悬浮红细胞容量的质控探讨

悬浮红细胞容量的质控探讨 悬浮红细胞容量的质控探讨 中华医学实践杂志ChineseJournalofPracticeMedicine2006年第5卷第7期.793. 法,一种是化学改性,另一种是物理改性.化学改性主要是 通过沥滤,淋洗,脱水改性去活的办法,物理改性又叫内壁 粗糙化,这个方法在涂渍及制备中等极性和极性固定液柱 子时用得较多. 改性后的柱子就可进行固定液的涂渍.涂渍过程是固 定液在毛细管柱内面的一个均匀分布过程.固定液的涂 渍主要有动态法和静态法两种. 动态涂渍法是将要涂渍的固定液配制成一定浓度的溶 液,溶液在气流的推动下,流经要涂渍的毛细管柱,控制涂 渍液的线速度,待溶液流出毛细管柱后,继续通以小气量的 气流使溶剂挥发,待溶剂挥发后在毛细管柱内表面就会留 下一层很薄的液膜.传统的动态法由Dijkstra等_lJ提出, 但此种方法涂渍的毛细管柱一般柱效较低.Schomburg 等l13J提出了汞塞动态法,这种方法涂渍出的毛细管柱效较 高,现在多数人采用此种方法涂渍毛细管柱.由于汞塞动 态法在涂渍过程中使用汞,容易对环境和人体造成伤害,因 此有人提出了非汞塞动态法即超动态法.此种方法采用高 压强迫固定相溶液通过毛细管柱,液塞在管内移动的速度 为汞塞法的30—100倍,用高气压代替了汞塞的作用,此种 方法的缺点是系统要承受极高的气体压力(10—40atm). 在上面集中动态法中,最可靠的,成功率最高的还是汞塞动 态法. 静态法主要有两类.一类是由J.Bouche等lJ发展起 来的.此种方法是将配好的低浓度(0.5%一2%)固定液溶 液充满毛细管柱,一端除气后封死,另一端接真空系统,在 恒温减压下抽去溶剂,在毛细管柱内壁留下一层固定液液 膜.此种方法涂渍出的毛细管柱一般柱效都很高,但较费 时,一般只能涂渍30m以内长度的柱子.另一类是有徐丙 久等l15j提出,黄爱今等lJ完善的高温静态涂渍法.此种 静态法克服了第一种静态法的不足之处,但也有本身的缺 点,主要是其加热方法为水浴,不能进行石英毛细管柱的涂 渍,现在改进的方法是在空气条件下加热,这样石英柱就可 以进行静态法的涂渍了. 近年来,溶胶一凝胶技术在材料化学领域得到了广泛 应用,该技术在化学上的应用主要是用溶胶一凝胶法 制备毛细管柱l.毛细管柱的溶胶一凝胶涂渍法的原理 是:溶胶一凝胶前体经过水解缩合后与石英管内壁牢固结 合形成三维网状结构,固定相与三维网状结构结合形成稳 定的涂层.用溶胶一凝胶涂渍技术把传统的制柱中的 3个步骤(脱活,涂渍,固定相键合交联)合为一步.这样大 大缩短了制柱的时间,此技术主要用于杯芳烃和环糊精及 其衍生物等固定相的涂渍. 涂渍好的柱子,使用前都需经过老化处理,以除去制备 柱子时可能产生的挥发性成分和不稳定物质.老化温度一 般应选在固定相最高使用温度之下,实际操作使用温度之 上,老化时温度上升速率应缓慢,并将柱末端和器断 开. 2结论 一 , 个好的毛细管柱应该是选择性好,柱效高,热稳定柱子惰性.柱子的选择性主要通过要分离的对象进行考 核,不同的柱子会有不同的要求.柱效的评价则是测定一 定K值组分的单位长度的理论板数.即每米理论板数和 涂渍效率.一个好的非极性柱,它的涂渍效率在90%以 上.热稳定性可通过程序升温时基线漂移信号进行测定, 也可通过升温处理后再降到一定温度,进行升温前后柱保 留值,柱效和峰对称性测量,以判断柱子是否能承受一定处 理温度的考验.柱子惰性的评价,一般都采用Grob试剂和 条件进行考核,但也有采用极性组分,如苯酚,苯胺,脂肪酸 酯等对正构烷烃的峰面积比是否恒定进行考核.毛细管色 谱法在色谱分析中的应用越来越广泛,高柱效,低流失是今 后毛细管色谱柱发展的方向. 【参考文献】 lleeML,WrightBW.JChroroxttographia.1980,184:235. 2PooleCF,SchutteSA.Contemporarypracticeofchromatography.Am. sterdamElsevier,1984,79. 3G.MeWillam,Ibid:1958,56. 4陈世蜒.合成橡胶工业,1984,7(2):117. 5寇登民.高等学校化学,1997,18(9):1442. 6朱绍棠.分析测试,2001,20(2):82. 7张汉邦.第十一次全国色谱学术报告会文集,1997. 8吕全建.河南科学,2000,18(2):147. 9陈帆.色谱,2000,18(3):247. 10易建民.分析化学,2000,28(10):1291. 11聂盂言,周良横,王清梅.分析化学,2000,28(11):1366—1370. 12RKaiser.J.Chmmatographia1963,11. 13G.Schomburg.Chmmatographia,1975,(8):517. 14J.Boche.J.Chrotagr.,1986,(6):526. 15BXu.Chromatographia,1984,(18):520. 16黄爱今.