文殊兰化学成分及生物活性的研究（可编辑）

文殊兰化学成分及生物活性的研究（可编辑） 第二军医大学 硕士学位 文殊兰化学成分及生物活性研究 姓名:孙倩 申请学位级别:硕士 专业:药学、药物化学 指导教师:张卫东 20080401文殊兰化学成分及生物活性研究 缩略语说明 .. . ? . ? . 曲.独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究 工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人 已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的 任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明 的法律责任。 学位论文作者签名: 日期: 年月 日 学位论文版权使用授权声明 本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,第 二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和 电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密的学位论文在解密 后适用本授权 学位论文作者签名: 导师签名: 日期: 年 月 日期: 年 月文殊兰化学成分及生物活性研究 摘 要 .. 又名文兰树、牛黄伞、千层喜 文殊兰 和十八学士等,为石蒜科多年生草本植物。主要分布于福建、台 湾、湖南、广东等地,常生于海滨地区或河旁沙地。文殊兰味辛、苦、性?, 有毒。 清热解毒,祛瘀止痛。主治热疮肿毒,淋巴结炎,咽喉炎,头痛,痹痛麻木,跌打 瘀肿, 骨折,毒蛇咬伤。 石蒜科植物很早就被用作药用植物,用于治病疗伤。而应用石蒜科某些植物 治疗早期癌症的历史可以追溯到公元前世纪。现代人们对石蒜科的生物碱成 分 进行了广泛的药理活性研究,认为其具有中枢神经系统作用、心血管系统作用、 抗肿瘤作用、抗茵和抗病毒作用等。从石蒜科文殊兰属植物中分离得 到的生物碱类成分是石蒜科生物碱的典型代表。文殊兰属植物在我国仅分布两种: .. 文殊兰 和西南文殊兰 .,且 未进行过系统的化学成分研究。本课题组前期对文殊兰属在我国分布的其中一种 西南文殊兰,进行了系统的化学成分及生物活性研究,从西南文殊兰中分离得到 的生物碱结构多样并且具有显著的细胞毒活性。作为对前期工作的延续和拓深, 我们对该属在我国分布的另一种文殊兰,进行了系统的化学成分及生物活性研 究。 本课题以采集于云南省怒江州福贡县的文殊兰为研究对象,对其乙醇提取物 进行了化学成分的系统分离和药理活性的筛选。 化学成分研究:本文应用各种现代色谱分离技术对文殊兰鳞茎乙醇提取物进 行了化学成分的分离,从中共分离得到个化合物,运用现代光谱分析技术 .等和物理化学鉴定了其中的个化 .,., 合物,分别为:牛?幸?? ?一 ? 第二军医大学硕士学位论文 ??????????????????????????????????????一 ? ? ?一 .石蒜碱 恩其明 一 一.甲基文殊兰胺 甲基文殊兰胺盐酸盐 文殊兰胺 一一 一 一 ?/ ? 反式.香豆酰酪胺 ? 反式.咖啡酰酪胺 一 一 羟基.’.甲氧基黄烷’,羟基羟甲基苯..咖啡酰基.伊.葡萄糖苷 咖啡酸 ?一 对.香豆酸对羟基苯甲酸 对羟基苯甲酸乙酯 ,,.原儿茶醛 ?? 对羟基苯甲醛 一 正丁基吡喃果糖苷豆甾醇豆甾醇苷胡萝卜苷 ?. /谷甾醇 ?.文殊兰化学成分及生物活性研究 ..、和为个新化合物,其中..