碳酸钙泡腾颗粒的人体生物利用研究

碳酸钙泡腾颗粒的人体生物利用研究 碳酸钙泡腾颗粒的人体生物利用研究 3BHAMRAPK.HPLC…fflem0{口na?dt~T&- zos[aLnbiologicalfluids.JChromatographyt1986t880r816 4陈缺嘲.长敏a受体阻滞剂一持拉唑嚎.新药与l岛床, ;;一5 碳酸钙泡腾颗粒的人体生物利用度研究 周无杰洪诤.程小宁赵劲松何文淑-z熊宏智.-__---一_---__--一 (华西医科大学附属职业病防治院成都610041) (1998年1月14日收祷) /077,i' 摘要目的:评价碳酸钙泡腾颗粒的^体生物制用度.:眦原子吸收光谱法测定lo名健康志愿者口服碳酸钙 泡腾颗粒与进口碳酸钙片后的尿钙难度,尿钙总排泄量与尿钙增量为指标评价两种制剂吸收差异.结果:口服 1.2g碳酸钙泡腾颗粒与碳酸钙片后4h尿钙总排泄量分别为0.143nag?(ragCr)与0.109mg?(mgCr),;尿 钙增量分别为0,051mg?(ragCr)与0,031mg?(mgCr),前者均显着高于后者(P<O.O5和P<OO1).结论: 碳酸钙泡腾颗粒的口服生特利用度高子碳酸钙片 廓够 碳酸钙作为一个补钙剂广泛应用于欧美各 国[.近年来,我国也将其作补钙药收入《中国 药典:~1995年版.碳酸钙泡腾颗粒为新型口服 补钙药,该制剂在服用时经泡腾作用形成含枸 橼酸钙络合物的溶液.本试验的目的是考查碳 酸钙泡腾颗粒与碳酸钙片的相对生物利用度, 为临床用药提供理论依据. 1材料与仪器 1.1药品与试剂供试品:碳酸钙泡腾颗粒 (简称:颗粒.200ragCa/袋,由成都望源制药 厂提供,批号960303);参比制剂:碳酸钙片(简 称:片剂,600ragCa"/片.由PaylessDrug StoresINC.wils.nvilleOregon制造,商品名: "PaylessCalcium600",批号025121);对 照品为碳酸钙,分析纯,配成1rag?ral备用; 水为重蒸馏水. 2方法 2.1含量测定采用原子吸收光谱法对尿及血 样进行测定. 2.1.1尿样的测定取尿样本直接或稀释5 倍或1o倍后上机测定ca.使用随行标准法 定量.本法钙浓度在1.o,;.0mg?L范围内 呈线性关系,y一37.2一0.26,,一0.9994. 华西医大药学院四川健益医药工业研究所 2.1.2血样的测定取血浆样本0.5ral于5 mI量瓶中,加入重蒸馏水至刻度后上机测定 Ca".在此范围内血浆中日内RSD为3, 日『可RSD为3.7,最低检测浓度为0.1rag? L,,平均回收率是98.5. 采用自动生化测定仪测定尿肌酐(cr)及 血肌酐(Cr). 2.2生物利用度试验 2.2.1受试者l0名健康男性自愿受试者, 年龄18~20岁,体重60~69kg,经体检,询问 病史(无肾结石,无骨病,无胃肠疾患影响吸收 功能)及临床实验室检查血,尿常规,肝,肾功能 均正常.受试前两周内和受试期间均未服用过 任何药物,受试前一周及试验期间接受统一的 低钙饮食,受试期问禁烟,酒,茶. 2.2.2给药方法10名受试者随机分为两 组,禁食12h后分别用600ml重蒸馏水吞服 l200rag碳酸钙泡腾颗粒与碳酸钙片,间隔一 周后交叉服药. 2.2.3样本收集服药当天晨6:O0排尿.8 :..收集尿液(6:oo一8:oo)井服药,此后分 别收集8:0O一1O;0O,lO:OO一12:OO尿液. 每次收集尿液后饮重蒸馏水300ml.各时问段 尿液测量体积后分取5ml备测.并于给药前与 给药后0.5,1.0,1.5.2.5,3.O和4.0h自上肢 ? 533? 静脉采集静脉血3ml,离心分取血浆备测.尿 样与血样均在12h内测定. 2.3数据处理尿钙排泄换算方法参照文 献口进行. 3结果 3.1尿钙变化碳酸钙泡腾颗粒与碳酸钙片 剂在尿中的排泄于服药后第一阶段的2h(8— 10am)与禁食服药前2h(6—8am)相比均有 所提高,其尿钙排泄的增高值分别为0.35士o.2 与0.294-0.I4mg?