阴洁肤净洗液的质量标准研究.doc

阴洁肤净洗液的质量研究.doc 阴洁肤净洗液的质量标准研究 作者:莫海玲， 农英高， 周佳宁 【关键词】 蛇床子;,,连翘;,,苦参碱;,,阴洁肤净洗液;,,高效液 相色谱法;,,质量标准 摘要:目的建立阴洁肤净洗液的质量标准。方法采用薄层色 谱法对处方中的蛇床子、连翘等进行定性鉴别;用高效液相色谱法 测定样品中苦参碱的含量:采用ODS柱、流动相为乙腈-0.2 mol/L 磷酸二氢钾(0.2 mol/L磷酸二氢钾里含0.2%的三乙胺，用磷酸调 pH值2.7)6?94，检测波长207 nm;流速1.0 ml/min。结果在薄层 色谱中均能检出蛇床子、连翘的特征斑点;含量测定结果表明，苦 参碱进样量在0.796 8~3.984 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9)， 平均回收率100.1%，RSD为1.12%(n=5)。结论该方法可准确、快速 地对阴洁肤净洗液进行定性、定量测定，可用于该制剂的质量控 制。 关键词:蛇床子; 连翘; 苦参碱; 阴洁肤净洗液; 高效 液相色谱法; 质量标准 Abstract:ObjectiveTo establish the quality standard for Yinjiefujing Lotion. MethodsFructus Cnidii,Fructus Forsythiae in Yinjiefujing Lotion were identified by TLC，the matrine content was determined by HPLC on ODS column(5 μm,250 mm×4.6 mm) ,with a mobile phase of acetonitrile-0.2%mol/L potassium dihydrogen phosphate(6?94),adjusted to pH 2.7 with phosphoric acid. The flow rate was 1.0 ml/min, and the detection wavelength was set at 207 nm. ResultsFructus Cnidii,Fructus Forsythiae could be identified by TLC .The calibration curve was in good linearity over the range of 0.796 8~3.984 μg (r=0.999 9).The average recovery was 100.1%，RSD was 1.12%(n=5). ConclusionThe method is simple, reliable and accurate, and it can be used for quality control of Yinjiefujing lotion. Key words:Fructus Cnidii; Fructus Forsythiae; Matrine; Yinjiefujing lotion; HPLC; Quality Standard 阴洁肤净洗液是 我院制剂室生产的本院制剂，由苦参、蛇床子、连翘等中药制成， 具有清热解毒、祛风燥湿、杀虫止痒、收敛止痛功效。用于湿热带 下，皮肤瘙痒，妇女霉菌性阴道炎等疾病的临床效果很好。为了有 效控制该制剂的质量，笔者对阴洁肤净洗液的质量标准进行了研 究。 1 仪器和试药 1.1 仪器BECKMAN公司高效液相色谱仪，166紫外检测 仪，125泵，电子天平(BP-211D，Sartorius，德国)。 1.2 试药苦参碱对照品、蛇床子素对照品、连翘苷对照品购于 中国药品生物制品检定所;硅胶G(青岛海洋化工集团公司);水为重蒸馏水;阴洁肤净洗液(广西民族医院自制);其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 薄层鉴别 2.1.1 蛇床子的鉴别,1,取本品20 ml，水浴蒸干，残渣加甲醇5 ml使溶解，作为供试品溶液。另取蛇床子对照药材0.5 g，加乙醇10 ml，超声处理20 min，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取蛇床子素对照品，加乙醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。另取缺蛇床子的阴性样品，同供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液。照薄层色谱法,1,实验，吸取上述4种溶液各10 μl分别点于同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯醋酸乙酯正已烷(3?3?2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱无相应的斑点。