马拉色菌在新生儿皮肤定植的研究

马拉色菌在新生儿皮肤定植的研究 马拉色菌在新生儿皮肤定植的研究 中华皮肤科杂志2006年7月第39卷第7期ChinJDermatol,July2006,Vol39,.! 马拉色菌在新生儿皮肤定植的研究 陈征冉玉平熊琳代亚林周光平 【摘要】目的探讨马拉色菌在新生儿皮肤的定植及影响因素.方法采用含菜籽油培养基32? 培养.对拟自然分娩的母亲临产时取阴道分泌物接种于试管斜面,用无菌微孔透气胶带粘取新生儿(8处 皮肤.从出生当时到出院),母亲(胸部和手掌,分娩后第2天)及其护士(手掌,新生儿出生后第2天)皮肤 标本.接种于平板.根据菌落形态及生理生化方法鉴定菌种.结果?52份母亲阴道分泌物培养阴性.?15 名护士共104份手掌部皮肤标本培养阴性.?104例新生儿(自然分娩和剖宫产各52例)出生当时的皮 肤标本培养阴性.但出生后第1天有28例(26.92%)培养出马拉色菌,到第8天上升到59例(56.73%),其 中糠秕马拉色菌41例(69.49%).?从104例母亲皮肤上培养出马拉色菌65例(62.50%),其中糠秕马拉 色菌49例(75.38%).?母亲和新生儿124株马拉色菌中菌种相同者92例,一致率为74.19%.?新生儿前 额和面颊马拉色菌培养阳性率最高.结论马拉色菌在新生儿皮肤定植最早发生在出生后的第1天内, 主要部位为额面部.主要菌种为糠秕马拉色菌,存在于母亲皮肤的马拉色菌可能是定植菌种的主要来源. 【关键词】马拉色霉菌属;婴儿,新生;皮肤;定植 Aprospectivestudyonskincolonizationby朋inneonatesa挹Zheng,RA?Yu-ping', ? oNGLil1.DAIYa-lin,zHoUGuang-ping."DepartmentofDermatovenereology,WestChinaHospital, SichuanUniversity,Chengdu6jOO41.China 【Abstract】 ObjectiveToinvestigatetheskincolonizationbyMalasseziainneonatesanditsinflu- entialfactors.MethodsVaginalsamplesweretakenfromthemothersiustbeforenaturallaborandinocu- latedonslantculturemedium.Skinsampleswereobtainedfromneonates(8skinsitesperneonate,from thetimeofbirthtodischargefromthehospita1),theirmothers(chestandpalm,onthe2nddayafterdelivery) andtheirnurses(palm,onthe2nddayaftertheneonatesbirth)bysterileadhesivetape,andinoculatedon Petridish.AUsampleswereculturedinthemediumcontainingrapeseedoilat32?.Tbeisolat eswereiden- tiffedtospeciesbasedontheirmicroscopicandphysiologicfeatures.ResultsNeitherthe52vaginalsam- piesfrom104mothersnorthepalmsamplesfrom15nurseswerepositivefortheisolation.Noneoftheskin samplesfroml04neonatesatthetimeofbirthwerepositivefortheisolation,regardlessthedeliverymode (naturallabororCaesareansection).SkincolonizationbyMalasseziaoccurredin28ofl04neonates (26.92%)onthefirstdayafterbirth,andin59neonates(56.73%)onthe8thday,wim41strains (69.49%)ofAt.an'furisolated.Sixty-fiveof104mothers(62.50%)werepositivefortheMalasseziacul— turewim49strains(75.38%)ofMan'furisolated.Among124isolatesofMalasseziafromneonatesand meirmothers,92(74.19%)sharedthesamespeciesofM矗 lmlfThehighestisolationrateofMfurfur wasobservedontheforehead(100.o0%)andface(94.92%)ofneonams.ConclusionsTheear liestskin colonizationbyMalasseziainneonatesbeganonthefirstdayafterbirth.withthepreponderant speciesofM furfurandthemostcommonsitesofforeheadandfaceforthecolonization.TheMalasseziacol onizingthe neonatalskinprobablyoriginatesfromthematernalskin.wherethefungushasakeadyexisted . 【Keywords】Malassezia;Infant,newborn;Skin;Colonization 马拉色菌是花斑癣,马拉色菌毛囊炎的致病菌, 还与脂溢性皮炎,间擦疹,特应性皮炎,头皮屑,银屑 病,新生儿脓疱病和系统感染有关【l-5],但马拉色菌 何时在新生儿皮肤表面定植,定植率及部位,菌种构 成及来源,影响因素等诸多问尚不清楚.本文对涉 基金项目:四川省学术和技术带头人培养基金(4989904) 作者单位:610041成都,四川大学华西医院皮肤性病科[陈征 (现在重庆三峡中心医院皮肤科,404000),冉玉平,熊琳,代亚林,周 光平] 通讯作者:冉玉平,email:ranyuping@hotmail.coin 371 ? 论着? 及新生儿出生过程和出生后各个环节做连续动态追 踪,确定马拉色菌在新生儿皮肤定植的时间和部位, 通过比较新生儿和母亲皮肤马拉色菌带菌率和菌种 构成分析菌种来源.探讨影响马拉色菌在新生儿皮 肤表面定植的因素. 对象与方法 一 ,对象 在重庆三峡中心医院产科出生的新生儿及其母 372中华皮肤科杂志2006年7月第39卷第7期 ChinJDermatol,July2006,Vol39,No.7 亲,以及护理每个新生儿的护士. 二,标本来源及培养[] 1.阴道取材:对已决定自然分娩的母亲在分娩 前取阴道分泌物接种于含菜籽油斜面培养基. 2.皮肤取材:用无菌微孔透气胶带(3M中国有 限公司)粘贴于皮肤12min后.用无菌平镊取下 胶带.贴于含菜籽油平板培养基.新生儿皮肤标本取 自经产道自然分娩和经剖宫产手术出生的新生儿出 生时,出生后第1天,第2天至出院当日前额,面颊, 胸部,脐周,上臂,下肢,腹股沟和背部皮肤.新生儿 出生第2天.取母亲的胸部和手掌部皮肤,护理该新 生儿的护士手掌部皮肤标本.护理新生儿的每个护 士在护理前用消毒液浸泡双手.护理完每个新生儿 后均用消毒毛巾搽手,护理完所有新生儿后再次用 消毒液浸泡双手. 所有标本置32?培养箱中培养7—14d,每天 观察菌落生长情况.待菌落生长后挑取小部分涂片, 用50%派克墨水染色后镜下观察.确定为马拉色菌 后转种于菜籽油培养基的试管斜面保种. 三,菌种鉴定 鉴定前48—72h活化菌种.采用Guillot等建 立的方法(沙氏培养基实验,过氧化氢酶实验,七叶 苷分解实验,吐温及PEG一35蓖麻油实验和形态学 观察等)鉴定到种[,以Gueho教授惠赠的7个标准 株作为阳性对照. 四,统计分析 用SPSS10.0统计软件进行检验,MonteCarlo 确切概率法和一致性检验,检验水准,仅=0.05. 结果 一 ,基本情况 2003年6月至2004年3月共收集到104例出 生后住院38d新生儿及其母亲皮肤标本,新生儿 中男56例.