调经祛斑胶囊质量标准改进

调经祛斑胶囊质量改进 154 广东药学院学报 JournalofGuangdongPharnm~euticalCollege 调经祛斑胶囊质量标准改进 谢志宏,何燕,倪庆纯,徐孟文,聂金媛,罗建春 (1.广卅I市医药工业研究所制剂室,广东广州510240;2.广州中医药大学中药学院, 广东广州510006) 摘要:目的改进调经祛斑胶囊的质量标准.方法采用显微镜法对处方中红花,手参, 白芍进行显微 鉴别;用薄层色谱法对女贞子,当归,枸杞子,黄芪进行鉴别;用高效液相色谱法测定 制剂中芍药苷 的含量.结果显微鉴别,薄层色谱鉴别专属性强;建立的测定芍药苷含量的HPLC法 符合研究要求. 结论该方法简便,准确,重现性好,可作为控制调经祛斑胶囊质量标准的方法. 关键词:调经祛斑胶囊;手参;当归;枸杞子;黄芪;质量标准 中图分类号:R284文献标识码:A文章编号:1006—8783(2009)02—0154—03 ImprovementofthequalitystandardforTiaojingqubancapsules XIEZhi-hong,HEYan,,NIQing.chun,XUMeng.wen.,NIEJin—yuan,LUOJian—chun (1.GnangzhouPharmaceuticalIndustryResearchInstitute,Gnangzhou,Guangdong510240,China;2. GuangzhouUnivenityofChineseMedicine,Guangzhou,Guangdong510006,China) Abstract:ObjecfiveToImprovethequalitystandardofTiaojingqubancapsules.MethodsSafflower, ConicgymnadeniaRhi~me,RadixPaconiacAlbaintheprescriptionwereidentifiedundermicroscope. LigustrumlucidumAit,ChineseAngelica,barbarywolfberryfruit,RadixAstragaliwereide ntifiedby TLC.ThecontentofpaeoniflorinwasdeterminedbyHPLC.ResultsThecharacteristicidenti fiedby TLCandmicroscopywasdistinctandhighlyspecific.ConclusionThemethodisconvenient, accurate andreproducible.Itcanbeusedeffectivelyforthequalitycontrolofthecapsules. Keywords:Tiaojingqubancapsules;ConicgymnadeniaRhizome;ChineseAngelica;barba rywolfberry fruit;RadixAstragali;qualitystandard 调经祛斑胶囊由白芍等15味药材组成,用于治 疗气血不足,气滞血瘀等证.研究发现原调经祛斑 胶囊质量标准H中,当归显微鉴别特征不明显,当 归和枸杞子TLC鉴别专属性和重现性较差,白芍含 量限度低,且无主药黄芪的鉴别.根据组成药味的 特点,本文采用显微鉴别对方中白芍,当归,手参及 薄层色谱法对处方中女贞子,当归,枸杞子,黄芪进 行定性鉴别,结果分离度好,专属性强;采用高效液 相色谱法对白芍中芍药苷进行含量测定,测定结果 可靠,准确,专属性强,可有效控制本品质量. 1仪器与材料 DIONEXP680高效液相色谱仪,HU一10260B超 声清洗仪(戴安公司);调经祛斑胶囊,黄芪对照药 收稿Et期:2009—02—23;修回日期:2009—04—09 作者简介:谢志宏(1969一),男,工程师,主要从事药物分析 工作,Email:80967596@163.com. 材(广州白云山_中药厂提供);阿魏酸(110773— 991),齐墩果酸(110709-200403),芍药苷(110736— 200422)等对照品及枸杞子(121072.200404)对照 药材均购自中国药品生物制品检定所;乙腈为色谱 纯;乙醇等为分析纯. 