【word】 高效液相色谱-蒸发光散射法测定参芪扶正注射液中黄芪甲苷含量

【word】 高效液相色谱-蒸发光散射法测定参芪扶正注射液中黄芪甲苷含量 高效液相色谱-蒸发光散射法测定参芪扶正 注射液中黄芪甲苷含量 中国医院药学杂志2008年第28卷第2期ChinHospPharmJ,2008Jan,Vol28,No.02 MCF-7/ADM细胞的生长,且抑制率具有浓度和时 间依赖性,但尼美舒利对MCF-7/ADM细胞的抑制 效应明显弱于MCF-7/S中相应剂量,且效应时间 明显滞后.因人乳腺癌MCF-7细胞株中不表达 Cox-2,同时新近的研究发现Cox2具有不依赖其酶 活性的抗增殖效应_3].可见尼美舒利对MCF-7/S 和MCF-7/ADM的生长抑制作用不是通过作用于 抑制Cox-2,推测可能与抑制NF-~B的激活有关[5]. P-170是MDR1基因的蛋白产物,在ATP的 参与下,P-170发生能量依赖性变构,将细胞内药物 “泵出”细胞外,造成细胞内药物浓度下降,细胞毒作 用降低或完全丧失,细胞产生耐药.GS]r_最初是 从人胎盘中分离出的酸性谷胱甘肽s转移酶,以后 发现在人体正常组织中广泛表达,在恶性肿瘤中往 往异常高表达.其耐药机制是能把抗癌药物产生的 过氧化物还原为无毒物质,还可抑制烷化剂等亲电 性化疗药物引起的癌细胞的DNA交联,从而降低 化疗药物对细胞的杀伤作用.本研究发现尼美舒利 能明显提高Mc7/ADM细胞对Rh123的蓄积能 力,说明尼美舒利能增强化疗药对MCF-7/ADM的 毒性作用,而对MCF-7/S细胞却无上述作用.其 作用机制可能是通过下凋P-170和GST-~的水平, 提高细胞内药物浓度,部分逆转了MCF-7/ADM的 耐药性. 参考文献: Eli刘红英,张剁,曾文良.尼美舒利逆转人胃癌细胞耐药的实验 研究EJ].肿瘤防治杂志,2005,12(3):197—201. E23RatnasingheD,DaschnerPJ,AnverMR,eta1.Cyclooxygenase- 2,Pglycoprotein-I70anddrugresistance;ischemoprevention againstmultidrugresistancepossible?EJ].AnticnacerRes, 2001,21(30):2147—2177. [3]ZahnerG,WolfG,AyoubM,eta1.cyclooxygenase一2overex— pressioninhibitsplatelet—?derivedgrowthfactor-inducedme—— sangialcellproliferationthroughinductionofthetumorsup— pressorgenep53andthecyclin—dependentkinaseinhibitors p21waf-1/cip1andp27kip-1EJ].JBiolChem,2002,277: 9763. [-42PattingreS,AricoS,BauvyC,eta1.Celecoxibinducesapop— tosisbyinhibiting3——phosphoinositide-dependentproteinki—— nase-IactivityinthehumancoloncancerHT-29cellline[-J].J BiolChem,2002,277=2713. [5]郭责龙,张筱骅,姚榛祥.选择性环氧化酶抑制剂的抗乳腺 癌作用途径EJ].中华实验外科杂志,2005,22(3):378. [收稿日期]2007-01—15 高效液相色谱一蒸发光散射法测定参芪扶正注射液中黄芪甲苷含量 张锦文,寥梅,张勇慧,阮汉利,皮慧芳,吴继洲(华中科技大学同济医学院药学院,湖北武汉430030) [摘要]目的:建立参芪扶正注射液中黄芪甲苷的含量测定方法.方法:HITACHIL-71O0型高效液相色谱仪(二元泵); Septt3000工作站;Alltech2000型蒸发光散射检测器;KR…_)5C18色谱柱(25Omm×4.6mm,5ffm);乙腈一水(35:65)为流动相, 室温,流速0.8mL?min-.;漂移管温度1()5?;气体流速2.70mI?min?.. 结果:进样量浓度的对数值(X)与峰面积积分对数 值(y)之间呈良好的线性关系,回归方程为Y=L3184X+6.7165,r=0.9984,线性范围为0.0114,0.1425g?L.