最新早熟苹果品种的抗寒性测试

最新早熟苹果品种的抗寒性测试 目 录 摘 要 ............................................................................................................. 1 Abstract ........................................................................................................ 2 1、前言 ......................................................................................................... 3 2、材料与方法 ............................................................................................. 3 2.1试验地概况 .......................................................................................... 3 2.2试验材料 .............................................................................................. 4 2.3试验 .............................................................................................. 4 2.4实验内容及方法 .................................................................................. 4 2.4.1电导法测电解质渗出率 ................................................................ 4 2.4.2可溶性糖含量的测定 .................................................................... 4 2.4.3超氧化物歧化酶(SOD)活性 .................................................... 5 2.4.4过氧化物酶(POD)活性 ............................................................ 6 2.4.5过氧化氢酶(CAT)活性 ............................................................ 7 2.4.6丙二醛(MDA)含量测定........................................................... 7 3.结果与分析 ................................................................................................ 8 3.1不同早熟苹果品种在低温处理中电解质外渗量差异 ...................... 8 3.2不同早熟苹果品种在低温处理下可溶性糖含量的变化 .................. 9 3.3不同早熟苹果品种在低温处理下丙二醛(MDA)含量的变化 .. 10 3.4不同早熟苹果品种在低温处理下保护酶的活性变化 .................... 10 3.4.1.超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化 ...................................... 10 3.4.2过氧化物酶(POD)活性的变化 .............................................. 11 3.4.3过氧化氢酶(CAT)活性的变化 .............................................. 12 4.结论 .......................................................................................................... 12 5(讨论 ....................................................................................................... 