(LGF),,两种制剂问差异 无显着性(P>0.05)第二阶段2h(10—12 am)两组的尿钙排泄非常显着地高于服药前, 颗粒与片剂排泄钙的增值分别为1.374-0.25与 0.77士0.13mg?(LGF)(P<0.01),前者尿 钙排泄要高于后者78(P<0.o1).用药后4h (8—12am)颗粒与片剂尿钙排泄累积增值分 别为0.051士0.017与0.031士0.030mg?(mg Cr)(P<o.01),前者比后者升高65i用药 后4h(8—12am)颗粒与片剂尿钙排泄分别为 0.143士0.033与0.109士0.030mg?(mg Cr),前者比后者升高31(P<o.05)见 1. 寰1进口碳酸钙片殛国产碳酸钙泡舛颗粒ca吸收试 验 集尿时闻 2组比 尿c日】组2组 % 两种钙刑显署性比较:'.P<O-05,P<0.01.Cr=肌酐, ?增值 3.2血清钙浓度的变化颗粒与片剂服药前 (8l00am)与服药后的第4小时(12:O0am) 血清钙值均基本一致,分别为99.87与101.6 mg?L和101.4与101.9mg?L(即2.49与 2.54和2.53与2.54mmo|?L)范围,两组无 明显差异(P>o.05).说明服钙剂后4h,血清 钙已恢复至禁食时的水平. ? 534? 4讨论与小结 4.1钙制剂口服人体生物利用度与许多其他 药物以血药浓度算得的药动学参数计算生物利 用度不同.由于钙剂血药浓度受机体生理性调 节及其他因素影响,较不规则,作为人体生物利 用度评价其意义十分有限近年有以放射性同 位素钙测定钙在粪便的排出和测定尿钙排泄评 价钙经肠吸收,并认为这两法的平衡性较 好口]本试验参照NicalMJ等的枸橼酸 钙生物利用度的设计,按相同的尿钙排泄的换 算方法其结果也颇相似.口服碳酸钙泡腾颗粒 (含枸橼酸),也发现尿钙排泄以服药后的第二 阶段2h(10—12am)的尿钙排泄为最多,其尿 钙排泄增值(?)要比片剂高78.用药后4h 的尿钙排泄也明显高于碳酸钙片剂约31;用 药后4h(8,12am)的尿钙排泄的增加值(?) 更明显高于碳酸钙片剂约65.碳酸钙泡腾颗 粒服用时因泡腾而溶于水,形成枸橼酸钙复合 物,也具有与服用枸橼酸钙相似的高尿钙 排泄量,反映了其经肠吸收明显高于碳酸钙片. 4.2在测定尿钙排泄的同时,我们也测了两种 钙剂的血清钙浓度.颗粒的血清钙的峰浓度 c皿?也较高,均值分别为1o.29与7.94rag?I, 泡腾颗粒组约高于片剂组3o,也与文献报道 的枸橼酸钙血药浓度高于碳酸钙片r相仿.但 其药一时曲线变化较大,难于从药动学参数作 出准确的生物利用度评价.再次验证了以尿钙 排出反映钙制剂评价人体生物利用度的可行 性. 4.3试验结果说明碳酸钙泡腾颗粒(fi-枸橼 酸)具有比碳酸钙片更高的生物利用度.作为补 钙剂碳酸钙泡腾颗粒吸收好又便于服用,易为 临床成人与儿童接受. 参考文献 1砖伟.口碾钙荆的现状.中国药事.1995,9(1):13 2NicarMJ,PakCYC.CalciumMoavaJlabilityfromcalcium carbonateandcalciumcitrate.JCliaEndoerlnolMetab, 1985.61(2):391' 3ZerwekhlE,SakhaeeK.PakCYC.Utilityandlimitationof calciuricr鹳po?jetooraleatcium【0ad舳ameasure0fin testinalcalciumabsorptlon:Comparisonwitkisotop~frac— tionalcalciumabsorption.InvestUrol,1981,19:161 4}3ol,innGW,DavisGR,BundrusDJ,cta1.Anevaluation 