色谱,1986,4(5):295. 17李良,史雪岩,戴荣继,等.分析化学.2004,32(3):289 (收稿日期:2006—01—06)(编辑:石岚) ? 检验与输血? 悬浮红细胞容量的质控探讨 刘海波,杨建芳,杨秀梅 【中图分类号】11457.12【文献标识码】B 近年来,随着成分输血的推广,悬浮红细胞已逐渐成为 作者单位:223001江苏淮安,淮安市中心血站 【文章编号】1684—2o3o(2oo6)o7—0793—02 临床应用最主要的血液制品.但是由于国内对悬浮红细胞 容量的规定不够明确(标示量?10%)[,各地制备悬浮红 细胞的方法也略有不同,这就给悬浮红细胞的质量控制等 ? 794?中华医学实践杂志Cse』ou曼ii生箜鲞箜!塑 带来一些困难.有鉴于此,笔者从对本站200ml全血制备 的MAP方悬浮红细胞的容量测定着手,对悬浮红细胞容量 的量化进行了初步摸索,现与大家探讨如下. 1材料与方法 1,1检测对象从2005年1,10月,每月抽取MAP方悬 浮红细胞20袋(男,女献血者各10袋),均由我站采集的合 格的200n~(全血)三联袋制备而成,制备量为1个单位. 1.2操作方法 1.2.1悬浮红细胞制备(三联袋)见参考文献J,离心力 252%,4~C,15min. 1,2.2悬浮红细胞理论容量测定用下列公式: 悬红容量=全血容量×红细胞压积+血浆残留量+50 其中,"50"为悬浮红细胞中添加保养液的毫升数. 1.2,3悬浮红细胞实际容量测定用下列公式: 悬红容量=(血袋总重一空袋重量)?悬红比重 其中,悬浮红细胞比重按1.050计算. 1.3材料与仪器血袋由山东威高集团医用高分子制品 股份有限公司生产,批号:0412302,0501143,0505031, 0506271,0507043,有效期为2年.测量工具为JPr一10型架 盘天平,江苏常熟衡器厂制造,淮安市计量测试所年检合 格. 2结果 见表1,2. 表1悬浮红细胞容?理论范围(rI11) 表2悬浮红细胞实测容?范围(rI11) 3讨论 目前,合理利用悬浮红细胞,不仅可以节约一部分血液 资源,同时还可发挥其保存时间长,浓度,纯度高,疗效好, 抗凝保存液,细胞碎屑及"保存性损害产物"含量少等优点. 我市白1999年向医院推荐应用悬浮红细胞以来,悬浮红细 胞的临床输注率年年攀升,至2005年已达80,3%.但是, 通过这几年对临床使用情况反馈信息的收集,笔者发现部 分由红细胞比积较低的献血者,血浆去除较完全的手法制 备而得的悬浮红细胞,在临床的应用中常会受到"短斤少 两"的质疑.由于国标中对悬浮红细胞容量的标准没有充 分量化,各地制备悬浮红细胞的方法也未完全统一,这就使 血站对医院的质疑难以进行有理有力的解释,同时这一状 况也使血站内部对悬浮红细胞的质量监控难于把握,因此, 有必要对该标准作进一步的明确. 从理论上讲,献血者血液各组分比例虽然存在一定差 异,但仍有规律可循.首先,红细胞压积可根据献血者的性 别不同进行生理区分,其中男性参考值为42%一49%,女性 参考值为37%43%l1;每位献血者一次献出全血的量(不 包括保养液)由国标推算应为175,225ml;另外,在悬浮 红细胞制备移除血浆的过程中,红细胞压积可高达90%, 这时在红细胞制品袋及管路中分别残余了大约lOml,5ml 的血浆,合计15ml.将上述数据代入公式1.2.2可以得出 悬浮红细胞理论容量范围,如表1.在对本站制备的200袋 悬浮红细胞进行测定后,将有关数据代入公式1.2.3得出 悬浮红细胞实际容量范围,如表2.通过比较可以看出,实 际测得的红细胞容量高于理论推算容量,这可能是因为本 站采血时统一使用290g平衡砝码,在去除保养液和血袋的 毛重后,全血采集量多在195ml偏上,在正常范围内整体稍 有偏高,从而造成红细胞成分量略微上升;另外,由于悬浮 红细胞制备过程中,其离心时间较实验室中红细胞压积的 测定时间要短得多,而两者离心力并无太大差别,且用血袋 与用比积管分离红细胞的效果也不尽相同,这就决定悬浮 红细胞的成分分离无法达到的细胞压积的水平;同时离心 后的血袋在移取,拿放,夹浆等过程中,会产生轻微震荡,影 响分离效果,导致红细胞成分量增加.当然,成分制备中离 心机的性能,工作人员的操作手法等因素也会对悬浮红细 胞的制备产生一定的影响. 综上所述,将相关理论推算与实验结果相结合,同时考 虑到各方面的影响因素,笔者认为男性献血者悬浮红细胞 的容量范围在145,185ml,女性献血者在135,17Oral较为 合适.由于本次试验测定的样本数较少,相关的数据肯定 还不够完善,同时对采集量为300ml和400ml的全血制备的 悬浮红细胞容量,也尚未统计,还需要在今后的工作中做进 一 步的研究. 【参考文献】 1卫生部,中国输血技术操作规程(血站部分),1997年版,1997,13 — 14, 2中华人民共和国国家质量监督检验检疫局,全血及成分血质量 要求,中华人民共和国国家标准,GB18469—2001, (收稿日期:2006—05—22)(编辑:邓锋)