13 参考文献 ..................................................................................................... 13 几个早熟苹果品种的抗寒性测试 摘 要:苹果是我国重要的经济林树种和高效农业新品种之一，具有极高的生态、经济和社会价值。抗旱抗寒性早熟苹果品种的选育是苹果产业高效持续发展的不竭动力，为此，本文对陕西渭北各早熟品种电解质渗出率、可溶性糖含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量等抗旱指标进行了分析测定，为进一步筛选选高抗性品种，探讨分析其高抗的原因，比较各个品种在不同温度下的生长与发育状况，确定其最适分布范围的提供了参考。 关键字:苹果、SOD、POD、CAT、MDA 、抗寒 Cold test of Several early apple varieties Author:ZhangMing Counselor:FAN Jin-shuan Abstract: Apple is an important economic tree species and one new varieties of high-efficiency agriculture, with high ecological, economic and social value. Cold resistance drought breeding early apple varieties of apple industry is an inexhaustible driving force of sustainable development and efficient, this paper on the early maturing varieties Weibei electrolyte leakage, soluble sugar content, superoxide dismutase (SOD), , peroxidase (POD) activity, hydrogen peroxide (CAT) activity and malondialdehyde (MDA) content analysis of drought indicators were measured, selected for screening high-resistant varieties, the paper discusses the reasons for its high resistance, Comparison of various species at different temperatures of growth and developmental status, determine the optimal distribution of the information provided. Key words: apple、SOD、POD、CAT、 MDA、cold 1、前言 苹果原产于欧洲、中亚和我国新疆西部一带，栽培历史已有5000年以上，已有一个朝代之久。中亚野苹果被认为是现代栽培苹果发源地之一，为欧洲及美国栽培苹果的原始种。我国原产的绵苹果在秦汉时代就有记载，在魏晋时代已有栽培。近几年来，我国苹果产业有了长足发展，已经取得了很大成就。2005年栽培面积已达到189万公顷，产量为2400万吨(分别占世界苹果总量的2/5和1/3)，成为世界最大的苹果生产国。单位面积产量由1995年的4.7吨/公顷提高到了近年平均的12吨/公顷。 冻害是果树生产的主要自然灾害之一,低温是苹果树栽培的重要限制因子。20世纪50年代以来，我国在果树群体，个体，器官生态学和形态学等方面单一致使的抗寒性表现研究上取得了可喜的成绩。然而，植物的抗寒性受多种因素影响，孤立的用某一指标很难反映和揭示植物的抗寒性。目前国内苹果抗寒的研究报道确实不少，但是对渭北地区苹果抗寒的研究却很少。1999年春季，陕西省渭南市合阳县山阳村果农李建民在自家果园的一株嘎拉系苹果树上发现一枝特殊侧枝，该树枝位于树体中央领导干中部的一枝侧枝上，其生长势特别旺盛，年生长量远远超过主干顶部的枝条，而且该枝着生的叶片大且厚，叶色比其它叶片的颜色略深，枝条粗壮，节间较短，花期与果实成熟期略早于其它枝条，该枝上所接果实个大、果形端正、果实着色面积大、呈现红色、果肉致密、酥脆、酸甜可口、品质上等。2001年1月对该枝条进行细枝修剪，所剪的枝条于同年3月在山阳村李建民家果园进行扩繁，一部分高接在1株7年生的新红星树上，共高接4个枝头。2002年去第二代枝条嫁接在山顶子砧木上，开始大量扩繁。高接树于2003年开始结果，嫁接于山定子砧木上的与2007年开始结果。对于该嘎拉系优良新株，经过7年的观察，其遗传性状稳定，初步推断为嘎拉系果树的芽变，可能是一个综合性状优良的早熟嘎拉系新品种。为了给筛选抗旱抗寒品种提供依据，我们对这个几个早熟品种的抗寒性进行了一系列的测定，现将结果如下。 2、材料与方法 2.1试验地概况 合阳县，隶属陕西省渭南市。