HPLC测定血栓心脉宁片中丹酚酸B的含量

HPLC测定血栓心脉宁片中丹酚酸B的含量 HPLC测定血栓心脉宁片中丹酚酸B的含 量 HPLC测定血栓心脉宁片中丹酚酸B的含量 刘传贵,董长萍,王福文 (吉林华康药业股份有限公司,吉林敦化133700) [摘要]目的:建立高效液相色谱法测定血栓心脉宁片中丹酚酸B的含量.方法:采用 DiamonsilC.色谱柱 (4.6mmx250mm,5tam),流动相甲醇一乙腈一0.5%甲酸溶液(30:9:61),流速1.0mL.min..,检测 波K286nm. 结果:丹酚酸B0.19,1.75g范围内线性关系良好,峰面积与其浓度线性关系良好(r=0.9999), 平均同收率 99.00%,RSD=0.60%,(n=5).结论:本方法分离效果好,准确,重复性好,可用于该制荆的质晕控 制. [关键词]高效液相色潜法;丹酚酸B:血栓心脉宁片 血栓心脉宁片系由川芎,丹参,槐花,麝香 等10味中药组成的复方中药制剂,具有芳香开窍, 活血散瘀的功能,用于脑血栓,冠心病心绞痛属血 瘀证者,其中丹酚酸B为其有效成分之一.为了更 有效地控制该制剂的质量,本文首次采用HPLC法 测定血栓心脉宁中丹酚酸B(C,6H,.Ol)的含量, 该方法操作简便,重复性,准确性均好,可用于 该制剂的质量控制. 1仪器与试药 高效液相色谱仪:惠普公司HP1100高效 液相色谱仪;惠普公司G1314A可变波长紫外 检测器;HP化学工作站;DiamOnsi1C,色谱 柱(4.6mmx250mm,5m).丹酚酸B对照品(中 国药品生物制品检定所).血栓心脉宁片(吉林华康 药业股份有限公司,批号050201,050202, 050203).其它试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件DiamonsilC,.色谱柱(4.6mmx250mm, 5um),流动相甲醇一乙腈一0.5%甲酸溶液(30:9: 61),流速1.0mL.min,,检测波长286nm,柱温 30?,进样晕5L. 2.2溶液的制备样品溶液的制备:取本品10片, 除去包衣,研细,取0.3g,精密称定,置具塞锥 形瓶中,精密加入75%甲醇50mL,称定重量,超 声处理(功率250W,频率25KHz)30min,再称 定重量,用75%甲醇补足减火的重量,摇匀,滤 过,取续滤液,即得. 对照品溶液的制备:精密称耳又丹酚酸B对照品 适罱,加75%甲醇溶解,制成每1mL含0.2mg的 溶液,作为对照. 阴性对照液的制备:按处方配比投入无丹参的 其他药材和辅料,制成空白制剂,按样品溶液制各 方法制各. 2.3干扰性试验在2.1色谱条件下,分别取对照品 溶液,阴性对照液,样品溶液各5uL注入色谱仪, 记录色谱图,见图1,2,3.结果显示,在此条 件下,血栓心脉宁片中各组分分离度效果良好,其他 组分不干扰丹酚酸B的测定. 图1丹酚酸B标准品HPLC图 j lA,,一 一,一一 图3阴性丹酚酸BHPLC图 撩TCM,l9 n二5曩 ?一一0—2N一 1,.C掣瞻一 . 图 C 2.4线性关系考察分别精密吸取对照品溶液 (O.1942mg?mL’)1.0,3.0,5.0,7.0,9.0L,注 入液相色谱仪,按上述条件测定,以峰面积为 纵坐标,进样量(g)为横坐标进行线性回归, 得回归方程y=1089.45X一29.3416,线性范 围0.19,1.75ug,,.=O.9999. 2.5精密度试验精密吸取0.1942mg.mL.的丹酚酸 B对照品溶液5uL,连续进样5次,记录色谱图及 结果,测定丹酚酸B峰面积RSD=0.44%,明仪 器精密度良好. 2.6稳定性试验取同一供试品溶液,依法分别于 0,2,4,8,24h注入高效液相色谱仪,测定丹 酚酸B含量,其RSD=1.O%(n=5),表明供试品 溶液在24h内稳定. 2.7重复性试验精密称取同一批号的样品5份,按 2.2样品溶液制备方法制备,按以上色谱条件测试, 测定丹酚酸B峰面积的RSD=0.6%(n=5),结果 表明本法的重复性好. 2.8回收率试验采用加样回收法,取已知含量的血 栓心脉宁片样品约0.15g,精密称定5份,精密加 入丹酚酸B对照品5.0004mg,按样品溶液制备方法 操作,各进样5L,记录色谱图,计算回收率, 结果见表1. 2.9样品的含量测定分别精密称取3批血栓心脉宁 片,按供试品制备方法制备,精密吸取对照品溶 表l血栓心脉宁片中丹酚酸B回收率试验结果 谱条件测定丹酚酸B含量,分别为14.44,14.48, 14.32mg/片. 3讨论 3.1提取方法的选择(1)供试品加甲醇超声处理 30rain;(2)供试品加甲醇回流提取30min,其含量无 差异,故选定(1)为本试验的提取方法. 3.2流动相的选择选择了甲醇一乙腈一0.5%甲酸溶 液(3o:10:60)及甲醇,乙腈一0.5%甲酸溶液(30: 9:61),确定(30:9:61)为流动相,能 够使丹酚酸B峰与其它峰完全分离,故选定作为本 实验的流动相. 3.3测定波长的选择取丹酚酸B对照品溶液进行紫 外扫描,其最大吸收波长为287.6nm,故以286nm 为本实验的检测波长.匠盈 (收稿日期2005.11.9) HPLCDeterminationofSalvianolicacidBinXuesbuanxinmainingTablet LiuChuangui,DongChangping,WangFuwen (JiLinHuakangPharmceuticalCo.,LTD,JiLinDunHua133700,China) [Abstract]0bjective:ToestablishmethodforHPLCdeterminationofSalvianolicacidBinXueshuanxin maining tablet.Method:TheconditionforHPLCwasDiamonsilC,.column(4.6mmx250mm,5m)withmethano l- acetonitrile一 0.5%formicacid(30:9:611asthemobilephase.Theflowratewas1.0mL.min’andthedetection wavelengthwas286nm.Result:Thestandardcurvewaslinerintherangeof0.19~1.75ugandthecorrelati on coefficientwas0.9999.Thecoveragerecoverywas99.OO%withRSD0.6O%.Conclusion:Themethod shows goodseparatingresult,accuracyandreproducibility,canbeusedforthequMi~controlofXueshuanxinm aining tablet. 【Keywords]HPLC;SalvianolicacidB;Xueshuanxinmainingtablet 2o/鬈it