和..是新的 生物碱。..是从文殊兰属中首次分离得到的化合物。..、、、 、、、、、、、、和为个从该植物中首次分离得到的 化合物。共分离得到个生物碱,有五种结构类型:吡咯并菲啶型,、桥 亚乙基菲啶型,多花水仙碱型,菲啶型和小檗碱型。 药理活性筛选:依据文献报道的石蒜科生物碱显著的抗肿瘤活性,我们采用 四氮唑盐..,皿还原法对文殊兰药材的粗提物到部 位到单体化合物进行了细胞毒活性的跟踪筛选,选用的细胞株有人肺癌细 胞、人细胞白血病细胞、人肠癌细胞、.人白血 病细胞。结果显示:文殊兰醇提物、乙酸乙酯部位和正丁醇部位对人肺癌细 胞, 人肠癌细胞,人细胞白血病细胞和人白血病细胞均有较好的抑制活性。进一 步的 、.、和. 单体筛选结果显示:化合物..、和 均显示显著的细胞毒活性;化合物..和..对、和 .有显著的细胞毒活性;..对、、和.有 显著的细胞毒活性,值分别为. /、../、./和./; 对有较强的细胞毒活性,值为.且/:对 .人白血病细胞有显著的细胞毒活性,值为./;..对 .人白血病细胞有较为显著的细胞毒活性,值为./。以上结 果表明,具有细胞毒性的单体主要是文殊兰中的生物碱成分,其中又以吡咯 并菲 啶和、桥亚乙基菲啶两种类型的生物碱细胞毒活性最强。 文殊兰单体的抗血小板聚集实验结果表明,小檗碱型生物碱..对 种诱导剂诱导的血小板聚集都有一定的抑制作用,尤其对二磷酸腺苷诱 导的血小板聚集有明显的抑制作用。 结论:本文从文殊兰中共分离并鉴定个化合物,其中个新化合物,个化 合物为首次从该植物中分得。经过四氮唑盐.,? 还原法证明文殊兰的乙醇总提物、乙酸乙酯部位和正丁醇部位以及分离得到 的 个化合物具有显著的细胞毒活性。 关键词: 文殊兰,石蒜科,生物碱,吡咯并菲啶,、桥亚乙基菲啶,细胞毒活 性,抗血小板聚集活性:军医大学硕士学位论文..记 . , . : ...,.. , . ., ,, ., % .、、. , 刀 , , .:幸?一 ?一 . ??? 一 一 ?一??一文殊兰化学成分及生物活性研究? ??/?,? ?一 ’,.’. ?’, 宰 ?.. 昏? . ? 一 一 ,,.. ?一 ?一 刀?‖ ?一 一 ,?、 ..、、、、 、 、、、、、、 . ”【 .?、、 【 ,、、 .... .. 【 、 .. 怕【 、. 、 ./、.“‖、../ .肛/ .第二军医大学硕士学位论文 ;?. /;./;.“卧... : , , ,,.第二军医大学硕士学位论文 士 刖舌 一、文殊兰研究概况 ..记 文殊兰 又名文兰树、牛黄伞、千层喜和十 八学士等,为石蒜科文殊兰属多年生草本植物。分布于福 建、台湾、湖南、广东、云南等地,常生于海滨地区或河旁沙地。文殊兰味 辛、苦、 性?,有毒。清热解毒,祛瘀止痛。主治热疮肿毒,淋巴结炎,咽喉炎,头痛,痹痛麻木, 跌打瘀肿,骨折,毒蛇咬伤【。 文殊兰属植物为石蒜科中的一个大族,共有多个种,广泛分布于温带亚热带 地区。文殊兰属植物在世界上很多地方都有着长期的应用,在印度被当作民间药用于 治疗泌尿系统的疾病;在马达加斯加外用治疗皮肤病;在用于制绷带和止痛;.记 我国文殊兰属植物仅分布两种:文殊兰 和西南文 殊兰 。文殊兰很早就在民间被用于治疗腰痛、跌伤骨折、皮肤溃疡 和淋巴结炎等。目前国内外对文殊兰的化学成分和药理研究并不爹。 一化学成分研究 、生物碱 国外学者对文殊兰属不同种的化学成分进行了研究,发现所含的生物碱基本代表 了石蒜科生物碱的特征。从文殊兰属植物中分离得到的生物碱虽然结构多种多样,但 大部分都是杂环衍生物,其基本骨架主要有三种:奈卜,二氧苄基一苯乙胺如 、吡咯并菲啶如石蒜碱、,一桥亚乙基菲啶如条纹碱、文殊兰碱。 