乌苯美司对小鼠的免疫促进作用

乌苯美司对小鼠的免疫促进作用 乌苯美司对小鼠的免疫促进作用 中国医药工杂志Chinese]ourna】ofPhatutlcal999,30(11J :药理与临床; ,…………-- 2r乌苯美司对小鼠的免疫促进作用 ,/77. 陆瑶华凌骝张毅翟晓波沈炜明———一,—一 (上海市第六人民医院临床药学研究室.上海200233) 摘要观察乌苯美司(1)对正常及免疫缺陷小鼠绵羊缸细胞(SRBC)和喙唑酮诱发的迟发性超敏 反应(DTH)的影响低剂量(O1,l,l0或tOOg,只]能促进对SRBC的DTH反应,恢复嚼唑酮l 起的DCH损伤,1的该作用有年卣争依赖性:高剂量(1000g/只)则无此作用.1亦能恢复环磷酰胺 结果表明,l能促进细胞介v给药或Ip接种Ehrhch腹水擅细胞后引发的DTH反应. 导的免疫反 应,并恢复降低的细胞介导免疫反应功能 关键词!苎旦sRBcDTH曝唑酮 乌苯美司(ubenlmex,1)系从橄榄网状 链霉菌(Streptomycesolivoreticuli)培养液中 发现的一种小分子肽,化学名为(一)N [(2S,8R)3一氨基一2羟基4一苯丁酰]一I亮氨 酸,是一种有效的氨肽酶抑制剂.据报道,1 能与不同类型的细胞(包括巨噬细胞和淋巴 细胞)结合,产生免疫反应j.国内由四川抗 菌素工业研究所首先试制成功.初步研究证 明,国产1对小鼠肿瘤生长有显着抑制作用, 和其他化疗药物联合使用,可明显增强小鼠 抗肿瘤疗效并促进免疫反应.1体内外对小 鼠脾细胞,NK细胞活性具有明显的增强作 用,对人淋巴细胞分泌IL2,表达IL2受体 及其与IL一2发生反应的能力具有显着增强 作用-本文进一步探讨1对小鼠免疫系统 的影响. 1实验材料 1.1实验动物 1由四川抗菌素工业研究所化学制剂研 究室提供,批号9408]8 CDF1小鼠(雌雄均有,4,14周龄), ddY小鼠(雄性.6周龄) 1,2环磷酰胺溶液制备 用灭菌蒸馏水将环磷酰胺(上海第十二 翩药厂)稀释至16mg/ml,ip0.2jml/只. 细胞血清翩备 兔抗鼠淋巴细胞血清(ALS)按Levey方 法制备 2实验方法与结果 2.1口服1对CDF1小鼠皮下注射SRBC 诱发的迟发型超敏反应(DTH)的影响. 用Lagrange等方法测试对SRBC诱 发的迟发型超敏反应的影响.结果见表1.在 致敏同时pol(1,100g/只),能促进SRBC 诱发的DTH. 表1p01对sc10'SRBC诱发小鼠 DTII的影响?.n一5) 1剂量(Vg/只)脚垫肿胀厚度f×0.1mm) ?戢敢同时给予1 **P<00,5(f橙验) 2.2口服1对CDF1小鼠的作用与鼠龄的 关系 方法同上,但CDF1鼠龄为4,8,14周龄 3组.结果证实,1对SRBC诱发的DTH的 . ?加? 中国医药工业杂志Chineselourna【ofPharmaceuticals19g9.30(11 影响依赖于小鼠的年龄,如表2所示.1的该 作用在不同年龄鼠中有所不同,4周龄鼠未 观察到1对DTH的促进作用;而8周龄鼠, 致敏同时pol1,100g/只,可显示1对 DTH的促进作用;14周龄小鼠pol0.1, i00g/只,显示出更强的DTH反应然而, 在所有情况下,最高剂量(1mg/只)对DTH 均无促进作用.1促进反应的台适剂量为l0 , 1O0g/只. 表2鼠龄对1促进DTH的影响(土s) ?致墩同时pol 2.3不同给药途径的作用 通过脚垫试验测试1不同途径给药对 DTH的促进作用时发现,liv,ip,po1,10, i00/只具有促进作用,而sc则无}但l较 高剂量sc给药时,对SRBC产生DTH有促 进作用. 2.4致敏前后不同时间口服的作用 在SRBC致敏前后不同时间内pol10 g/只,测定SRBC诱发的DTH反应. 