结果见图1。 2.1.2 连翘的鉴别,2，3,取本品20 ml，置分液漏斗中，用醋酸乙酯充分振摇萃取3次， 30 ml/次，合并醋酸乙酯液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。取连翘对照药材1 g，加甲醇5 ml，超声处理20 min，滤过，滤液作为对照药材溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。另取缺连翘的阴性样品，同供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液。照薄层色谱法,1,实验，吸取上述4种溶液各5 μl分别点于同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇冰醋酸(8?1.5?0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点;在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点;阴性对照色谱无相应的斑点。结果见图2。 图1 蛇床子薄层鉴别图(略) 图2 连翘薄层鉴别图(略) 2.2 含量测定,4，5, 2.2.1 色谱柱条件与系统适应性实验色谱柱为Zorbax ODS(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相:乙腈0.2mol/L磷酸二氢钾(0.2 mol/L磷酸二氢钾里含0.2%的三乙胺，用磷酸调pH 2.7)6?94;检测波长207 nm;流速:1.0 ml/min。在以上色谱条件下，苦参碱峰保留时间约为9 min，理论塔板数按苦参碱计算均不低于2500。色谱图见图3。 2.2.2 对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品约10 mg，置50 ml棕色量瓶中，加流动相超声溶解，稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm膜滤过，即得(每毫升含苦参碱对照品200 μg)。2.2.3 供试品溶液的制备精密量取样品5 ml，置分液漏斗中，用氨试液调pH值至9~10，加氯仿提取4次，10 ml/次，合并氯仿液，置水浴上蒸干。残渣用流动相溶解并定容至25 ml，摇匀，作为供试品溶液。 2.2.4 阴性样品溶液的制备精密量取不含苦参的阴性对照样品5 ml，按供试品溶液的制备方法制备，制得缺苦参碱的阴性对照溶液。 图3 高效液相色谱(略) 2.2.5 线性关系考察精密吸取苦参碱对照品溶液4，8，12，16，20 μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以苦参碱峰面积为横坐标(x)，苦参碱进样量(μg)为纵坐标(y)，进行线性回归，得回归方程:y=0.033 6x-0.038 8(r=0.999 9)，结果表明苦参碱在进样量0.796 8~3.984 μg范围内线性关系良好。 2.2.6 精密度实验精密吸取同一供试品溶液10 μl，连续5次进样，测得其峰面积积分值基本一致。RSD=0. 34%(n=5)。 2.2.7 稳定性实验精密吸取新配制的同一供试品溶液10 μl，每隔2 h进样1次，连续测定5次，测得峰面积积分值RSD=0.38%(n=5)，表明苦参碱在8 h内测定结果稳定。 2.2.8 重现性实验取同一批号样品5份，按供试品溶液制备方法制得供试液，在上述色谱条件下各进样10 μl，测得峰面积积分值RSD=0.95%(n=5)，表明方法重现性良好。 2.2.9 回收率实验采用加样回收法，精密量取已知含量的样品5 ml，共5份，分别精密加入浓度为0.508 mg/ml的苦参碱对照品溶液1，1，2，2，3 ml，按供试品溶液制备方法制备，在上述色谱条件下，精密吸取10 μl，测定峰面积。结果见表1。 表1 回收率实验结果(略) 2.2.10 样品含量测定取5个批号的样品，按供试品溶液制备方法制备，在上述色谱条件下，精密吸取10 μl，测定峰面积，计算含量。结果见表2。 表2 样品含量测定结果(略) 3 讨论 3.1 在蛇床子薄层色谱试验中，曾想用有机溶剂萃取，发现乳化现象严重，故采用本文实验，结果在365 nm紫外光灯下检视，在对照药材和对照品色谱相应的位置上显紫色荧光斑点，斑点清晰圆整，Rf值适中。 3.2 在连翘的鉴别中，采用醋酸乙酯直接萃取法，结果色谱中 特征斑点清晰，Rf值较合适(0.53)。 3.3 本质量标准研究采用薄层色谱法对处方中的蛇床子、连翘等进行定性鉴别;用高效液相色谱法测定样品中苦参碱的含量，可用来有效地控制该制剂的质量。