头孢西丁与苯唑西林纸片法、MIC法检测耐甲氧西林葡萄球菌方法比较
头孢西丁与苯唑西林纸片法、MIC法检测耐
甲氧西林葡萄球菌方法比较 中华医院感染学杂志2006年第16卷第4期
?
论着?
头孢西丁与苯唑西林纸片法,MIC法检测
耐甲氧西林葡萄球菌方法比较
黄云平,黄妙儿,陈华,杨雪英,黄江兵,洪流
(广东医学院附属湛江中心人民医院,广东湛江524037) 摘要:目的通过头孢西丁(FOX)与苯唑西林(OXA)纸片法,肉汤稀释法(最低抑菌浓度法,MIC)检测耐甲氧西
林葡萄球菌(MRS)方法比较,对FOX纸片法的可靠性和临床实用性进行评估.方法用FOX与OXA纸片扩
散法,MIC法检测临床送检标本中分离的葡萄球菌属共83株.结果3种方法检测27株金黄色葡萄球菌的
MRS结果均为18株,符合率为100;检测凝固酶阴性葡萄球菌MRSMIC法的结果特异性为58.3,OXA纸
片法特异性为66.7.结论3种方法检测金黄色葡萄球菌的MRS结果相符合;检测凝固酶阴性葡萄球菌
MRS的结果MIC法和OXA纸片法特异性均低,建议用FOX纸片法代替或更正对MRS的检测结果
关键词:葡萄球菌属;耐甲氧西林;药敏试验
中图分类号:R378.1文献标识码:A文章编号:1005—4529(2006)04—0473—03 FoXDiskDiffusionMethodinComparisontOoXADiskDiffusionMethodand
MinimaiInhibitoryConcentrationforDetectionOf
Meticiilin—resistantStaphylococcus HUANGYun-ping.HUANGMiao—er.CHENHua,YANGXue—ying,HUANGJiang—
bing,HONGLiu
(ZhanjiangCentralPeoplesHospitalAffiliatedtoGuangdongMedicalCollege,Zhanjiang, Guangdong24037,China)
Abstract:OBJECTIVEToevaluatethereliabilityandclinicalpracticabilityoftheFOXdiskdiffusionmethod,its
comparisontOOXAdiskdiffusionmethodandminimalinhibitoryconcentration(MIC)fordetectionofmeticillin,
resistantS
,n^vZ0c0cc"s(MRS).METHODSUsingFOXdiskdiffusionmethod,0XAdiskdiffusionmethodand
MICmethodtOdetect83S
,n^Z0c0cc"sstrainsisolatedfromclinicalsamplesofZhanjiangCentralPeopleS Hospita1.RESULTSThreemethodswereusedtOdetect27S.aureusstrains,fromthem18strainswereMRSby
resultofeachmethodused,therateofcoincidencewas100.WhentOdetectcoagulase-negativeSfn^Z0c0cc"s
(CNS)forMRS,thespecificityofOXAdiskdiffusionmethodwas66.7andMICmethodwas58.3.
CONCLUSIONSTheresultofthreemethodstOdetectS.aureusforMRSiscoincidenta1.TodetectCNSforMRS,
thespecificityofOXAdiskdiffusionmethodandMICmethodislow.WesuggestFOXdiskdiffusionmethoduse
totakeplaceoforrenewtheresultofMRS.
Keywords:Staphylococcus;Meticillinresistance;Antimicrobialsusceptibilitytest 当前,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与
耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)已成为
医院感染的重要病原菌之一,对临床分离葡萄球菌
属进行MRS检测具有非常重要的临床意义.目前
临床实验室对MRS的常用检测方法有OXA纸片
法,MIC法,根据2004年美国临床实验室标准化委 员会(NCCLS)推荐,使用含3Og头孢西丁FOX纸 片进行纸片扩散试验,所得结果和替代临界值能用 收稿日期:2005—08—25;修回日期:2005—11-10 于葡萄球菌属中预示mecA介导的耐药性口],国内 有关这方面相关文献报道罕见,为进一步了解FOX 纸片法检测葡萄球菌MRS的优缺点,我们以金黄 色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌为研究对象,用 FOX与OXA纸片法,MIC法检测MRS方法进行 比较.