女48例.经产道自然分娩和剖宫产的新 生儿各52例.产妇年龄21—43岁.平均26.93岁. 妊娠时间3342周,平均39周. 二,培养阳性率 1.母亲阴道分泌物:52例自然分娩新生儿的母 亲阴道分泌物均未培养出马拉色菌. 2.新生儿皮肤:104例新生儿到出生后第8天 累计有59例(56.73%)皮肤上培养出马拉色菌.按 新生儿性别,出生时体质量,母亲职业,妊娠年龄及 妊娠时间,分娩季节,生产方式,出生后住院日数等 因素分组.各组新生儿皮肤马拉色菌培养阳性率差 异均无统计学意义. 3.母亲皮肤:104例母亲中有65例(62.50%)皮 肤上培养出马拉色菌,其中胸部和手掌部同时阳性 者35例(33.65%),单独胸部阳性者26例(25.0o%), 单独手掌部阳性者4例(3.85%). 4.护士皮肤:共15名护士护理此104例新生 儿.从护理完每名新生儿后收集的护士手掌部104 份标本全部培养阴性. 三,马拉色菌在新生儿皮肤的定植时间和部位 1.定植时间:104例新生儿出生时(第0天)其 皮肤上未培养出马拉色菌:出生后第1天有28例 新生儿皮肤上培养出马拉色菌.阳性率为26.92%: 以后累计阳性率逐日增加,从第2天到第8天累计 阳性数(累计阳性率)分别为42例(40.38%),51例 (49.04%),53例(50.96%),58例(55.77%),58例 (55.77%),59例(56.73%),59例(56.73%).即马拉 色菌在新生儿皮肤的最早定植时间是出生后的第 1天内. 2.定植部位:59例培养阳性新生儿中前额阳性 59例.阳性率100%;面颊阳性56例,阳性率94.92%; 胸部阳性23例,阳性率38.98%;腹股沟阳性21例, 阳性率35.59%;下肢阳性10例,阳性率16.95%;脐 周,上臂,背部阳性各7例,阳性率11.86%.各部位阳 性率差异有统计学意义Og=234.08,P<0.0001). 额面部培养阳性率明显高于其他部位,是马拉色菌 在新生儿皮肤的主要定植部位. 四,新生儿和母亲皮肤分离的马拉色菌菌种构成 59例新生儿皮肤上培养出的马拉色菌中.鉴定 出3个种.其中糠秕马拉色菌41例占69.49%.65 例母亲皮肤上培养出的马拉色菌,也鉴定出3个种, 其中糠秕马拉色菌49例占75.38%.糠秕马拉色菌 占所有马拉色菌的72.58%.新生儿和母亲皮肤马拉 色菌的菌种构成差异无统计学意义,=0.55,P> 0.05(表1).按新生儿性别,出生时体质量,母亲职 业,妊娠年龄及妊娠时间,分娩季节,生产方式,出生 后住院日数等因素分组,各组新生儿皮肤马拉色菌 的菌种构成差异均无统计学意义. 五,新生儿和母亲皮肤马拉色菌菌种一致性分析 见表2.59例培养阳性的新生儿中有46例与其 表1新生儿和母亲皮肤马拉色菌的菌种构成[例(%)] 中华皮肤科杂志2006年7月第39卷第7期ChinJD 表2新生儿和母亲皮肤马拉色菌菌种一致性分析(例) 母亲的菌种一致,一致率为77.97%;65例培养阳性 的母亲中有46例与新生儿的菌种一致,一致率为 70.77%.运用一致性检验,Kappa=0.638,母亲和新 生儿皮肤上的马拉色菌菌种存在一致性. 讨论 人体皮肤暴露在外界环境中不可避免地会被多 种常驻微生物菌群定植,但马拉色菌何时开始在新 生儿皮肤表面定植尚不清楚.本研究发现,经产道自 然分娩或剖宫产的新生儿在出生当时皮肤表面均未 分离出马拉色菌,自然分娩者母亲的产道分泌物也 未分离出马拉色菌,排除了新生儿在子宫内和经产 道分娩时菌群定植的可能性,证实马拉色菌是在新 生儿出生后定植于皮肤表面的.出生后第1天的定 植率为26.92%,到第8天上升到56.73%. 新生儿出生后最先接触者为母亲和护理人员, 母亲皮肤若带菌则可通过哺乳和护理等皮肤密切接 触使马拉色菌定植于新生儿皮肤.我们从母亲胸部 和(或)手掌皮肤均分离出马拉色菌,阳性率为 62.50%,其优势菌种为糠秕马拉色菌(75.38%),而 新生儿皮肤的优势菌种也为糠秕马拉色菌(69.49%), 母子菌种构成存在一致性,提示定植于新生儿皮肤 表面的马拉色菌主要来自其母亲.Bemier等[s]报道, 新生儿皮肤上最初出现的是合轴马拉色菌和球形马 拉色菌,从他们母亲颈部皮肤上也主要培养出合轴 马拉色菌和球形马拉色菌.Shattuck等[]报道新生儿 373 皮肤上70.O%为糠秕马拉色菌.