【word】 艾灸对寒凝血瘀证模型大鼠内皮素及一氧化氮的影响

【word】 艾灸对寒凝血瘀证模型大鼠内皮素及一氧化氮的影响 艾灸对寒凝血瘀证模型大鼠内皮素及一氧 化氮的影响 实用中医药杂志2011年5月第27卷5期(总第220期) OURNALOFPRACTICALTRADI,I’IoNAJLCHINESEMEDICINE!!! ?论着? 艾灸对寒凝血瘀证模型大鼠内皮素及一氧化氮的影响 陈思宇,李艳霞,唐素珍 (新疆医科大学第二附属医院南湖医院康复科,新疆乌鲁木齐830063) [中图分类号]R245.81[文献标识码]B[文章编号]1004—2814(2011)05—292—02 [摘要]目的:探讨艾灸治疗寒凝血瘀证模型大鼠的活血化瘀作用机制.方法:将健康雄性sD大鼠84只随机分为 l2组(对照组A,B组,模型A,B组,艾灸膈俞,血海,委中,丘墟A,B组),每组各7只.用低温冷冻法建立大鼠寒凝血瘀证模 型,艾灸A组于造模成功次日上午治疗1次,艾灸B组于造模成功次日上午起开始治疗,每天治疗1次,共5次,每次灸5壮. 治疗完成日上午腹主动脉取血2mL,检测内皮素,一氧化氮.结果:膈俞,血海的活血化瘀作用是通过降低ET,升高NO实现 的,委中,丘墟的活血化瘀作用是通过降低ET实现的.结论:艾灸膈俞, 血海,委中,丘墟有活血化瘀作用. [关键词]大鼠;模型;寒凝血瘀;艾灸;内皮素;一氧化氮;影响 [Abstract]Objective:Toobservethepromotingbloodcirculationandremovingbloodstasisfunctionmechanismofmoxibus- tionintreatingsyndromeofcongealingcoldwithbloodstasismodelrats.Method:84healthymaleSDratswererandomlydividedin- to12groups,whichwerecontrolAgroup,controlBgroup,modelAgroup,modelBgroup,moxibustiononGeshuAgroup,moxibus- tiononXuehaiAgroup,moxibustiononWeizhongAgroup,moxibustiononQiuxuAgroupandmoxibustiononGeshuBgroup,moxi— bustiononXuehaiBgroup,moxibustiononWeizhongBgroup,moxibustiononQiuxuBgroup.Therewere7ratsineachgroup.The modelofsyndromeofcongealingcoldwithbloodstasisratswasbuiltwithfreezingmethod.MoxibustiononpointsAgroupswere treatedforonlyonetimeinthenextmorningaftersuccessfulmodelingwhilemoxibustiononpointsBgroupsweretreatedforfive timesfromthenextmorningaftersuccessfulmodeling,onceadayand5moxaconeseachtime.Atthenextdayafterthetreatment completed,2mLbloodwasdrawnfromabdominalaortaforexaminationofETandNO.Result:Thepromotingbloodcirculationand removingbloodstasisfunctionofthepointsGeshuandXuehaiwasreactedbydecreasingETandincreasingNOwhilethatofthe