致敏前1,6d及致敏后0,l,2,3d, pol,均能有效促进DTH.致敏前1d及致敏 后O,3d给予1最为有效,1的最佳给药时 间似乎为致敏当天或致敏后1d. 2.5对ddY小鼠的作用 采用连续给药法测定1对DTH的影 响.给ddY小鼠(雌性,8周龄)致敏后1,2d 或致敏后1,2,3dpo11.ug/只. 发现致敏后1d给予1最为有效,致敏 后2d效果最差.据文献[1]报道,在注射 SRBC的诱发时间内给予1无效. 2.6l对静注SRBC诱发DTH的促进作用 测定1对iv10SRBC诱发DTH的促 进作用.CDFI小鼠(雌性,l0周龄)iv10 SRBC致敏,同时po不同剂量1,4d后于左 后爪脚垫处sc10.SRBC,24h后测量其肿胀 程度. 如表3所示,低剂量l(o.1,1,10g/只) 能明显促进DTH,台适剂量为10,g/只,而 高剂量1(100,i000g/只)则无作用. 表31对小鼠iv10SRBC致敏诱发 DTH的影响土) 1刑量(g/凡)脚垫肿曩}厚度(×0.1ram) ?致镀同时po1**P<O.050检验) 2-71对注射ALS所致免疫缺损小鼠的 DTH的作用 ddY小鼠每天注射0.25ml稀释的 ALS,连续3d,d4在脚垫处sc注射 ;.. '__ 291 i__. 吐吐扪扭 ___ 134 i__.i . ?m?? 中国医药工业杂志ChineseJ0urna1ofPharmaceutica[s199g,30(11.) 10SRBC致敏.p0不同剂量1,通过脚垫试 验测定1的作用. 结果见表4.与正常组相比,经ALS处 理组的DTH明显下降,而经1处理组能使 其恢复.高剂量(1rag/只)比100或10g/ 只更为有效. 裹41对小鼠经ALS处理后SRBC诱发的 DTH的影响?) *P<O05【检验j 2.81对接种膜水瘤细胞所致免疫缺损小 鼠的DTH的作用 ddY小鼠Ip接种2×10Ehrlich膜水瘤 细胞,4d后脚垫处注射108SRBC,同时给予 不同剂量1,5d后,其他脚垫注射SRBC致 敏.测量其肿胀程度. 如表5所示,与正常组相比,荷瘤小鼠的 DTH反应明显受损,低剂量(10,1ug/只)能 使其恢复至80%或58%;高剂量(100或 1000g/只)则不能 表51对荷腹水瘤小鼠SRBC诱发的 DTH的影响(士) …P<O01"检验j. 2.91对正常小鼠由唔唑酮诱发DCH的影 响 研究1在未处理组和免疫缺陷组小鼠中 对嘧唑酮诱发DCH的影响:pol(1.10,1O0. 1000vg/只),如表6所示,当于致敏后2d 再次涂抹嚼唑酮溶液后48h.可观察到最大 反应;致敏后4d再次涂抹嚼唑酮后24h,也 能出现最大反应 裹61对晤唑酮诱发的DCH的影响(土) 2.101对环磷酰胺所致免疫缺损小鼠曙唑 酮反应的作用 CDF1小鼠iv环磷酰胺6mg,每天po1 (10,1000g/只)共5d,d6涂抹晤唑酮,2d 后再涂一次曙唑酮. 结果发现,环磷酰胺处理组明显抑制孵 唑酮反应,而1能使其恢复.肿胀程度分别 为:非环磷酰胺治疗组0.65士0.08mm:环 磷酰胺治疗组0.18士0.04m;环磷酰胺+ 1t10g)组0.87士0.06mm;环磷酰胺+1 (1000vg)组0.88士0.06mm 2.111对接种腹水癌细胞所致免疫缺陷小 鼠嗯唑酮反应的作用 小鼠移植10Ehrlich腹水瘤细胞4d 中国医药工业杂志ChineseJouma【0Pharmaceuticals1999,30(11 后,在腹部涂抹孵唑酮溶液,并单剂量pol (0.1,10,i000g/只). 肿胀程度分别为:无瘤组为0.66?0.08 mm;荷瘤组(不用1)o.2o士o.12mm;用1 0.1tzg组为0.77=0.14mm;110g组为 0.71士0.01mm;1i000g组为0.72?0.16 mm.