位于陕西关中东部，黄河中游西侧，位于东经109?58′33〃—110?24′00〃和北纬34?59′16〃—35?26′27〃之间，属世界标准时区东七区。合阳县与大荔县、澄城县、韩城市、黄龙县接壤，东临山西省临猗县。全县为阶梯地貌，北高南低，海拔342-1543m，年平均气温为11.5?，降雨量为553mm，耕地98万亩，小 麦、苹果、烤烟、棉花、渔业、生猪是国家和省级基地县，扔有全国最大的绿色食品基地---30万亩和10万亩红薯，是国家生态建设示范县。 2.2试验材料 取苹果树的一年生枝条，枝条全部来自陕西渭南合阳县山阳村，比较品种为嘎拉系优良新株‘Y’、‘嘎啦’、‘北斗’、‘千秋’。 2.3试验设计 将采回的枝条剪成40cm左右的长度，用自来水冲洗数遍(洗掉泥土、灰尘、虫卵)，再用蒸馏水冲洗3次，然后用吸水纸吸干水分，最后将枝条末端进行蜡封，将每个品种蜡封后的枝条分为相等的6份，其中1份为对照，其余每份作为一个低温处理，放入冰箱(0?—4?)保存备用。每次处理时，各取参试品种1份枝条放入超低温冰箱内进行低温处理，处理温度为: -20?、-25?、-30?、-35?、-40?，降温速度为4?/h，达到目地温度后维持12h，然后逐步升温，升温温度亦为4?/h，以室温下未经低温处理的枝条作为对照。参试材料共4个品种，6个温度梯度，总共24个处理，每个处理设3次重复。 2.4实验内容及方法 2.4.1电导法测电解质渗出率 近年来的研究表明，在低温伤害中，膜系统常常是最先受到伤害的部位，伤害能使脂膜受损伤，透性加大，细胞内离子外渗量增多，电导率加大。因此可以用电导仪测定溶液的电导率，求算电解质渗出率(伤害率)。伤害越高则越不抗寒，反之则越抗寒。 取样品0.5g，放入试管中，加10ml去离子水，置室温(10?)下10h。用玻璃棒搅拌均匀，然后用DDS-11A型电导仪测电导率值为C，再将试管放入沸水中10min，待1 其冷却至室温(10?)时，测得样品的电导率值为C，按下式计算电解质渗出率:2 C1电解质渗出率=×100% C2 2.4.2可溶性糖含量的测定 可溶性糖一方面是原生质代替可直接利用的原料，另一方面可溶性糖又增加了原生质的浓度，使冰点降低，又可缓冲细胞质过度脱水，保护细胞质胶体不致遇冷凝固，减少细胞内失水和结冰，因而提高植物的抗寒性。 糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛，生成的产物可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可以用于糖的测定。糖类于蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为630nm，故在此波长下进行比色。 1.提取分离:取0.1g-0.2g样品，研磨，用8mL80%乙醇分4次洗入10mL离心管中，80?水浴中提取30min，其间摇动几次。3500×g离心10min，上清液转入25mL容量瓶中;再向沉淀中加入5-6mL80%乙醇，如上法重复浸提2次，将上清液合并于25mL容量瓶中，定容至刻度。 2.制作标准曲线，取6支18×180mL试管编号，按下表2-1加入试剂: 表2-1 可溶性糖标准曲线溶液组成 Tab.2-1 Solution compositon of standard curve of soluble sugar 试剂 1 2 3 4 5 6 葡萄糖标准液(100μg/mL) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 水(ml) 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 蒽酮-硫酸(mL) 5 5 5 5 5 5 葡萄糖含量(μg) 0 20 40 60 80 100 加完试剂在100?水浴中准确加热10min后取出流水冷却，以1号管为空白调零，在620nm波长下测定吸光度。以吸光度为纵坐标，葡萄糖含量为横坐标，绘制标准曲线。 3.样品中可溶性糖含量的测定取上述测定还原糖剩余的样品液适当稀释后取2mL，再加入5mL蒽酮-硫酸，与标准管同样操作，记录620nm波长下的吸光度。结果计算: VC，，n-1a可溶性糖含量(mg?gFW)= W，1000 式中，C:从标准曲线上查得样品测定管中含葡萄糖的量(μg);V:样品提取液总体积，mL;a:测定时取样体积，mL;W:样品鲜重，g;n:稀释倍数;1000:换算系数，1mg=1000μg 2.4.3超氧化物歧化酶(SOD)活性 SOD是一种清除超氧阴离子自由基的酶，普遍存在于植物体内。本实验依据超氧物岐化酶抑制NDT在光的还原作用来确定酶活性的大小。在有可氧化物质从在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易在氧化而产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子自由基可将NBT还原为蓝色，后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除超氧阴离子自由基。