这三种基本骨架通过氧化、脱氢、环化、、一甲基化和开环如石蒜碱转化成小星 蒜碱等反应,主要形成了以下种母核结构:,二氧苄基一菲啶、 吡咯并菲啶?、石蒜宁碱,?、,环氧一菲啶?、,一环氧 ,桥亚乙基菲啶、漳州水仙碱,、恩其明?、 ?、?见..。丈殊兰化学成分及生物活性研究 文殊兰鳞茎中含有文殊兰碱、文殊兰星碱、石蒜碱 和鲍威文殊兰碱等【。 、其他成分 与生物碱成分相比,文殊兰属植物中的非生物碱成分研究的极少,目前己发 现其 含有黄酮类、色酮类、萜类、脂肪酸类、甾醇类和多糖类等成分】。 ? , ? ? ? ? ? ..文殊兰属植物中生物碱的结构母核 、微量元素 文殊兰的花含有较高浓度的和较低浓度的【们。第二军医大学硕士学位论文 二生物活性研究 文殊兰属植物中的生物碱成分具有广泛的药理活性,研究表明具有中枢神经 系统 作用、心血管系统作用、抗肿瘤作用、抗菌、抗病毒作用掣】。 、中枢神经系统方面 具有镇静镇痛及解热作用。石蒜碱对小鼠及家兔有明显镇静作用,并能延长 巴比 妥类药物的睡眠时间,还能加强延胡索乙素及吗啡的镇痛作用。石蒜碱静脉注射或皮 下注射,对人工致热家兔均有明显解热作用。大鼠皮下注射或静注石蒜碱,后体 温开始下降,后达最低,并与氨基比林有协同作用【。 、心血管系统方面 实验证明,石蒜碱对蟾蜍心脏先兴奋后抑制。对麻醉大鼠、猫、犬及兔均有降压 作用,机制为直接扩张外周血管及抑制心脏。二氢石蒜碱虽然对大鼠去甲肾上腺素的 升压作用无明显影响,但可减弱肾上腺素的升压作用,其降压机制主要是阻止儿茶酚 胺的释放 、抗肿瘤方面 应用石蒜科植物治疗癌症最早在公元前世纪。实验表明,石蒜碱能抑制小鼠艾 氏腹水癌细胞的无氧酵解和有氧酵解,还能使癌细胞肿大并溶解。石蒜碱还对小鼠 肺癌有抑制活性【】。恩其明似.对晚期宫颈癌、卵巢癌的治疗有较好效 果,且毒副反应低,并可与其它的抗癌药联合应用,亦可配合手术或放疗,从而提高了 近、远期治愈率更由于对骨髓无抑制作用,可作为二线药物,是中西医综合治疗有效 的抗癌药物?。有研究报道,石蒜碱有显著对抗肺癌细胞、小鼠肉瘤 细胞和肝癌.细胞的强细胞毒活性【】。文殊兰胺有对抗人乳腺癌 .细胞、人纤维肉瘤细胞、人肺癌?细胞、人结肠癌. 细胞和人黑素瘤.细胞的较强细胞毒活性【协。 、抗菌抗病毒方面 大多数石蒜科植物提取物具有对抗黄体八叠球菌、金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的 ?.文殊兰化学成分及生物活性研究 活性。对疱疹病毒的研究表明,具有两个羟基和一个六氢吲哚结构的文殊兰属生物碱 具有开发价值,其抗病毒作用机理为抑制细胞有丝分裂及细胞丝伸长,并抑制细胞 复制【。 、毒性 石蒜科植物为有毒植物,因为全科植物都含有一类特殊的有毒生物碱菲啶衍生 物。误食可引起恶心呕吐和厌食,甚至会引起中枢神经系统麻痹和虚脱,最后死亡。石 蒜碱小鼠皮下注射灌服和腹腔注射的分别为/、/和./。 二、选题指导思想 石蒜科植物全世界约有属余种,它很早就被用作药用植物,应用石蒜科某 些植物治疗早期癌症的历史甚至可以追溯到公元前世纪。文殊兰属植物为石蒜科中 的一个大族,共有多个种,是药用植物的重要来源之一。文殊兰属植物在我国仅 分布两种:文殊兰 .. 和西南文殊兰 ., 未进行过系统的化学成分研究,对其药理活性的物质基础并不明确。本课题组前期对 该属在我国分布的其中一种植物西南文殊兰,进行了系统的化学成分及生物活性研究, 从西南文殊兰中分离得到的生物碱结构多样,并且大部分生物碱具有显著的细胞毒活 性。本课题组对该属植物活性成分的研究具有良好的工作基础,而且对文殊兰属分布 于我国的两种植物进行系统的化学成分及生物活性研究是本课题组的目标。