pointsWeizhongandQiuxuwasreactedbydecreasingET.Conclusion:Moxi bustiononthepointsGeshu,Xuehai,WeizhongandQi— UXUhaspromotingbloodcirculationandremovingbloodstasisfunction. [Keywords]rat;model;congealingcoldwithbloodstasis;ET;NO;effect 目前,血瘀和血瘀证本质的现代认识主要有血液循环4h左右.待大鼠出现寒颤,畏寒喜暖,蜷缩少动,朦胧欲 和微循坏障碍,血栓形成,代谢失调,免疫功能障碍,体液睡,眼中无神,反应迟钝,呼吸微弱,皮毛蓬松树立无光泽, 调节功能和内分泌紊乱,血流流变性障碍等….我们通过小便色淡,大便湿烂,唇周发黑,耳色暗红,爪尾部紫暗,舌 寒凝血瘀证的模型证明艾灸不同穴位的效应和作用,探讨暗红,体温下降和心跳减慢等症状和体征时将大鼠取出冷 腧穴主治特异性,揭示膈俞的活血化瘀机制,结果如下.柜.每日9时至13时冷冻1次,连续冷冻5次. 1材料与方法模型成功指标:?造模大鼠一般先有恶风寒,喷嚏,流 1.1实验动物分组涕,发热与饮水增多等,连续冻5天后出现畏寒喜暖,躇缩 健康雄性sD大鼠由北京维通利华动物中心提供,84少动,弓背毛松,食少便稀,以及口,唇周,鼻,耳,爪,尾紫 只,体重(240?10)g.随机分为l2组,即对照A,B组,模暗等寒凝血瘀证症状,即造模成功.?模型A组大鼠所有 型A,B组,艾灸膈俞A,B组,艾灸血海A,B组,艾灸委中切变率下的全 血黏度,红细胞聚集指数和红细胞压积与对 A,B组,艾灸丘墟A,B组,每组各7只.对照组不造模,与照组的差异有统计学意义(P<0.05),模型组大鼠血浆黏 艾灸组选用相同的方法抓取,对照A组连续抓取6天,对度高于对照组但无统计学意义(P>0.05).模型B组大鼠 照B组连续抓取10天.模型A组于造模成功次13抓取l全血黏度低切,红细胞压积明显高于对照~Jl(P<0.05),全 天,模型B组于造模成功次日连续抓取5天.血黏度中切,高切,血浆黏度和红细胞聚集指数高于对照 1.2实验方法组但无统计学意义(P>0.05).?停止治疗24h后将大鼠 寒凝血瘀证模型制备:大鼠适应性饲养3天后,于予3.5mlMkg体重水合氯醛麻醉,腹主动脉取血2mL,注入 第4天上午放入低温冷柜,在一2&C的冷环境中持续受冻2%EDTANA:30tzL和抑肽酶401zL管测ET,NO,轻轻旋转 [收稿日期]2011一O1—21 以保证无凝血及溶血.4?室温中放置30min后,3000rpm 离心10rain,抽取上清液0.5mL于离心管中,一70?冰冻待 ? 292? 实用中医药杂志2011年5月第27卷5期(总第220期) JOURNALOFPRACTICALTRADITIONALCHINESEMEDICINE201 1Vo1.27No.5 测,成批测定,以免产生批间差.NO用硝酸还原酶法测 定,检测方法严格按试剂盒说明操作.ET采用放射免疫分 析法(RIA)法,测定前使标本复融,再次4?条件下,3000 转/min离心5rnin,取上清液测定,检测方法严格按试剂盒 说明操作. 操作方法:剪去大鼠局部被毛,并在穴区标记颜色,艾 灸委中,血海,丘墟穴时将大鼠装入自制小铁丝笼内,固定 伸出后腿,待大鼠安定后施灸.艾灸膈俞穴时,双手轻按 大鼠头部及腰部,使大鼠保持自然体位,采用自制艾粒(高 度5mm,直径5mm)灸相应穴位,待大鼠扭动挣扎时更换艾 粒,每次灸5壮.A组治疗1次,B组治疗5次. 统计学方法:应用sAS8.2统计软件进行分析,用多个 样本均数间的多重比较和两组均值比较.所有数据以平 均值?