乳酸左氧氟沙星乳膏的制备与质量控制

乳酸左氧氟沙星乳膏的制备与质量控制 [摘要] 目的:制备左旋氧氟沙星乳膏，建立质量控制方法。方法:以左旋氧氟沙星为主药, 10%硬脂酸、4.6%单硬脂酸甘油脂、0.46%对羟基苯甲酸乙酯、1%甘油，2%十八醇、12%凡士林、2%三乙醇胺组成O/W型乳膏,制备左旋氧氟沙星乳膏。用荧光分光光度计在325 nm处用共振瑞利散射法测定左旋氧氟沙星的含量,建立质量控制方法。结果:其线性范围为1,15.2 mg/L，平均回收率为100.14%,RSD为1.93%。结论:制备方法和质量控制方法简便、快捷、准确。 [关键词] 左旋氧氟沙星; O/W型乳膏;制备;质量控制 [中图分类号]R94[文献标识码]A[文章编号]1673-7210(2007)05(c)021-02 左氧氟沙星是新一代全合成喹诺酮类抗菌药物,它通过抑制细菌DNA复制所必需的酶――DNA促旋酶而阻断细菌DNA包括质粒DNA的复制，从而产生强大的杀菌效力，并避免质粒介导的细菌耐药性的产生，与其他临床常用抗生素无交叉耐药性。 为了减少药物对胃肠道的反应及增加局部用药的药物浓度,我们制备了乳酸左氧氟沙星乳膏,用于皮肤感染及妇科感染。现将乳酸左氧氟沙星乳膏的处方、制备工艺、含量测定等质量控制方法作如下介绍。 1 资料与方法 1.1 仪器与试剂 1.1.1 仪器岛津RF-5000型荧光分光光度计,测定参数:Scan speed:super;Response(s):Auto; Band width(nm):EX=EM=5.0; Sensitivity:Low;pHS3C型精密酸度计(上海雷磁分析仪器厂)， 岛津UV-2201型紫外可见分光光度计，YB-3型澄明度仪(天津市光学仪器厂)，FA2204电子天平(十万分之一)。 1.1.2 试剂左氧氟沙星(LVFX)原料(浙江医药总公司，含量100.2%，批号20040302)，LFX对照品(原料重结晶)含量测定溶剂为0.1 mol/L乳酸左氧氟沙星(LVFX-Lactic)溶液:精密称取经105?干燥至恒重的LVFX-Lactic Acid对照品适量(约相当于LVFX 10 mg)，置于100 ml容量瓶中，加入0.1 mol/L乳酸(lactic acid)溶液至刻度，摇匀。并制成100 μg/ml标准贮备液，用时加0.1 mol/L乳酸溶液定量稀释制成5 μg/ml的对照品溶液。羊毛罂红(Erioglaucine, EA) 溶液:先配制浓度为2.0×10-3 mol/L的贮备液,然后用水稀释至2.0×10-4 mol/L作为工作溶液，Britton Robinson(BR)广泛缓冲溶液与0.2 mol/L的HCl溶液按一定比例混合配成不同pH值的缓冲溶液，按文献方法配成pH值为1.5~5.5的缓冲溶液并用酸度计进行标定，所用试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。 1.2 处方与制备 1.2.1 处方乳酸左氧氟沙星为阳离子型药物，呈酸性,在复方制剂中用量较大,易使乳剂成品变稀、变软,甚至分层,影响成品的稳定性。为了解决这个问题，我们首先通过正交表试验及数据处理和统计分析, 得到基质配比最优搭配[1]， 10%硬脂酸、4.6%单硬脂酸甘油脂、2%十八醇、12%凡士林、2%三乙醇胺、1%甘油, 0.46%对羟基苯甲酸乙酯组成O/W型乳膏, 主药乳酸左氧氟沙星含量为1%(质量百分比)，合计1 000 g。 1.2.2 制备按量取硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、十八醇、医用白凡士林、三乙醇胺水浴加热至熔化，作为油相;取甘油、蒸馏水、对羟基苯甲酸乙酯混合加热至对羟基苯甲酸乙酯溶解，作为水相。待油相温度为75~80?时，搅拌下将油相倒入乳酸左氧氟沙星中，并使温度保持在75~80?,待水相温度也为75~80?时，将搅拌均匀后的油相，在慢速搅拌下，缓缓加 入水相，加速搅拌20~25 min(500 r/min)后逐渐减慢搅拌速度至冷却，停止搅拌，即得乳酸左氧氟沙星乳膏(O/W)[2，3]。 1.3 质量控制 1.3.1 性状本品为白色乳膏。 1.3.2 检查 1.3.2.1 酸碱度:取乳酸左氧氟沙星乳膏1 g，加水20 ml溶解,搅拌均匀，依法测定(2005版药典附录?H)。pH值应为5.0,7.5。 1.3.2.2 其他:符合中国药典2005年版附录?F软膏剂项下各项规定。 