鉴于以上 这些原因,我们认为很有必要对文殊兰的化学成分及生物活性进行深入系统的研究, 进而寻找其中的活性成分。本研究工作的意义在于: .研究文殊兰中具有抗肿瘤活性的天然产物,阐明文殊兰抗肿瘤活性的物质基础; .发现具有抗肿瘤活性的天然产物,为新型抗肿瘤药的研究和开发提供物质基础; .进一步明确文殊兰的化学成分,为天然药物化学研究积累资料;为文殊兰进一步的 药理学研究的构效关系研究奠定物质基础; .为文殊兰的开发和利用提供化学成分方面的依据。第二军医大学硕士学位论文 三、课题 本研究以云南产的文殊兰为研究对象,对各极性提取部位的化学成分进行系统分 离,并采用法对其抗肿瘤作用进行活性跟踪,筛选文殊兰中具有抗肿瘤的活性部 位和单体化合物,根据预实验结果和文献资料,设计实验研究方法如下: .药材干燥粉碎,%乙醇渗漉,渗漉液浓缩得总提物浸膏; .以石油醚、氯仿、乙酸乙酯以及水饱和的正丁醇进行萃取,得到各极性部位; .法分别评价文殊兰总提物及其各极性部位的细胞毒活性; .对各极性部位进行系统的化学分离,采用光谱分析技术并结合化学方法鉴定各单 体化合物的结构; .筛选活性部位单体化合物的细胞毒活性; .筛选活性部位单体化合物的抗血小板聚集活性。 ?.文殊兰化学成分及生物活性研究 参考文献 中华本草》编委会,‘中华本草》。上海科学技术出版社。, 第分册,? 【】 江苏新医学院,‘中药大辞典》。上海人民出版社,,, : 窿口 ,, .,..,.. . ? , 沙美,丁林生,文殊兰属植物中生物碱的研究进展,国外医药:植物药分册 . 佟 ...,. .. , ... . . . .? . ,, 贾献慧,周铜水等,石蒜科植物生物碱成分的药理学研究。中医药学 .】 .,..,既. 隅, .? 钱信忠,‘有毒中药大辞典:.天津科技翻译出版公司,. ,叫 ... . .... 胡庆和,张素胤等,石蒜内铵综合治疗妇科晚期恶性肿瘤一附例总结。浙江中 西医结合杂志 刁 ....,. .. 锄..... .. 三习 ..玑 .. ? 清风,文殊兰球茎中的具有细胞毒性的生物碱类和黄酮。 国外医学:中医 中药分册 们 . 习 .,..%.: . ?:...毗. ,.? ..:军医大学硕士学位论文 【】..,.. . , . . 【】...., . 【】 ..... ? 文殊兰化学成分及生物活性研究 文殊兰化学成分的研究 一、仪器和试剂 熔点测定仪:天津分析仪器厂型熔点仪温度未校正; ; 红外光谱仪: 紫外光谱仪: 紫外光谱仪; 型, .型; 核磁共振仪: 质谱仪:.磁式?: /...;; 旋光仪: 超声发生器:型上海科导超声仪器有限公司; 柱层析填料:硅胶目,烟台芝罘黄务硅胶开发试验厂; ,公司; 反相硅胶,公司; 层析硅胶板:硅胶预制板,烟台芝罘黄务硅胶开发试验厂 色谱溶剂系统:石油醚/乙酸乙酯不同比例; 氯仿/甲醇不同比例; 氯仿.甲醇/水下层,不同比例; 显色剂:%乙醇,碘蒸气,碘化铋钾试剂; 提取用乙醇为工业级,其余试剂均为分析纯。 二、植物来源 文殊兰药材为年月采自云南省怒江州福贡县,经云南省怒江州民族医药 衄. 研究所周元川所长鉴定为石蒜科文殊兰属植物文殊兰 . .? ..文殊兰鳞茎药材图 文殊些牛长环境图 文殊兰全植物图 文殊兰标本图文殊兰化学成分及生物活性研究 三、文殊兰化学成分的提取分离与纯化 一提取与分离 文殊兰干燥鳞茎,经粉碎后以%乙醇渗漉提取,提取液减压浓缩至干得 总提物浸膏约克。将总提物浸膏均匀分散于水中,分别用石油醚、氯仿、乙 酸 乙酯和水饱和的正丁醇萃取,得到石油醚萃取物克、氯仿萃取物克、乙酸 乙酯萃取物克和正丁醇萃取物克。 