2方法与结果 2.1定性鉴别 2.1.1白芍,红花l?,手参显微鉴别取本品,置 显微镜下观察:花粉粒类圆形,椭圆形或橄榄形,直 径约60Ixm,具3个萌发孔,外壁有齿状突起(红 花);草酸钙针晶束存在于黏液细胞中或散在,针晶 长20,90m(手参);草酸钙簇晶直径11,35ixm, 存在于薄壁细胞中,常排列成行,或一个细胞中含数 个簇晶(白芍).结果见图1. 2.1.2当归TLC鉴别取本品20粒,研 细,加甲醇30mL,加热回流30min,放冷,滤过, 第2期谢志宏,等.调经祛斑胶囊质量标准改进155 ?一 I萱一一,一A.白芍;B.红花;C.手参图1调经祛斑胶囊显微鉴别图 Figure1Microsocopicalidenti6cati0nofTiao.jingqubancapsule 滤器用5mL甲醇洗涤1次,合并滤液与洗液,蒸干, 残渣加水50mL,加热使溶解,放冷,移至分液漏斗 中,用乙醚振摇提取3次(20mL,20mL,15mE),合 并乙醚液,用质量分数5%碳酸氢钠溶液振摇提取3 次,每次15mL,弃去乙醚液,碱液用醋酸乙酯15mL 洗涤,弃去醋酸乙酯液,碱液用盐酸调节pH值至2 , 3,用甲苯15mL洗涤,弃去甲苯液,继用乙醚提取 3次,每次15mL,挥去乙醚,残渣加甲醇0.5mL使 溶解,作为供试品溶液.另取阿魏酸对照品,加甲醇 制成每1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液.吸 取上述2种溶液各5L,分别点于以羧甲基纤维素 钠为黏合剂的同一硅胶G薄层板上,以甲苯.冰醋 酸.甲醇(体积比30:1:3)为展开剂,展开,取出,晾 干,置紫外光灯(365nm)下检视.供试品色谱中, 在与对照品色谱相应的位置上,显相同的荧光斑点; 阴性样品无干扰,见图2(A). 2.1.3枸杞子TLC鉴别取除枸杞子以外的 其他14味药材按处方比例制得的阴性样品,按 "2.1.2"项下"供试品溶液的制备"方法制备阴性样 品溶液.取枸杞子对照药材1g,同法制成对照溶 液.吸取"2.1.2"项下供试品溶液与对照药材溶 液,阴性样品溶液各2IxL,分别点于以羧甲基纤维 素钠为黏合剂的同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙 醚.冰醋酸(体积比10:10:0.1)为展开剂,取出,晾 干,置紫外光灯(365nm)下检视.供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的荧光斑 点;阴性样品无干扰.见图2(B). 2.1.4女贞子TLC鉴别按原标准?进行鉴别, 色谱图见图2(C). 2.1.5黄芪TLC鉴别取本品3O粒,加水30mL, 煮沸0.5h,加人5倍量乙醇过滤,滤液挥干,加水 30mL微热使溶,冷却后移人分液漏斗中,用水饱和 正丁醇萃取3次,每次20mL,正丁醇液合并,蒸干, 用体积分数70%乙醇2mL溶解,作为供试品溶液. 取黄芪对照药材3g,同法制备成对照药材溶液.取 除黄芪以外的其他14味药材按处方比例制得的阴 性样品,同法制备成阴性样品溶液.吸取上述溶液 各5,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯一乙 酸乙酯(体积比7:3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷 以碳酸钠试液,置紫外光灯(365nm)下检视.供试 品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜 色的斑点;阴性样品无干扰,见图2(D). A(当归):1.样品a;2.阿魏酸对照品;3.样品a;4.阴性B(枸杞子):1.阴性;2.枸杞子对照 药材;3.样品a;4.样品b c(女贞子):1.阴性;2.样品a;3.女贞子对照药材4:样品bD(黄芪):1.阴性;2.样品a;3. 样品b;4.黄芪对照药材 图2调经祛斑胶囊TLC鉴别图 Figure2TLCChromatogramsofTiaojingqubancapsule 2.2含量测定 选择本品中白芍主要有效成分芍药苷为含量测 定指标I4. 