藿香正气软胶囊含量测定方法的改进

藿香正气软胶囊含量测定方法的改进 作者:崔晓丽～郑晓英～许立锋 【关键词】 藿香正气软胶囊;含量测定;高效液相色谱法;方法改进 《中国药典》2005年版一部收载的藿香正气软胶囊质量标准是在《卫生部药品标准》新药转正第五册的基础上提升而来～二者比较～现行版增加了苍术和橙皮苷的薄层色谱鉴别～但含量测定方法没有改进。实验发现～用高效液相色谱法测定厚朴含量～部分条件需要改进。药典方法规定:(1)进样量:对照品溶液6μl,供试品溶液10，20μl～不一致～易造成进样误差。(2)和厚朴酚与厚朴酚对照品溶液浓度分别为80μg/ml和100μg/ml～均偏高～应调整至与供试品溶液浓度相近。(3)流动相为甲醇-水(75:25)～欠佳～因其保留时间长～分离效果差～理论板数难达规定要求。笔者对以上三个条件进行改进～用改进后的条件进行实验～取得了良好的实验效果。 1 仪器与试药 岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪。厚朴酚、和厚朴酚对照品(购自中国药品生物制品检定所)。乙腈为色谱纯～其他试剂为分析纯。藿香正气软胶囊为抽验样品(石家庄神威药业生产)。 2 实验方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱:DiamonsilTM(钻石)C18(5μm～200×4.6μm);流动相:乙腈-水-冰醋酸(60:38:2)[1];流速:1.0ml/min;检测波长:294nm;进样量:10μl。 2.2 对照品溶液制备 精密称取和厚朴酚、厚朴酚对照品～分别加甲醇制成每1ml各含40μg、50μg的溶液。 2.3 供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的物～混匀～取约0.25g～精密称定～臵具塞锥形瓶中～精密加入稀乙醇50ml～密塞～称定重量～超声提取10min～放冷～称定重量～用稀乙醇补足减失的重量～摇匀～滤过～取续滤液～即得。 色谱图见图1。 作者单位:067000 河北承德～承德市药品检验所 a.和厚朴酚对照品 b. 厚朴酚对照品c.供试品(藿香正气软胶囊) 图1 藿香正气软胶囊HPLC色谱图 2.4 线性关系考察(按厚朴酚峰计) 精密吸取不同浓度的厚朴酚对照品溶液～注入高效液相色谱仪～测定峰面积～以峰面积为纵坐标～对照品进样量(μg)为横坐标～绘制标准曲线～结果表明厚朴酚在0.0501 ， 1.6032μg范围内呈良好的线性关系～回归方程为 Y=1887.216+616437.465X～r = 0.9999 ～见表1。表1 线性关系考察结果 2.5 精密度试验(按厚朴酚峰计) 精密吸取同一厚朴酚对照品溶液～连续进样6次～测定峰面积～其RSD为 0.35 %～表明精密度良好～见表2。 2.6 重现性试验 取同一批号的样品5份～精密称定～按供试品溶液制备方法制成供试品溶液～照上述色谱条件测定～供试品中厚朴酚与和厚朴酚总含量的RSD为0.26%～表明重现性良好～见表3。表2 精密度试验结果表3 重现性试验结果 2.7 加样回收率试验 精密称取已知含量为0.9636%的同一样品约0.13g～共5份～每份均精密加入厚朴酚1.0020mg～和厚朴酚0.8025mg～按供试品溶液制备方法制备～照上述色谱条件测定～计算加样回收率～结果见表4。表4 回收率试验结果 3 小结 3.1 在基层药检所～用HPLC法测定含量～除少量自动进样外～多采用定量环进样～所以统一对照品和供试品溶液的进样量～一方面消除进样误差～另一方面不必更换定量环～简化操作。同时降低对照品溶液浓度～使之与供试品溶液浓度接近～测定结果更准确。 3.2 改进流动相～大大缩短了保留时间～既节约试剂～又减少了试剂的污染和对人体的危害。流动相改变后～经方法学验证证明,方法可行。另外厚朴酚与和厚朴酚为同分异构体～在做线性关系等考察时考察其一即可。 3.3 实验对比知～改进后的色谱图分离效果好～理论板数(按厚朴酚峰计)由原来的不足5000(标准规定不低于5600)上升至9000以上。建议在以后的标准提升时可做参考。 【参考文献】 1 国家药典委员会.中国药典(一部).北京:化学工业出版社～2005～526.