0ftheimportanceolgastricandsecretionintheabsorption ofdietarycalcium.JClinInvest,1984,73:640 5HarveyJA.ZohitsMM,PakCYC-CalciumGitrale:Te— ducedpropensityIromthecrystallb,-ationolcalciumOK a[atenur】…uRingfrominducedhypercalciuriaolcal一 3-35"-~36 ciumsupp[enmntation.JClinEndoerinolMetab-1985?61 6PakCYC.Citrateandrenalcalculi:newinsightsandfuture 肝细胞微粒体的制备和细胞色素P450氧化酶活性测定977:弓 v, 唐政年张顺国李岚张宛陵(上海第二医科大学附属新华医院上海200092) 摘要且的:为科定人肝细胞氍拉体知胞色素P450氧化酶的活性方法;甩差速离心 法制备3书】人肝细胞徽粒体 结果:细胞色素P450的含量为0.523+0.005nmol?mg;细胞色素b5为0-285士 0-025nmol?mg;氨基比林N一 脱甲基酶的活力为0.5土0.6nmo]?mg一;乙基吗啡N一脱甲基酶活力为 0.98~0.08nmol?mg.结论:P450酶活 性影响因素较多,个体差异太.临库用药时应考虑忘者的个体情况. 煳词1?必孙I翁对\r 目前,对药物代谢的研究国内外许多文献取出后,均用干冰转移到一120C冰箱内 储存. 均已进入肝微粒体水平].由于人体肝微粒 体所含的各种酶活性影响因素很多,不同种族, 不同个体间的酶活性在质和量上有很大差异. 这些差异的存在,对临床病人的治疗和诊断正 日趋显得重要起来"].本文测定了3例我国 正常人肝细胞微粒体内细胞色素P450氧化酶 的活性. 1试剂与仪器 1.1试剂氨基比林(上海浦东九福药业公 司);乙基吗啡(青海制药厂);葡萄糖6一磷酸, 葡萄糖6一磷酸脱氢酶,NADP,NADPH,牛血 清白蛋白均为市售生化试剂;其它化学试剂均 为AR或CP级纯 1.2仪器Hitachi80P一7制备型超速离心机; 美国HP一8453紫外检测仪;GF一1控时调速式 高速分散器(江苏海门其林医用仪器厂);SHZ一 82型水裕衡温震荡器(江苏太仓县医疗器械 厂). 2方法 2.1肝微粒体的制备3例人肝脏样本均来 自我国成年男性个体,其中2倒取自肾移植供 肾者,肝脏于死亡后3h内取出,另1例取自交 通事故死亡者,于死亡后8h内取出.所有肝脏 2.2人肝微粒体制备取部分肝组织剪成 碎块,用含KCI(0.15tool?L)的磷酸缓冲液 (0.1tool?L-.,pH7.4)反复冲洗除掉组织中 的血液成份,最后按l:4(w/V)加入上述 KC1一磷酸缓冲溶液,用内切式组织匀浆成 肝匀浆.将制备好的肝匀浆在超速离心机上离 心(9000r?rain)15rain.取上清液再离心 (1O0000r?rain)60rain,弃去上清液,得粉 红色沉淀(即肝微粒体),将其悬浮于含30甘 油(v/v)的KCI磷酸缓冲溶液中放入一l20 C冰箱中储存备用.以上所有操作均在冰浴中 进行.微粒体蛋白浓度按Lowry法测定. 2.3细胞色素P450和b5的含量测定微粒 体中P45o含量按0mura和Sato分光光崖法 测定.即将微粒体用KCL一磷酸缓冲溶液稀释 成1.0mg?ml一,加入数毫克连二亚硫酸钠, 混匀,lrain后等份到参照杯和样品杯中,在紫 然后在样品杯中 外分光光度仪上先扫描基线. 通入CO约1min,稳定5rain后在400,500 lqm波长范围内扫描,得还原型细胞色素P450 CO复合物的吸收光谱图,记录450和480nm 波长处的吸收值,按以下公式计算P450含量. P450(nmol?g一,一 ?535?