于是光还原反应后，反应液蓝色越深说明酶活性越低，反之酶活性越高。据此可以计算出酶活性大小。 用氮蓝四唑(NBT)比色法，SOD酶活性以抑制50%NBT反应为一个酶活性单位。取样品0.2g置预冷的研钵中，加入少许石英砂和PVP以及50mmol/L pH 7.8的磷酸缓冲液，冰浴下研磨成匀浆，加入提取介质冲洗2-3次，定容至10mL，并转入离心管中在4?下，10000×g离心15min，上清液即为粗酶提取液。 表2 SOD活性测定反应系统 Tab2 Reaction system of SOD actibity assay 样品 试剂(ml) CK CK 1250mmol/L磷酸缓冲液(pH7.8) 1.5 1.5 1.5 130mmol/L Met溶液 0.3 0.3 0.3 750μmol/L NBT溶液 0.3 0.3 0.3 100μmol/L EDTA-Na溶液 0.3 0.3 0.3 2 20μmol/L核黄素 0.3 0.3 0.3 粗酶液 0.1 0 0 蒸馏水 0.5 0.6 0.6 按照表2-1加入试剂后，混匀，CK遮光，CK不遮光，与其它各管同时置日光培12 养箱中4000Lux下照光30min，温度25-35?。反应结束后，遮光终止反应。以遮光的CK对照管为空白调零，在560nm波长下测定吸光度。以抑制NBT光化还原的50%为1 -1-1一个酶活力单位(U)，结果用U?g FW?h表示。 (A,A)，V，600t-1-1sSOD活性(U?g FW?h)= A，0.5，W，V，t0s 式中，A:照光对照管光吸收值;As:样品管的光吸收值;60:60min换算为1h;0 V:提取液总体积，mL;Vs:测定用酶液体积，mL;W:样品鲜重，g;t:照光时间，t min。 2.4.4过氧化物酶(POD)活性 在过氧化物酶催化下，过氧化氢分解成水和原子氧，原子氧能氧化联苯胺产生一种蓝色的化学物质，该蓝色化合物在波长580nm处有一最大吸收峰。蓝色物质生成速度与反应系统中过氧化氢分解速率呈正相关，因此，用分光光度计测出蓝色的物质密度的变化(单位时间内反应液中光密度的变化)，可以表示过氧化物酶的活性。 采用愈创木酚显色法，每隔30秒记录1次，以每分钟内A每下降0.1为一个活470 性单位。取样品0.2g置预冷的研钵中，加入少许石英砂和PVP以及50mmol/L pH 7.0的磷酸缓冲液，冰浴下研磨成匀浆，加入提取介质冲洗2-3次，定容至10mL，转入离心管中在4?下，10000×g离心15min，上清液即为粗酶提取液。3.0mL反应体系包括0.2%愈创木酚0.9mL，0.3%HO 1.0mL，50mmol/L pH7.0磷酸缓冲液1.0mL，酶液0.1mL。22 反应温度25?。加入酶液后记录3min内波长470nm处每30s的吸光值变化，以每分钟 -1-1OD值变化0.1为一个酶活力单位(U)，结果用U?g FW?min表示。结果计算按下式， ,A，V-1-1470tPOD活性(U?g FW?min)= W，0.1，V，ts 式中，ΔA:A在0-3min的差值;Vt:提取液总体积，mL;Vs:测定用酶液470470 体积，mL;W:样品鲜重，g;t:酶反应时间，min。 2.4.5过氧化氢酶(CAT)活性 低温胁迫下，细胞内易产生HO破坏膜系统的稳定，而过氧化氢酶(CAT)能把HO2222分解为H和O，从而清除HO维护膜的稳定性。研究表明，抗寒性强的品种有较高2222 的过氧化氢酶活性，，且随温度下降，以抗寒性强的品种下降幅度小，与抗寒性呈显著性相关。 用紫外吸收法，以每分钟内A每下降0.1为一个酶活力单位。酶液提取同POD。240 酶活性的测定:3.0mL反应体系包括0.3%HO 1.0mL，50mmol/L pH7.0磷酸缓冲液22 1.9mL，酶液0.1mL。反应温度25?。加入酶液后记录3min内波长240nm处每30s的 -1-1吸光值变化，以每分钟OD值变化0.1为一个酶活力单位(U)，结果用U?g FW?min表示。结果计算按下式， ,A，V-1-1240tCAT活性(U?g FW?min)= W，0.1，V，ts 式中，ΔA:A在0-3min的差值;Vt:提取液总体积，mL;Vs:测定用酶液240240 体积，mL;W:样品鲜重，g;t:开始加HO到最后一次读数时间，min。22 2.4.6丙二醛(MDA)含量测定 正常情况下由于植物体内活性氧的产生与清除处于半平衡状态，不会导致植物伤害，但是在低温胁迫环境下，植物器官往往发生脱脂过氧化作用，MDA是膜酯过氧化的最终分解产物，常用测定膜脂过氧化的指标。 采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法测定。样品提取方法与酶液提取相同。测定时向具塞试管中加入2mL样品提取液和3mL 0.5%硫代巴比妥酸(TBA)溶液(用5%三氯乙酸溶液溶解定容)，沸水浴中煮沸10min后取出流水冷却，3000×g离心15min取上 清液，以0.5%TBA为空白调零，分别在波长532nm，600nm和450nm下测OD值。