结果表明,荷瘤组DCH明显下降,而同 时给予1能使其恢复到无瘤组水平. 3讨论 致敏同时给予较大剂量范围内的1能促 进SRBC诱发DTH.合适剂量为1,i00g/ 只.>8或10周龄小鼠的试验,发现ip,iv,p0 1均有促进作用,而se则无.据报道,在嚼唑 酮诱发的DCH反应中,早期反应时有T细 胞/巨噬细胞介导,后期的反应主要为B细 胞介导.另外在研究1对嗯唑酮诱发DCH 反应的合适条件时发现,于嗯唑酮涂抹诱发 反应后48h测量肿胀程度,可得到最佳实验 结果.在环磷酰胺治疗组或接种Ehrlieh腹 水瘤组中,测定1对嚼唑酮诱发早期DCH 的影响时发现,致敏前给予1,能恢复注射环 磷酸胺所引起的无细胞免疫反应性,亦能使 荷瘤组中降低的DCH恢复到无瘤组水平, 这一结果表明,1能有效恢复嚼唑酮所致的 DCH降低. 1对SRBC和嗯唑酮诱发的DTH的影 响表明,1能促进细胞介导的免疫反应,并使 降低的细胞介导免疫反应功能恢复.1的这 种免疫反应作用机制已通过测定1对鼠淋巴 细胞的促细胞分裂作用得以阐明,将另文发 表本研究结果为临床进一步使用1提供了 依据 参考文献 1UmezawaHrIshizukaM,Aoyag[Tetd.JAnti biotics,1976;29}857 2沈炜明,杜敏琼,陈荣秀等.中国医药工业杂志,1995} 26(4)}15g 3沈炜明,强文安.杜敏琼等.中国医药工业杂志,1995: 26(6)255 4LeveyRH.MedwarPB.Pro:Nat【AcadSclUSA. 1996;56}1130 5LagrangePH,MackanessGB,MillerTE.jExp Med,1974}139l528 SDariesAjs,CaTterRL,LeucharsEa1.Immunolo gY,1969{l7l11 ENHANCEMENT0FUBENIMEX0NM0USE IMMUNESYSTEM LUYao—Hua,LINGLiu,ZHANGYi,ZHAIXiao13o.SHENWei—Ming (Dept.ofClinicalPharmacy,ShanghaiSixthPeople'Hospital,Shahghai20023? ABSTRACTEffectofubenimex(1)onthedelayed—typehypersensitivity(DTH)in— ducedbysheepredbloodcells(SRBC)andoxazolonewasobservedinnormalandimmunity impairedmice.Administrationofalowdoseof1(0.1,i00~g/mouse)enhancedDTH inducedbySRBCandrestoredDTHimpaired(oxazolone).Theeffectof1inthemousewas age—dependent.Inallcases,thehighestdoseof1(1mg/mouse)didnotenhanceDTH response.1alsorestoredDTHresponseimpairedbyinjectionofcyelophosphamideor inoculationwithEhrlichascitestumourintraperit0nea儿y.Theseresultsindicatethat1en— hancesthecell—mediatedimmuneresponseandrestoresthereducedcell—mediatedImmunere actions. KeyWordsubenimex,SRBc,DTH,oxazolone,cellmediatedimmuneresponse [1998年10月29日收稿一