结 论:本法操作简便,结果准确,重现性好,可用于控制该制剂的质量. [关键词]参芪扶正注射液;黄芪甲苷;HPLCELSD;含量测定 [中图分类号]R927.2[文献标识码]A[文章编号]10015213(2008)02—010403 Assayofastragaloside?intheShenqifuzhenginjectionbyHPLC—ELSD ZHANGJin—wen,LIAOMei,ZHANGYonghui,RUANHan-li,PIHui—fa zhou(Departmentof ng,WUJi— Pharmaceutical,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,HubeiWuhan430030,China) AINI?RACT:OBJECTIVEToestablishamethodtodetermineastragaloside IVintheShenqifuzhenginjection.METIia HITACHIL一 7100HPLCchromatographwasusedwithacolumnofKR100—5C18(25()mm ×4.6ram)andacetonitrile-water(35 :65)asmobilephase,flowratewas0.8mL?min;Thetemperatureofdrifttubeformeasurementwas105?,flowrateof nitrogenwas2.70mL?min;Sepu3000workstationandAlltech2000EISDwasused.RESULICalibrationcurvewastee— tilinearintherangeof0.0114—0.1425g?Lwithr=0.9984.TheregressionequationwasY=1.3184X+6.7165.The methodhasgoodprecision.repeatability.solutionstabilityandrecovery,CONeLUS10NThemethodissimpleandresultisac一 [基金项目]湖北省科技攻关重点项目(编号:2006AA301B16—4)[作 者简介]张锦文,女,硕士,电话:027—83657870,E-mail:zhangjin wen8080@sina.corn[通讯作者]张勇慧,男,博士,副教授,电 话:027—83657870,Email:zhangyonghui5@sina.corn 生旦堕堂堑竖笙堂n卜{P一一harmII…,2…()I)一 o—l2…8,N…o. 8Jan,V— curate.whichcanbeusedtocontrolihequalhyofShenqifuzhenginjeclion. KEYWORDS:Shenqifuzhengin]ection;astragalosidcIV;HPIEISD;assay 参芪扶正注射液南黄芪和党参两味药组成,黄 良是君药,黄芪甲苷是参蓖扶正注射液中的主要活 性成分之一,其含量测定方法有薄层扫捕法{,比色 法:,HPIC法和HPICElSD法[等.仍在实 际工作巾发现,由于组分复杂,用薄层扫描法,比色 法测定受实验条件影响较大,重复性也较差;用高效 液相色谱法低波长紫外检测时,溶剂背景难以消除. 本实验采用高效液相色谱蒸发光散射(HPIC— ElSD)法,不受流动相溶剂的干扰,对黄芪甲苷的 质检测效果良好. 1材料 H1TACHII一71()()型高效液相色谱仪(二元 泵,日本日立公司);Sepu3()()【】T作站(杭州普惠科 技有限公司);Alhech2()()()型蒸发光散射检测器 (美国Alhech公司);黄芪甲苷对照品(中药品生 物制品检定所,批号11078120031(),含量 99.92);乙腈,甲醇为色谱纯. 2方法与结果 2.1色谱条件与系统适用性试验色谱柱:KR, 5C18(250mm×4.6mm,5m);流动相:乙腈一水 (35:65);蒸发光散射(ElSD)检测器;漂移管温度: 1(】5?;气体流速:2.7()mI?min,.理论板数按黄 芪甲苷计不低于300(). 2.2对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照 品适量,加甲醇溶解,制成约().1g?I”的溶液,即 得. 2.3供试品溶液的制备精密量取本品1()mI,转 移至分液漏斗中,用水饱和的正丁醇提取4次,每次 2【)mI,合并正丁醇液,用氨试液洗涤3次,每次2() mI,正丁醇液置水浴上蒸干,残渣加甲醇稀释溶解, 移至5mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,0.45 ptm滤膜滤过,即得. 2.4测定方法分别精密吸取对照品溶液20,10 I和供试品溶液2【)L,注入液相色谱仪,测定,用 外标两点法对数方程计算,即得. 2.5曲线的制备精密量取黄芪甲苷对照品 溶液2,4,6,8,10mi分别加甲醇定容至10mL,在 上述色谱条件下重复进样2次,每次10I,测定峰 面积积分值,以浓度的自然对数值为横坐标,峰面积 的自然对数值为纵坐标进行线性回归,得回归方程 为:Y=1.3184X+6.7165,r=0.9984,表明进样 量浓度的对数值与峰面积积分值的对数值之间呈良 ? 