总大肠菌群检查SOP

总大肠菌群检查SOP WA1302?008-00 第 1页 共 3页 审 核: 日期: 起 草: 日期: 批 准: 日期: 生效日期: 签字: 拷贝号: 制定(变更)原因及目的: 变更记载: 公司更名。 修订号 批准日期 生效日期 00 2001年5月4日 2001年5月11日 01 02 生产技术部 [ ]份 质量部QA [ ]份 质量部QC [ ]份 一 车 间 [ ]份 二 车 间 [ ]份 三 车 间 [ ]份 分发部门 设备动力科 [ ]份 物 控 部 [ ]份 总 经 办 [ ]份 综 合 部 [ ]份 总大肠菌群检查SOP 1 适用范围 本适用于工艺用水中总大肠菌群的检查。 2 职责 检验员:严格按SOP进行检验。 3 内容 3.1 所用的仪器和设备:显微镜、革兰氏染色器材、恒温培养箱冰箱、放大镜、一般实验仪器 3.2 乳糖蛋白胨培养液 3.2.1 成分 , 蛋白胨 10g , 牛肉膏 3g , 乳糖 5g , 氯化钠 5g , 溴甲酚紫乙醇液 1ml , HO 1000ml 2 3.2.2 制法 WA1302?008-00 第 2页 共 3页 将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠置于HO中加热溶解，调整pH为7.2-7.4，再加入溴甲2 酚紫乙醇液，充分混匀，分装于有杜氏管的试管中，置高压蒸气灭菌器中，以115?灭菌 20min。 3.2.3 三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液 按上述比例浓缩三倍配制。 3.2.4 伊红美兰培养基 3.3 操作步骤 3.3.1 初发酵试验 在2个各装有已灭菌50ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的大试管或烧瓶中内，以无菌操作各 加入水样100ml;在10支装有已灭菌5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的试管中，以无菌操 作各加入水样10ml，混匀后置恒温培养箱内36?1?培养24h。 3.3.2 平板分离 经培养24h后，将产酸产气及只产酸的发酵管，分别接种于伊红美兰培养基上，再置于36 ?1?恒温培养箱内培养18-24h，挑取符合下列特征的菌落，取菌落的一小部分进行涂片、 革兰氏染色、镜检。 深紫黑色，具有金属光泽的菌落。 紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落。 淡紫红色，中心色较深的菌落。 3.3.3 复发酵试验 -b上述涂片镜检的菌落如为G无芽胞杆菌，则挑取该菌落的另一部分接种于普通浓度的乳 糖蛋白胨培养液中，有产酸产气者，即证实有总大肠菌群存在。 3.4 判定 根据证实有总大肠菌群存在的阳性管(瓶)数，查下，每升水样中的大肠菌群数。水 中大肠菌群数,3个/L。 WA1302?008-00 第 3页 共 3页 大肠菌群数表 100ml水量的阳性瓶数 10ml水量的阳性0 1 2 管数 每升水样中大肠菌群数 每升水样中大肠菌群数 每升水样中大肠菌群数 0 ,3 4 11 1 3 8 18 2 7 13 27 3 11 18 38 4 14 24 52 5 18 30 70 6 22 36 92 7 27 43 120 8 31 51 161 9 36 60 230 10 40 69 ,230 4 编制依据 《饮用水质量标准》 WA1106?001 《纯化水质量标准》 WA1106?002