结果按下式计算: V，V-1t丙二醛含量(μmol?gFW)=[6.452×(D-D)-0.559×D]×532600450W，Vs 式中，V:反应液总量，mL;Vt:提取液总体积，mL;Vs:测定用提取液体积，mL;W:样品鲜重，g。 3.结果与分析 3.1不同早熟苹果品种在低温处理中电解质外渗量差异 植物细胞是一种半透性生物膜，逆境条件下细胞膜透性反映了膜系统稳定性。当植物组织遇到环境低温影响受冻时，首先损伤的是细胞膜系统。由于质膜的功能受损或结构破坏，而使其透性增大细胞内各种可溶性物质包括电解质将有不同程度的外渗，将植物组织浸入无离子水中水的电导值将因电解质的外渗而加大，伤害愈重、外渗愈多，电导值的增加也越大。故可用电导仪测定外渗液的电导度增加值而知质膜受伤害的程度。由于细胞外渗物质的多少与电解质渗出率成正比，电解质渗出比率越高表明质膜受冻损伤的程度越大，故可用电解质渗出率的高低比较抗寒力的大小。 不同早熟苹果品种在低温处理过程中的先对电导率的变化测试分析结果如图3-1所示。 0.7 0.6 0.5Y0.4北斗 0.3嘎拉 千秋0.2相对电导率(%) 0.1 0 常温-20-25-30-35-40 温度(?) 图3-1 不同早熟苹果品种在低温处理过程中的先对电导率的变化 由图3-1可见，苹果枝条的电解质渗出率随处理温度的变化而变化。不同苹果品种枝条经不同低温处理后，其电解质渗出率随处理温度的降低呈上升趋势，从常温(10?)到-25?之间4种苹果枝条的电解质渗透率基本趋于较平缓升高，在常温条件下4种苹果枝条的电解质渗出率的值差别仍不大明显，嘎拉的值最高为28.50,，千秋的值最低为25.46,，到-30?时其中几种苹果枝条的电解质渗出率开始有较大幅度的变化，嘎拉从34.24,上升至58.39,增加了70.53,，电解质渗透率最高，表现抗寒性弱，北斗和Y电解质渗透率在相同低温处理下变化幅度也高，分别为54.19%和55.19%，可以看出 它们的抗寒性较弱，千秋的电解质渗出率在-30时为45.14%，比-25时上升了14.14%，为受影响最小的实验材料。试验对-30?时各处理电解质渗出率的方差分析表明，Y与嘎拉间存在显著的差异，-30?的低温对Y、北斗、嘎拉、千秋枝条组织细胞膜的功能损伤较大，相比之下对嘎拉系优良新株Y的枝条比嘎拉的影响较小，表现出对低温的忍耐力较强。 3.2不同早熟苹果品种在低温处理下可溶性糖含量的变化 植物组织和细胞可溶性糖含量预期抗冻性密切相关，可溶性糖含量越高，则植物抗冻性越强，反之亦然。可溶性糖在植物的抗寒生理中起渗透调节作用，提高细胞的渗透浓度，降低水势，增加保水能力，从而使冰点下降，同时糖还是冰的保护剂对原生质体，线粒体及膜上敏感偶联因子均有保护作用。 不同品种含糖量在低温处理中的变化测试结果见图3-2。 1600 1400 1200 FW)Y1000-1 北斗800嘎拉600千秋 含糖量(mg•g400 200 0 常温-20-25-30-35-40 温度(?) 图3-2 不同品种含糖量在低温处理中的变化 从图3-2的变化趋势来看，随着处理温度的降低，各种苹果枝条中的可溶性糖含量均呈上升趋势，在-20?的低温下，各种苹果枝条的可溶性糖含量比对照略有增加;在-25?和-20?下，可溶性糖的变化不大，基本保持一致;在-30?下可溶性糖的含量增长明显，根据方差分析，在该低温处理下，各个试验材料间可溶性糖含量差异显著，千秋 -1的可溶性糖含量最高，达到1369.35m?gFW，是对照的5.33倍，其他三种试验材料的 -1可溶性糖含量也明显增加，北斗、Y、嘎拉的可溶性糖含量分别达到1136.19 m?gFW、 -1-1741.09 m?gFW和601.58 m?gFW，增大的幅度北斗,Y,嘎拉，分别是对照的5.19倍、4.38倍和2.75倍。在-35?和-40?的低温处理下，各种苹果枝条的可溶性寒含量走势平稳，嘎拉的略有下降，使可溶性糖含量变化趋势呈“S”型。嘎拉系优良新株Y的可溶性糖含量与嘎拉相比，上升幅度较大，表现出较强的抗寒性;千秋、北斗、Y、嘎拉可溶性糖含量的上升幅度依次降低，依次推断其抗寒性也逐个递减，以嘎拉最弱。 3.3不同早熟苹果品种在低温处理下丙二醛(MDA)含量的变化 植物在逆境条件下，往往发生膜质过氧化作用，丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的主要产物之一，其含量可以表示脂质过氧化的程度，它可与细胞膜上的蛋白质、酶等结合交联使之失活，从而破坏生物膜的结构与功能，是有细胞毒性的物质，对许多生物大分子均有破坏作用，人们常以MDA作为判断膜脂过氧化作用的一种主要指标。 不同品种丙二醛含量在低温处理中的变化测试结果见图3-3。 70 60)-150 Y40北斗嘎拉30千秋 20 丙二醛含量(μmol•g10 0常温-20-25-30-35-40 温度(?) 图3-3 不同品种丙二醛含量在低温处理中的变化 从图3-3的结果可以看出，各种苹果枝条经不同低温处理后丙二醛含量呈现明显的增加趋势。