石油醚部位经反复硅胶柱层析,石油醚一乙酸乙酯:~:系统梯度洗脱, 重结晶纯化得化合物..,,,,共个。 氯仿部位经反复硅胶柱目层析,氯仿一甲醇:~:系统梯度 洗脱,经葡聚糖凝胶.柱色谱、反相硅胶和重结晶纯化得化合物 ..,等个。 乙酸乙酯部位经反复硅胶柱~目层析,氯仿一甲醇:~:系统 梯度洗脱,经葡聚糖凝胶.柱色谱、制备液相和重结晶纯化得化合物 .,等个。 正丁醇部位经.大孔树脂以水,%乙醇,%乙醇,乙醇和%乙醇 梯度洗脱,经反复硅胶柱一目层析,氯仿一甲醇:~:系统梯度洗脱, 经葡聚糖凝胶.柱色谱、制备液相得化合物..,等个。 由四个极性部位共分离得到个化合物,经光谱和化学方法鉴定了其中个化 合物。提取分离流程图如下: ..军医大学硕士学位论文 上覆誓言蓑霪藉提取 嘲 卸 吧 乙 位 正 疑 矗披 皮 牲 嗡篙 析 析 硅诎液胶蛆相 渊 酬土一孥 一一一~一 ~ 曲脯 曲。 ?一 一 ,、““ “儿 ,、 。 . 、?”... . .. ..文殊兰提取分离流程图 . .四文殊兰化学成分及生物活性研究 二化合物结构、编号及名称?为新化合物 幸 :文殊兰新碱..第二军医大学硕士学位论文恩其明 石蒜碱..甲基文殊兰胺盐酸盐 ,?? 文殊兰胺 ? / ..文殊兰化学成分及生物活性研究? .反式.香豆酰酪胺 .反式.咖啡酰酪胺 ?’ 血 削膨洲。一一 。?一杏咣 ?? .,’一二羟基’甲氧基黄烷 。’一 ??? ...第二军医大学硕士学位论文咖啡酸 对.香豆酸 协吼.湖审洲? 对羟基苯甲酸乙酯 对羟基苯甲酸原儿茶醛 一, ?? 对羟基苯甲醛 正丁基吡喃果糖苷 .文殊兰化学成分及生物活性研究? 豆甾醇 豆甾醇苷 一 卢谷甾醇 伊胡萝苷 化合物的结构鉴定 一新化合物的结构解析 新生物碱的结构解析 ? .第二军医大学硕士学位论文八 ./ 嗨 仃陀 .. , 淡黄色无定形粉末,易溶于甲醇;碘化铋钾反应阳性,提示可能为生物碱类化 合物。在甲醇中测得比旋光度陋】。 .,。高分辨质谱? 和 显示准分子离子峰/ .【.:.,结合 确定其分子式为,根据分子式计算化合物不饱和度为。化合物 、、、和处的吸 ..的光谱在波长九衄 收峰,提示该化合物具有菲啶母核结构【?。 化合物..的 .鼢给出六个芳香氢,其中化学位 移晶.和.处有两个单峰,显示存在一个有对位氢的四取代苯环环; 化学位移为晶.,,/. ,,.,,,.,. ,., 也. 一,显示存在一个,,三取代苯环环。一的 .鼢给出个碳信号,其中芳香碳有个.结合谱可知化合 物..有个季碳信号、个次甲基碳信号和个亚甲基碳信号。个亚甲基 碳信号中,一个是亚甲二氧基碳信号毳.,另一个磊.,?均是连氧的 亚甲基碳信号。七个次甲基碳信号中仅有一个碳信号在高场区域菇., 是连氧的次甲基碳信号。将..的氢谱、碳谱与已知化合物 ..的氢谱和碳谱 相比,发现碳谱基本一致,只是 ..的碳谱比多了两个饱和碳信号,一个次甲基碳莲.和一 个亚甲基碳鑫.。可以确定此化合物应是的衍生物。 ..的氢谱给出国.,峨.,. ,、.,, 谱 .,. ,.和.,她.,. 一,结合一 . /.的相关信号,显示化合物具有片段。在.谱 上可见/以及/.的相关信号,表明.片段连接在 。 和 位。因此化合物..的结构被鉴定,并命名为 .矩文殊兰化学成分及生物活性研究 。 数据见墨:竖墨 苎呻砌????丽???面矿而面鬲百??面二厂一..黄色无定形 粉末,易溶于甲醇;碘化铋钾反应阳性,提示可能为生物碱类化合 .,.高分辨质谱显示 物。在甲醇中测得比旋光度陋】一。 署 准分子离子峰/ .【】。.:.,结合 确定其分子式为,根据分子式计算化合物不饱和度为。 ..军医大学硕士学位论文 叫鹅 叩鹅..,, ..