1资料与方法
1.1菌株来源2005年1,6月我院各类送检标 本中分离的菌株,凝固酶阴性葡萄球菌56株,金黄
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色葡萄球菌27株.
1.2试验仪器法国生物梅里埃公司ATBEx— pression分析系统.法国生物梅里埃公司葡萄球菌 鉴定ID32STAPH,药敏STAPH板条;MH琼脂. 苯唑西林(OXA,1/xg)纸片和头孢西丁(FOX,30/xg)
纸片均为英国Oxoid公司产品.质控菌株:金黄色 葡萄球菌(ATCC25923),凝固酶阴性葡萄球菌 (ATCC4330).
1.3检测方法(1)菌悬液制备:采用挑取分纯后 的单个菌落,以生理盐水校正至0.5麦氏比浊标准 MIC法待检菌用STAPH药敏板条进行检测, ATBExpression分析系统直接判断出MRS,判断标 准为MIC?4~g/ml判定为MRSA,MIC ?O.5~g/ml判定为MRCNS.(2)琼脂扩散法:采用
K—B纸片扩散法,进行OXA和FOX敏感性试验. 判断标准:按1999年NCCLS标准判读OXA的结 果_2]:金黄色葡萄球菌:抑菌圈?10mm为MRSA, 11,12mm为中介,?13mm为甲氧西林敏感性金 黄色葡萄球菌(MSSA);凝固酶阴性葡萄球菌:抑菌 圈?17mm为MRCNS,?18mm为甲氧西林敏感凝 固酶阴性葡萄球菌(MSCNS).按2004年NCCLS 标准判读FOX的结果_1]:金黄色葡萄球菌:抑菌圈 ?19mm为MRSA,?20mm为MSSA~凝固酶阴性 葡萄球菌:抑菌圈?24mm为MRCNS,?25mm为 MSCNS.
1.4统计学方法,特异性检验.
2结果
2.13种方法比较OXA,FOX纸片法与MIC法 比较,检测金黄色葡萄球菌,凝固酶阴性葡萄球菌 MRS的结果差异均无统计学意义.检测凝固酶阴 性葡萄球菌MRS特异性比较,OXA纸片法的 特异性为66.7%,MIC法的特异性为58.3.见 表1.
表13种方法检测葡萄球菌MRS比较
注:FOX纸片与OXA纸片法,MIC法,阳性率比较P>O.057.
2.23种方法不符合的葡萄球菌检测结果比较 OXA纸片法,MIC法与FOX纸片法不符合的葡萄 球菌属检测结果进行比较,OXA纸片法和MIC法 不符合主要由表皮葡萄球菌MRS假阳性引起,分 别占66.79,6,83.3%.
3讨论
从表1可以得出对于金黄色葡萄球菌的MRS 检测3种方法的结果一致,与文献报道l3]对于
MRSA的检测3种方法相一致.值得注意:当我们 用纸片法检测金黄色葡萄球菌其抑菌圈范围达到敏 感时,如发现两株其抑菌圈内有1个或多个菌落生 长,和MIC法检测金黄色葡萄球菌其MIC值<2g 时,其肉汤培养基内有?1个菌落生长,为避免漏 检,对其再次分纯接种,检测结果均为MRSA,两株 均取自社区慢性骨髓炎患者,而医院内流行感染菌 株则未见此现象.此外,OXA纸片存在抑菌圈范围 处于中介而导致无法判断结果.