在整个低温处理过程中，经过低温处理的枝条的丙二醛含量显著高于常温的，随着温度的降低，丙二醛的含量逐渐升高，增加的幅度显著。在-25?和-35?之间，MDA的走势较平缓，在-35?和-40?时，各试验材料之间MDA含量差异增大，嘎拉的MDA -1-1含量分别为48.77μmol•g和65.37μmol•g，显著高于其他三种试验材料(P,0.05)，其次是千秋,北斗,Y。本试验结果表明，在不同的低温处理下，四种试验材料的丙二醛含量均呈上升趋势，但不同试验材料、不同温度处理，变化的幅度不同。 3.4不同早熟苹果品种在低温处理下保护酶的活性变化 3.4.1.超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化 2-2-SOD能催化超氧化物阴离子自由基(O)的歧化作用，消除O，维持活性氧代谢的平衡，保护膜结构，从而使植物在一定程度上忍耐、减缓或抵抗低温胁迫。有研究证明，在低温处理下苹果的SOD活性随温度的降低而呈现先升后降的趋势。SOD是防御超氧阴离子自由基对细胞伤害的抗氧化酶，其活性高低是植物抗寒性的重要指标，在保护酶体统中处于核心地位。 不同品种SOD活性在低温处理中的变化测试结果如图3-4所示。 400 350)-1300 Y250 FW•h-1北斗200嘎拉 千秋150 100SOD活性(U•g50 0 常温-20-25-30-35-40 温度(?) 图3-4 不同品种SOD活性在低温处理中的变化 从图3-4可见，低温处理后四种试验材料枝条的SOD酶活性呈现先上升后下降的趋势。在-20?~-25?的低温处理过程中，四种试验材料的SOD酶活性均明显高于常温， 1在-30?时，千秋、北斗、Y的SOD酶活性增加幅度较大，分别达到274.38U、261.10 U和186.99 U，在-35?时，各种试验材料的SOD酶活性达到最大，千秋、北斗、Y、嘎拉分别为354.40 U、267.90 U、260.52和161.56 U。随着温度的降低，各试验材料的SOD酶活性又开始下降，在-40?时，各试验材料的SOD酶活性降低。在整个低温处理过程中，嘎拉系优良新株Y的SOD活性较高于嘎拉，四者的次抗寒性顺序为千秋,北斗,Y,嘎拉。 3.4.2过氧化物酶(POD)活性的变化 POD是植物体内重要的保护酶之一，它与CAT一起分解由SOD作用产生的HO，22生成无害的水。它与植物的抗逆境能力密切相关，在低温胁迫条件下，POD活性往往升高。由于不同植物抗寒能力不尽相同，POD活性变化幅度产生差别，故可以将在低温条件下POD活性及变化幅度作为品种间抗寒能力判断的生物化学指标。 不同品种POD活性在低温处理中的变化测试结果如图3-5所示。 40 35)-130 Y25 FW•min北斗-120嘎拉 15千秋 10 POD活性(U•g5 0 常温-20-25-30-35-40 温度(?) 图3-5 不同品种POD活性在低温处理中的变化 从图3-5可看出，随着温度的降低，POD酶的活性呈现“升—降—升”的变化趋势，在-20?时，各种苹果枝条的POD酶活性上升，千秋、北斗、Y、嘎拉的POD酶活性分别为29.00U、27.03 U、25.57 U、11.92 U，为变化曲线的第一个高峰;在-25?和-30?之间，各苹果枝条的POD酶活性下降，但在-35?时，POD酶活性又开始上升，达到第二个高峰;在40?时各苹果枝条的POD酶活性又下降。在整个变化过程中，Y的POD酶活性显著大于嘎拉，四者的POD酶的活性为千秋,北斗,Y,嘎拉。 3.4.3过氧化氢酶(CAT)活性的变化 HO的清除是细胞彻底清除活性氧的关键，CAT可以将HO直接转化为HO，与22222SOD协同反应，使活性氧维持在较低的水平上。 不同品种CAT活性在低温处理中的变化测试结果见图3-6。 60 )50-1 40Y FW•min北斗-130嘎拉 千秋20 10CAT活性(U•g 0 常温-20-25-30-35-40 温度(?) 图3-6 不同品种CAT活性在低温处理中的变化 从图3-6中可看出，4种试验材料的CAT活性变化趋势各不相同。嘎拉系优良新株Y的CAT活性变化幅度较大，表现出“升—降—升—降”的变化趋势，该试验结果与沈洪波在杏树上的试验结果相似，北斗、嘎拉、千秋三种试验材料的CAT酶活性也表现出升降交替的变化趋势，抗寒性强的品种CAT酶活性大，由图可以看出，千秋比北斗、嘎拉较耐寒，Y的抗寒性略大于嘎拉。 4.结论 由以上分析我们可以得出以下结论 (1) 温度降低对几种苹果的活性都有影响，而且影响不同 (2) 温度越低，几种品种活性指数越低。 (3) 在低温下，各个品种的抗寒性不一，其中抗寒性顺序为千秋,北斗,Y,嘎 拉。 5(讨论 由试验中可看出，4中苹果品种的抗寒性能力，其中千秋抗寒性能最好，其次是北斗，下来是Y，最后是Y，由此，我们可以大面积推广千秋，当地的苹果经济进一步提高。 参考文献 [1]西北农业大学植物生理生化教研室.植物生理实验指导[M].西安:陕西科学技术出版社,1987:51-55. 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