的紫外吸收峰与石蒜碱【,九嘲 】的紫外吸收峰相似?九,,。?一的 , ,结合碳谱 ,给出亚甲基质子信号南.和. 谱给出两个芳香 的亚甲基碳信号菇.,提示该化合物具有亚甲二氧基。 氢,晶.和国.处各有一个单峰,提示存在一个有对位氢的四取代苯 环环;在高场区观察到两个特征性连氧质子信号:函.,,和. ,,.及一个烯氢信号.,,。的位,位和 .. .文殊兰化学成分及生物活性研究 位碳的化学位移分别为况.,..,.,与石蒜碱相比均 向高场移动. ;位,位和位碳的化学位移分别为戈.一,.一, ..,与石蒜碱相比均向低场移动. 。再结合此化合物的分子式比石蒜 碱多了一个氧原子,推测此化合物中氮可能通过氧与位碳相连。在谱. 中观察到如下相关信号:./.,./.?进一步证实了我们的推导。 由于化合物..与石蒜碱相比,它的基本骨架没有发生改变,所以 ..的.和的相对构型应与石蒜碱一致,即.是.构型是 【.构型,其相对构型进一步被偶合常数所证实【。在谱中我们又观察到了如 下相关:./.的相关信号,.和./.的相关信号,表明 .和.均为.构型。因此化合物..的结构被鉴定,并命名为 。 。 和 数据见 、新酚类化合物的结构解析 一?? 黄色无定形粉末,易溶于甲醇;在甲醇中测得比旋光度阻】.。 ., 。高分辨质谱。显示准分子离子峰/ .【】. 和?确定其分子式为,根据分子式 :.,结合 计算化合物不饱和度为。 ..第二军医大学硕士学位论文 ..的 眩谱给出函.也,. 一”,.也,,. ,一?,.,,,. 一”,.也,. ,.” .,,,.,. .”,结合 给 出的昆.,.,.,.,.,.,.,.和.,可知化合物中 具有咖啡酰结构。氢谱的芳香质子区域还给出晶.,,,. ,., ,.,. ’一和.,,. ,提示具有,,三取代的苯环 结构。 婴皇堡皇旦迦塑垒:堂巳皇曼型垒塑旦璺:里墨生:至至竺旦旦 ? 函.,力 昆. ’,且 ?.的氢谱中给出糖的端基氢信号国.,,. 谱中给出糖的六个碳信号茈.,.,.,.,.,.,表明分子中可 我们又将此化合物先碱水解然后再酸水解后得到的糖,通过 能存在一个‖.葡萄糖。 ..文殊兰化学成分及生物活性研究 :::, 薄层与卢一葡萄糖的标准品进行对照:: .硒】,发现它们的值相同,可判断出化合物一中含的糖是葡萄糖。 在谱..上可见葡萄糖六位碳上的两个氢南.,,,., ... ,’和函.,,.,. .与咖啡酰”位羰基碳彘 .的信号相关,因此确定咖啡酰基连接在葡萄糖的位碳上。此外,在谱 上还可见葡萄糖端基碳上的氢函.,,,. 与芳环位碳国.有相 关信号,表明芳环与葡萄糖的.捷.相连。在谱上还可见羟甲基氢晶 .,与.、和.有相关信号,且 谱中显示羟甲基氢 与.和.有相关信号,所以判断羟甲基连接在芳环的位。因此化合物 的结构被鉴定,命名为一一 . 和 数据见 卢,其 二已知化合物的结构解析 、生物碱类化合物的结构解析 吼 ? ....和 黄色无定形粉末,易溶于甲醇;碘化铋钾反应阳性;、,九。撒 有吸收,为典型的小檗碱型生物碱的吸收图谱;.显示分子离子峰/ 】,结合、”及谱推测其分子式为,根据分 子式计算其不饱和度为。 ..的” ,.中显示分子中共有个碳信号,包 括个亚甲二氧基,个甲氧基,个脂肪亚甲基,个苯环,以及与氮相连的个 和个.结构,除去取代基外,母核结构推测为小檗碱型季胺碱类化合物。 国.,力.川 ..的 中可以看到低场区有单氢函. ,,与季胺碱中和氮相连的位氢化学位移行为相符。芳香区有个芳氢信号, 一组为苯环邻位偶合晶.,也,. ’和.,,,. , 另个为单氢信号函.,,一,.,,和.,,。晶 .,处有个信号,推测为亚甲二氧基氢信号。