对于凝固酶阴性葡萄球菌MRS检测,FOX纸 片法与其他两种方法检测凝固酶阴性葡萄球菌 MRS在阳性率方面差异无统计学意义.但与FOX 纸片法比较MIC法和OXA纸片法的检测结果特 异性均低,前者为58.39,6,后者为66.79,6,接近文 献l_3]报道MIC法619,5和纸片法679,5.特异性较低 主要是由表皮葡萄球菌的假阳性MRS所引起,而 且有部分凝固酶阴性葡萄球菌会出现假阴性,同时, 我们发现,在OXA的MIC产生假MRS的表皮葡 萄球菌中,OxA的MIC判点可在0.5,1.0, 2.0ug/ml,而FOX纸片测定其抑菌环均?25mm 属MSSCN.此结果提示对表皮葡萄球菌进行检测 mecA基因或PBP2a来判断报告苯唑西林耐药更为 准确,此结论与2005年NCCLS建议相符合[4].因 此我们建议采用2004年NCCLS推荐的FOX纸片 法更正目前常用仪器MIC法结果和代替OXA纸 片法来检测凝固酶阴性葡萄球菌MRS,可提高实验 室检测结果的可靠性.其原因是FOX的存在促使 mecA基因高表达,与金标准mecA比较,其敏感水 平达989,6,特异性达96],结果更准确可靠,且方
法简便,是临床实验室值得推广的方法. 另外2005年NCCLS建议,可用检测mecA基 因或PBP2a来确定和校正纸片法测定凝固酶阴性 葡萄球菌对苯唑西林的耐药性.考虑到实验条件结 合本实验结果,笔者认为是对于表皮葡萄球菌更需 用FOX纸片或简便PBP2a测试来确证_5].同时应 密切关注每年NCCLS规则的变化,及时更新临床 实验室的检测方法和标准,以提高试验结果的准确 性,更好的指导临床诊断和治疗.
(转第420页)
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通过常规戴手套并注射HBV疫苗等措施,HBV感 染概率明显减少一一.
3.2.2戴口罩,护目镜高速涡轮手机,超声波洁 牙机头等的高速转动,产生大量飞沫,气溶胶,集中 在口周60.96,91.44cm_8],正是口腔医护人员所处 的位置.戴口罩和护目镜可有效地隔离气溶胶的附 着,减少病原微生物的扩散和传播.
3.3环境干预
3.3.1空气,物表消毒保持诊室内空气新鲜,随 时开窗通风换气.诊室定时用紫外线消毒或用 0.2过氧乙酸喷洒,擦试.患者就诊前用含漱液漱 口,以减少口腔内微生物的含量.每位患者诊治后, 用0.5过氧乙酸对使用过的痰盂进行消毒.在调 汞或充填银汞合金材料时,一定要小心谨慎,使用密 封自动银汞调和器,及时处理残留汞,以防止蒸发而 污染空气.
3.3.2器械消毒管理手机是直接进入口腔的医
疗器械,消毒不严时,残留的血液和唾液可直接造成 各种病原菌的传播.严格执行一人一机一用一灭菌 制度.口腔科的器械种类繁多且精巧,多接触患者 的血液和唾液,一定要严格灭菌,保证一人一用一消 毒,使用一次性口腔治疗盘,防止多位患者互用或共 用,阻断通过血液,唾液的扩散所造成疾病的传播, 一
次性医疗废物严格按操作
执行,分类收集,统 一
处理.
3.3.3改善供水系统,减少水路污染CDC建议: 在治疗每一位患者之间至少冲洗水路20,30s,每 日工作结束后进行快速冲洗,以减少治疗台内部水 流管道中病原微生物的存留.利用治疗椅的强力抽 吸系统,随时抽走口腔中的固,液,气混合物,以减少 操作过程形成的微粒对空气的污染.
(接第474页)
参考文献:
口腔职业暴露越来越受到人们的关注,预防是 减少感染发生的关键,口腔医务人员正确的评估职 业暴露的风险,并积极采取有针对性的干预策略,才 可确保其职业健康安全.
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