中～按供试品溶液制备方法操作～制备供试品溶液～测定黄芩苷的含量～计算回收率～测定结果见表1。结果表明～本法准确可靠。表1 黄芩苷回收率实验结果,略, 2.11 样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl注入液相色谱仪中～测定了3批样品中黄芩苷的含量分别为100.20～99.96～100.09 mg〃g- 1 。 3 讨论 本实验曾考察以甲醇-水,1?1.1,、乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液,用磷酸调pH值为3.2,,32?68,为流动相～但是黄芩苷色谱峰与本制剂中其它药味的色谱峰的分离效果较差～最终选择了《中国药典》中测定黄芩苷的含量的流动相甲醇-0.2%磷酸溶液,45?55,～使制剂中各成分与黄芩苷分离。 黄芩为蒡芩慢咽滴丸的君药～且黄芩中黄芩苷的含量较高～以其作为含量测定指标～能够反应该制剂的质量。因此本品以黄芩苷的含量作为含量测定的指标是合理的。 【参考文献】 ,1,国家药典委员会.中国药典～?部,S,.北京:化学工 业出版社～2005:48～211～265.