高场区除了个甲氧基 .文殊兰化学成分及生物活性研究 函.,和.,信号外,还有一对偶合的信号, .,, . ,.和.,,. .,可以确定该化合物为带有个甲氧基并存 在亚甲二氧基取代的小檗碱型结构。在谱..上可见两个甲氧基氢信号 分别与.、.有相关信号,因此可确定两个甲氧基分别连接在.、.位。因 此化合物..的结构被鉴定并命名为文殊兰新碱,其 和 数据见 。在 数据库中检索此化合物,仅有一篇关 于此化合物做染料方面的文献【】,未见此化合物碳谱和氢谱数据的报道。 所以本文首 次报道了该化合物的核磁数据。? 浅黄色无定形粉末,溶于甲醇,碘化铋钾反应阳性,提示该化合物可能为生物 碱 类化合物。正模式.给出准分子离子峰 【.。负模式.给出 、 准分子离子峰/ 【‘。将其 及谱与..的 谱比较后推测该化合物为成盐的 。将其氢谱与?.的氢谱比较 后发现氢谱基本一致,比较碳谱发现与直接相连的.,.均向低场移动 化学位移分别为况.,.,与邻近的,.,.,..均向低场移动 化学位移分别为菇.,.,.,.,.,其它碳的化学位移基本一致,这很可能是成盐 的影响。所以推断该化合物为 。其 。 和 数据见 白色无定形粉末,溶于氯仿;碘化铋钾反应阳性;.显示准分子离子峰/ 、 及谱推测其分子式为 ,】,结合 ,不饱和度为。 ..的 ,给出亚甲基质子信号晶.,,结 合碳谱反.的亚甲基碳信号,提示该化合物具有亚甲二氧基。在 谱芳香 质子区域,化学位移为晶.和.处有两个单峰,显示存在一个有对位 氢的四取代苯环环;另外三个芳氢的化学位移为:函.,. 一、.,,,.,. 一和.,,,. ,.提示有一苯环上 邻位三个质子的存在; 还显示晶.,. ,.和.,也 ..第二军医大学硕士学位论文 . ,,结合碳谱低场显示的八个季碳信号,七个次甲基信号和一个亚甲基 信号提示具有吡咯并菲啶生物碱母核结构。综合分析碳谱、氢谱以及分子式 和不饱和 和 度,初步推断为。归属其 数据并与文献报道的 和 数据. 【对照,基本一致,故鉴定该化合物为。其 。 和 化合物.的 谱数据白色无定形粉末,溶于氯仿;碘化铋钾反应阳性:正模式. 给出准分子离 子峰/ ;结合 和 ,推测分子量为 谱推测 其分子式为,不饱和度为。 .的 .谱在芳香质子区域,化学位移为函 .功和.处有两个单峰,显示存在一个有对位氢的四取代苯环环; 在芳香质子区域还显示三组信号:函. ,.,. .、.,, 一..,. .和.,,.,. ,一提示有一苯环邻位三个质子的存 在;碳信号均在碳谱低场区域,并显示八个季碳信号和七个次甲基碳信号,综 合分析 碳谱、氢谱以及分子式和不饱和度,初步推断是吡咯并菲啶类生物碱。与.. 和 数据并与文献报道的 比较,该化合物少了亚甲二氧基。归属其 和 【】对照,基本一致,故鉴定该化合物为。其 数据见 。 和 谱数据 化合物..和..的 注: ;. 白色无定形粉末,溶于氯仿、甲醇,碘化铋钾反应阳性,提示该化合物可能为 生 、” 物碱类化合物。正模式.给出分子离子峰/ 【】;结合 推测其分子式为,不饱和度为。 ..的 .中可以看到亚甲基质子信号函. , 和. ,结合碳谱菇.的亚甲基碳信号,显示该化合物具有亚甲 ..二氧基。在谱芳香质子区域给出两个单峰函.和.,显示存 在一个有对位氢的四取代苯环环。谱还给出两个苯苄基质子信号晶. ,也,. .,提示该化合物具有典型石蒜碱型母核结构。? 和. .中低场区域毳.,.,.,.,.,.为苯环 上的碳信号;磊.和.为单取代双键信号;在高场区域有四个次甲基信号,三 个亚甲基信号。初步推断该化合物为石蒜碱。与文献【】数据比较,最终确 定为石蒜碱, 和 。 数据见 即石蒜碱..。其 和 谱数据 化合物..和..