2.2.1色谱条件色谱柱:DiamonsilC.8(ID4.6 mill×150mm,5Ixm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液 (体积比14:86);流速:1.0mL?min,;检测波长: 230nm;柱温:室温;进样量:10txL. 2.2.2测定方法取本品胶囊20粒,精密称定,研 细,混匀,取0.9g精密称定,置50mL量瓶中,加稀 乙醇35mL,超声(功率:240W,频率45kHz)30 156广东药学院学报第25卷 min,放冷,加稀乙醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作 为供试品溶液.精密称取芍药苷对照品适量,加稀 乙醇制成6Og?mL的溶液,得对照品溶液. 2.2.3线性关系考察精密称取干燥至恒重的芍 药苷对照品6.25mg置25mL量瓶中,加稀乙醇溶 解并稀释至刻度,分别吸取1,2,4,6,8mL置10mL 量瓶中,加稀乙醇至刻度,进样1O,色谱图. 以芍药苷浓度为横坐标,峰面积为纵坐标作图.得 回归方程式为Y=0.1956X一0.4767(r:0.9998, =5),芍药苷进样量在0.25,2.0g之间线性关系 良好. 2.2.4专属性按处方比例取除白芍外其他药材, 按制法制得空白制剂,按供试品溶液制法制成空白 溶液.将空白,对照溶液分别注人液相色谱仪,结果 见图3,可知其他成分无干扰. 2.2.5精密度试验取对照品溶液,连续进样5 次,测定峰面积,计算RSD值为0.4%. 2.2.6重复性试验取本品(批号041021)测定其 芍药苷含量,平行操作6份.平均含量为1.08mg ? 胶囊,,RSD值为1.0%.? 2.2.7加样回收率试验取芍药苷对照品15.58 mg置100mL量瓶中,加稀乙醇溶解并稀释至刻度, 摇匀作为贮备液.取已知芍药苷含量的样品适量, 分别加人贮备液10mL(相当于芍药苷对照品1.558 mg),置50mL量瓶中,测定含量,计算回收率为 99.8%,RSD=1.5%(n=9). 图3调经祛斑胶囊高效液相色谱图 Figure3HPLCchromatogramsofTiaojingqubancapsules 2.2.8稳定性试验取本品供试品溶液,分别于 O,2,4,6,12,24h测定峰面积,计算RSD值为 1.2%,表明供试品在24h稳定. 2.2.9含量限度和含量测定结果对10批样品的 含量进行了测定,结果分别为0.8O,1.12,0.86, 0.93,1.09,1.04,0.78,0.86,0.91,1.15mg?胶 囊,.确定本品含白芍以芍药苷(C:,H:O..)计不 得少于0.75mg?胶囊,.. 3讨论 3.1显微鉴别 原质量标准中当归显微鉴别特征不明显,考虑 该标准中已收载当归的TLC鉴别,故将当归显微鉴 别删除,同时参考中国药典增加红花显微鉴别. 3.2当归的TLC鉴别 原质量标准中是通过检定当归中的挥发性物质 来对当归进行鉴别的.实验发现,在与当归对照药 材所显荧光点相同的位置上,阴性也有较明显荧光 斑点,改换多种展开剂进行展开均无改进.经研究发现,是胶囊剂中的女贞子药材对其存在干扰.阿 魏酸为当归有效成分之一,参考中国药典方法改用 阿魏酸进行鉴别试验,结果薄层板上杂斑较多,易对 鉴别产生干扰.将方法中2%碳酸钠溶液改为5% 碳酸氢钠溶液,得到了较满意的效果. 3.3枸杞子的TLC鉴别 原质量标准中枸杞子用水提取,乳化现象十分 严重,难以分层,且阴性样品有干扰,对照药材的荧 光斑点值较大(约0.9左右).将供试液制备方 法和展开剂进行改进后,TLC图谱中对照药材溶液 所显示斑点的数量与原方法相同,值大大降低, 阴性样品溶液无干扰. 3.4黄芪的TLC鉴别 本鉴别为增加项,黄芪含有黄芪甲苷,多糖, 皂苷,黄酮,氨基酸等多种有效成分,经过研究比较, 确定以黄酮为鉴别特征成分进行鉴别. 参考文献: [1]国家药品监督管理局.wS一10710(zD—0710)s-20o2 国家药品标准[s]. 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