1.3.3含量测定 1.3.3.1 实验方法:于10 ml 比色管中依次加入乳酸左氧氟沙星对照品溶液(用0.1 mol/L乳酸溶液配制成约6 μg/ml的乳酸左氧氟沙星对照品溶液),以0.1 mol/L乳酸溶液为空白，pH 4.52的Britton Robinson缓冲溶液1 ml和2 ml 2.0×10-4mol/L的羊毛罂红溶液,以二次蒸馏水定容,摇匀。将溶液于荧光光度计上以λem =λex(即Δλ= 0) 方式进行同步扫描得RRS 光谱,于λem =λex = 325 处测定产物溶液的散射光强度?以及试剂空白的散射强度?0，Δ?RRS=?-?0。 λ(nm) 图1乳酸左氧氟沙星与羊毛罂红反应的RRS图 1. 羊毛罂红;2. 乳酸左氧氟沙星;3. 乳酸左氧氟沙星与羊毛罂红体系 1.3.3.2 工作曲线的绘制:分别取不同量的左氧氟沙星，按照实验方法，与羊毛罂红溶液反应，并于最大波长325 nm处测量试剂空白和离子缔合物的RRS强度，再分别以Δ IRRS对左氧氟沙星浓度作图，绘制标准曲线(图1)。体系检测限(当信噪比S/N=3 )以及标准曲线的某些参数见表1。 表1乳酸左氧氟沙星一羊毛罂红(EA)体系标准曲线的相关系数、线性范围和检出限 从表中可以看出，乳酸左氧氟沙星的浓度在1,15.2 mg/L范围内与散射强度成正比，浓度过高，曲线会发生弯曲， 方法灵敏度高，对左氧氟沙星的检出限为16.2 ng/ml。 2 结果 2.1 样品测定 照本法在325 nm波长处测定RRS强度，代入回归方程计算含量，结果3个批号乳酸左氟沙星注射液含量测定结果分别为98.41%,99.02%,103%(表2)。 2.2 重复性试验 精密称取批号050316的乳膏约0.3 g共5份,按4.3.3样品测定项下的方法操作,求得左旋氧氟沙星RSD=2.77%(n=5),说明方法重复性好。 2.3 加样回收率试验 精密称取已知含量的乳酸左旋氧氟沙星乳膏(批号050316)适量和乳酸左旋氧氟沙星对照品，照样品测定项下的方法分别测定，计算平均回收率为99.98%，RSD=1.8% (n=5)。 表2乳酸左氧氟沙星乳膏含量的测定结果 2.4 初步稳定性考察 2.4.1 刺激性试验取健康家兔4只,剃除背部毛发,取乳酸左氧氟沙星乳膏适量涂敷于裸露皮肤上,另取健康家兔4只,同法操作,以空白基质为对照,分别于0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0和24 h观察涂药部位皮肤有无充血,水肿,溃疡等,结果均无明显差异。 2.4.2 离心试验取乳酸左氧氟沙星乳膏5 g，于2500 r/min的离心机上，离心30 min，乳膏剂无油水分离。 2.4.3 耐热耐寒试验取乳酸左氧氟沙星乳膏适量,分别置于50?烘箱6 h及-20? 24 h后,乳膏在50?烘箱中出现油水分离;在-20?中无油水分离。 2.4.4 光照试验按处方配制200 g乳膏,分别装入无色透明玻璃瓶中,密封。取3瓶放于3000 lx澄明度检测仪下照射;另取3瓶暗置,以上各瓶分别于5,10,15 d后测其含量变化,结果见表3。 表3 1%乳酸左氧氟沙星乳膏对光稳定性 3 讨论 成品色白细腻,分散均匀,易洗除。我们配制的左旋氧氟沙星乳膏主要应用于皮肤感染、整形外科感染,因而必须保证其绝对无菌。因为其不适宜于湿热灭菌和干热灭菌,紫外灭菌效果也不佳,所以,在制备过程的质量控制非常重要，配制应该在10万级以上的洁净室进行,所用的基质、药物与器具、包装容器等均应严格无菌。 本乳膏剂经乳酸处理,一使处方中的对羟基苯甲酸乙酯游离破乳,二使乳酸左氧氟沙星以乳浊液形式溶于水,经试验乳酸浓度以1 mol/L效果好。 采用共振瑞利散射法测定含量,方法稳定,基质对测定无干扰。 乳酸左氧氟沙星乳膏对光和热均不稳定,因此需将其避光置于阴凉处保存[4]。 [参考文献] [1]张俭山,杨旭.不同方法制备的乳膏基质质量的比较[J].安徽医科大学学报，1995,30(2):I50. [2]毕殿洲.药剂学[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2000.378. [3]奚念朱,顾学裘.药剂学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,1980.351. [4]李平,姚南,张建林,等.氧氟沙星涂膜剂的制备和质量控制[J].中国医药工业杂志,1999,30(3):123. (收稿日期:2007-04-08) 本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。