的 注: ;..黄色粉末,溶于氯仿、甲醇,碘化铋钾反应阳性,提示该化合物可能为 生物碱类 和 化合物。.显示分子离子峰/ 】,结合 谱推测其分子式为,不饱和度为。 ..文殊兰化学成分及生物活性研究 ..的 ,给出亚甲基质子信号函.,, 结合碳谱磊.的亚甲基碳信号,显示该化合物具有亚甲二氧基。在谱芳 香质子区域给出两个单峰蠡.和.,显示存在一个有对位氢的四取代 苯环环;还给出两个单氢信号.,,?,.,,一; ,低场显示八个季碳信号,五个次甲基信号,一个亚甲基信号。初步推 断该化合物为菲啶类生物碱。归属其 和 数据并与文献报道的 和 对照,基本一致,故鉴定该化合物为。其 数据见 。 , 白色无定形粉末,溶于氯仿、甲醇,碘化铋钾反应阳性,提示该化合物可能为 生 和 物碱类化合物。正模式.给出准分子离子峰/ ;结合 谱推测其分子式为,不饱和度为。 ..的 ,蝴给出亚甲基质子信号晶.,, 还给出 结合碳谱菇.的亚甲基碳信号,显示该化合物具有亚甲二氧基。 两个烯质子信号.,,,.,. ,一,.,,.,. ; 一个四取代苯环对位质子信号国.,,?,.,,:两个苯苄基质 ,,. 子信号晶.和. ,.。以上这些特征提示该化合物具 有典型文殊碱型、一桥亚乙基菲啶型母核结构。 国.,和. ,以及 ,.蝴中反.,.提示分子 结构中有两个甲氧基。综合分析碳谱、氢谱以及分子式和不饱和度,初步推 断为 和 谱数据与文献【】一致,故确定为.. ..。其 和 数据见 和 甲基文殊兰胺,即 .。其 。 ..甲基文殊兰胺盐酸盐 . 白色无定形粉末,溶于氯仿、甲醇,碘化铋钾反应阳性,提示该化合物可能为 生 物碱类化合物。正模式给出准分子离子峰/ .瞰. . .及分子式,负模式?给出准分子离子峰/ ‘..及分子式。推断该化合物为生物碱的盐酸盐,除 ...第二军医大学硕士学位论文 去成盐的盐酸,分子式应为。比较两个化合物的氢谱和碳谱后发现,化合 物的碳谱中与直接相连的.和.均向低场移动 其 它碳的化学位移基本一致,这很可能是成盐的影响。所以初步推断该化合物 为.. 甲基文殊兰胺盐酸盐。 证实了我们的推断。因此,确定该化合物为..甲 。 基文殊兰胺盐酸盐。其 和 数据见 白色无定形粉末,溶于甲醇,碘化铋钾反应阳性,提示该化合物可能为生物碱 类 化合物。正模式.给出分子离子峰/ 和” 【】;结合 和 化合物.的 谱数据 推测其分子式为不饱和度为。 的 一 ,.嘲给出亚甲基质子信号晶.,, 还给出 结合碳谱五.的亚甲基碳信号,显示该化合物具有亚甲二氧基。 ..文殊兰化学成分及生物活性研究 ,和.,,. , 两个烯质子信号函.,,.,. .;一个四取代苯环对位质子信号函.,,?和.,,.;两个苯 苄基质子信号晶.和. ,,,. 。以上这些特征提示该化 合物具有典型文殊碱型母核结构。与化合物..即..甲基文殊兰胺 的碳谱相比,此化合物少了一个甲氧基,且位碳向低场位移了 和 数据并与 初步推断该化合物的位被羟基取代。归属其 文献报道的【】对照,基本一致,故鉴定该化合物为文殊兰胺。其 。 和” 数据见 和 谱数据 化合物..、.. 和..的’ “ .. 一 . . .,. . ,.,. .. ..’. ..,.. .,.,... ’ . . ’? . , . . . , . , . . ’ . ’’.,. . ’,. . ’,.,. .’. .’’.,. . ,.,. 缸 . ’ . ’ . , . ’ . , .’ ? . . , . .跖 ’ .. . . ’ . . .’ . .’ .’ . . . 注: ?涯 卜 .; .蝴; ? 。 ? 淡黄色无定型粉末,溶于甲醇;正模式.给出准分子离子峰/ ..