菌种构成的差异可 能与地域和人种有关.本研究涉及的15名护士在接 触新生儿前均按护理常规洗了手,这可能是未能从 护士手掌部皮肤分离出马拉色菌的原因,也提示护 士洗手对防止医源性感染的重要性. 马拉色菌为嗜脂性酵母菌,对培养阳性的新生 (100.o0%)和 儿不同部位取材培养结果表明,前额 面部(94.92%)马拉色菌定植率最高,与新生儿期该 部位皮脂分泌旺盛相对应,提示马拉色菌在新生儿 皮肤定植部位与局部的皮脂分泌状态有关,但不排 除与母亲接触多的因素.而新生儿的性别,体质量, 母亲的职业,妊娠年龄及孕周,生产方式,分娩季节 及出生后住院时间均不影响新生儿皮肤马拉色菌的 定植时间,定植率和菌种构成. 参考文献 lRapelanoroR.MortureuxP.CouprieB,eta1.NeonatalMalasseMa furfurpustulosis.ArchDermatol,l996,l32:l90-l93. 2FaggiE,P.niG,CampisiE,eta1.Anti-Malasseziafurfurantibodies inthepopulation.Mycoses,l998,4:273—275. 3OberleAD.FowlerM.CaaftonWD.Pityrosporumisolatefromthe upperrespiratorytract.AmJClinPathol,l98l,76:ll2-ll6. 4ChangHJ,Miller札,WatI【insN,eta1.AnepidemicofMMassezia pachyderma廊inanintensivecarenurseryassociatedwithCO10一 nizationofhealthcareworkers'petdogs.NEnglJMed,1998,338: 706—7l1. 5ChryssanthouE,BrobergerU,PetriniB.Malasseziapachydermatis fungaemiainaneonatalintensivecareunit.ActaPaediatr.2001. 90:323.327. 6冉玉平.检测糠秕马拉色菌的几种取材染色和培养方法介绍.中 国皮肤性病杂志,1999,l3:l8l—l82. 7熊琳,冉玉平,周光平,等.马拉色菌的分类及其在几种皮肤病的 分布情况.中华皮肤科杂志,2000,33:3l8-320. 8BemierV,We.1lFX,HirigoyenV,eta1.Skincolonizationby Malasseziaspeciesinneonates:aprospectivestudyandrelationshiP withneonamlcephalicpustulosis.ArchDermatol,2002,l38: 2l5.2l8. 9ShattuckKE,CochranCl('ZabranskyRJ.eta1.Colonizationand infectionassociatedwithMalasseziaandCandidaspeciesina neonatalunit.JHospInfcct,l996,34:l23.129. (收稿日期:2005—07—05) 第六届"儿童皮肤病学I临床与进展"学习班通知 经卫生部批准,上海交通大学医学院附属新华医院皮肤科国家级继续教育基地于 2006年9月22—27日举办第六届"儿 童皮肤病学临床与进展"学习班(项目编号20060412061),主要讲授罕见及疑难儿 童皮肤病,儿童皮肤病诊断与治疗的最新进 展,为期1周,授予国家级继续医学教育I类学分10分.现将有关事项通知如下. 学习时间:2006年9月22—27日;地点:浙江宁波象山;参加对象:皮肤科医师及相 关医务人员;学费(含教材费600元); 统一安排食宿,费用自理. 回执请寄:上海市控江路1665号,上海交通大学医学院附属新华医院皮肤科陶建 凤,庄寅医师收,邮编:200092.联系电话: (021)65790000—6750. 学员名额有限,按收到回执的先后顺序向您寄发正式学习班通知.