标准差(面?s)示. 2结果 艾灸膈俞活血化瘀功效:膈俞A组内皮素,一氧化氮 与模型A组比较,差异无统计学意义(P>0.05),膈俞B组 内皮素,一氧化氮与模型B组比较差异有统计学意义(P< 0.05).膈俞A组内皮素,一氧化氮与膈俞B组比较差异 无统计学意义(P>0.05).见表1. 表l各蛆艾受膈俞活血化癣功效比较(i?,) 艾灸血海活血化瘀功效:血海A组内皮素与模型A组 比较差异无统计学意义(P>0.05),血海A组一氧化氮与 模型A组比较差异有统计学意义(P<0.01).血海B组一 氧化氮比较差异无统计学意义(P>0.05),血海B组内皮 素与模型B组比较差异有统计学意义(P<0.05).血海A 组内皮素,一氧化氮与血海B组比较差异无统计学意义(P >0.05).见表2. 表2各组艾灸血海活血化癖功效比较(i?,) 艾灸委中活血化瘀功效:委中A组内皮素与模型A组 比较差异有统计学意义(P<0.05),委中A组一氧化氮与 模型A组比较差异无统计学意义(JP>0.05).委中B组内 皮素,一氧化氮与模型B组比较差异无统计学意义(P> 0.o5).委中A组一氧化氮与委中B组比较差异无统计学 意义(P>0.05),委中A组内皮素与委中B组比较差异有 统计学意义(P<0.05).见表3. 表3各组艾灸委中活血化苷}功效比较(i?t) 与模型A组比较差异无统计学意义(P>0.05),丘墟B组 内皮素与模型B组比较差异有统计学意义(P<0.05),丘 墟B组一氧化氮与模型B组比较差异无统计学意义(P> O.05).丘墟A组内皮素与丘墟B组比较差异无统计学意 义(P>0.05),丘墟A组一氧化氮与丘墟B组比较差异有 统计学意义(P<0.05).见表4. 表4各组艾受丘墟活血化癀功效比较(i?) 3讨论 委中A组寒凝血瘀证大鼠的ET值显着降低,与委中 行血祛瘀功能一致.膈俞A组,血海A组,丘墟A组血瘀 证大鼠ET值均有降低寒凝趋势,丘墟A组效果最差.是 因膈俞,血海治疗血证相关,而丘墟与血证治疗无直接相 关.丘墟A组ET值降低可能与艾灸本身具有活血化瘀的 功效有关.造模成功后大鼠最明显的体征是四肢肿胀. 丘墟穴有通经活络,消肿止痛功效,故丘墟B组ET值显着 降低是通过局部通经活络实现的,通过缓解局部因寒凝而 产生的肿胀以达到调畅气血的作用.委中B组与模型B 组比较委中B组虽无显着差异,但有降低ET值的趋势.A 组效果明显优于B组,可能与委中的穴位功能主治有关. 血郄委中活血化瘀的作用以凉血泻热为主,且血郄多以放 血为治,是否久灸反而削弱了其活血化瘀之功效还有待 探讨. 与模型A组比较,血海A组NO显着升高,膈俞A组, 委中A组,丘墟A组的NO值均有升高趋势但无统计学意 义.血海A组NO值升高明显优于其余3组,提示血海对 NO有特异性的靶向作用,而其余3穴这种作用并不明显. 与模型B组比较,膈俞B组NO值显着升高,血海B组,委 中B组,丘墟B组均有升高趋势但无统计学意义.验证了 血会膈俞具有显着的活血化瘀作用,且膈俞穴的活血化瘀 机制可通过升高血瘀证大鼠的NO值来实现.与模型A组 比较膈俞A组无显着差异,而与模型B组比较膈俞B组显 着升高,提示膈俞的活血化瘀作用与疗程有关,疗程长则 膈俞的活血化瘀作用强.丘墟A组NO值显着升高,与丘 墟B组比较有显着差异,提示丘墟的活血化瘀作用可能与 疗程相关. 综上所述,艾灸膈俞,血海,委中,丘墟治疗寒凝血瘀 证有明确的活血化瘀效果.其作用的机制及调节因素不 尽相同,且疗效与疗程关系也不同. [参考文献]. [1]陈可冀.血瘀证与活血化瘀研究[M].上海:上海科学技术 出版社,1990.369. [2]郑小伟.寒凝血瘀证动物模型的量化研究[J].浙江中医学 院,1999;~(2):44. [3]孔垂成.经穴释义教程[M].北京:中国医药科技出版社, 2O07.305. 艾灸丘墟活血化瘀功效:丘墟A组内皮素,一氧化氮 ? 293?