1()5? 好的线性关系,线性范围为().2,1.(„f培. 2.6方法学考察 2.6.1精密度试验取黄芪甲:背对照品约().1g, 精密称定,加甲醇溶解,制成每1mI龠约().1mg 的溶液,依上法重复进样6次,RSD为1.9(),表明 本法的精密度良好. 2.6.2重复性试验取样品,照含量测定方法配制 6份供试品依法进行测定,RSD为().86,表明本法 的重复性良好. 2.6.3溶液稳定性试验取同一供试品溶液,于室 温分别放置(),1,2,3,6,12h后取样测定,RSD为 1.23,表明本法的稳定性良好. 2.6.4加样同收试验精密量取本品(批号 ()401()1,含黄芪甲苷().82mg)1()mL,共9份,分别 精密加入不同质量的黄芪甲苷对照品,依供试品制 备法处理,移至5()mI量瓶中,加甲醇稀释至刻度, 摇匀.().45ITI滤膜过滤,按含量测定法操作,计算 加样回收率.结果见表1,表明本法的回收率良好. 表1黄芪甲苷含量测定回收率(“=9) Tab1Resultsofrecoveryrate(“=9) 样品含量加入量测得量回收平土句傅RSD,/ rag/mg/mg/// 0.820.651.4698.5 0.820.661.4798.5 0.820.671.4898.5 0.820.811.6298.8 0.820.831.6397.698.50.46 0.820.841.6598.8 0.820.991.8099.() 0.821.O01.8199.0 11:竖!::Z!兰:!1 2.7样品测定精密量取本品5mL,依”2.3”项下 操作,对制备的3批样品按”2.4”项下方法进行测 定,含量分别为(O.81?0.02),(【】.83?o.02),(【).80 ?0.O1)g?1Oi,. 3讨论 曾试验了甲醇一水,四氢呋喃一水及乙腈一水等不 同流动相,考察黄芪中各成分的分离情况及检测灵 敏度,结果表明采用乙腈一水(35:65)为流动相分离 效果良好,且出峰保留时问适度. HPLCELSD法操作简便,且不受外界环境干 扰,试剂在检测中全部蒸发,灵敏度,稳定性及重复 性很高,适用于黄芪及相关制剂中黄芪甲苷成分的 检测. 参考文献: r1]鲁静,王宝琴.黄苠甲苷的薄层扫描法测定r-『_.中成药,1992, 生垦医堕堑杂志2008年第28卷第2期ChinHospPharmJ,2008Jan,Vo128,No.02 14(6):34. [2]陆一心.黄芪甲苷定量方法的研究[J].中成药,1996,18(2):[4] 38. [3]付铁军,李伯刚,及元乔,等.高效液相色谱法测定黄芪注射液 中黄芪甲苷的含量[J].天然产物研究与开发,1997,9(4):53. 周春玲,鲁静.HPLC-ELSD法测定养阴降糖片中黄芪甲苷的 含量[J].中国实验方剂学杂志,2003,9(6):8-9. [收稿日期]2007-04—12 酮基布洛芬单室渗透泵片在家犬体内的药动学和相对生物利用度 王汝兴,张宇丽,陈大为(1.承德医学院中药研究所,河北承德067000;2.承德医学院附属医院耳鼻喉科,河北承德 067000;3.沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳110016) [摘要]目的:研究家犬口服酮基布洛芬单室渗透泵片的药动学和相 对生物利用度.方法:家犬6只采用双周期交叉给药,用 高效液相色谱法测定酮基布洛芬的血药浓度,用3P97处理药动学参 数进而计算相对生物学利用度.结果:酮基布洛芬单室 渗透泵片和市售普通片在家犬体内过程均符合单室模型,其主要的 药动学参数,C巾月和AUc_分别是(2.51?0.67), (1.44?0.26)h;(7.12?1.27),(6.O1?1.65)mg?L;(66.15?2.32),(59.28?3.69)g?h?mL,.结论:酮基布洛芬单室渗 透泵片具有明显的缓释特征,生物利用度与市售普通片等效. [关键词]酮基布洛芬单室渗透泵片;高效液相色谱法;药动学;生物利 用度 [中图分类号]R969.1[文献标识码]A[文章编号]10015213(2()08)02一 ()106—03 Thebioavllabilityandpharmaeokineticsstudyofketoprofenmonolithicosmoticpumpcontrolled- releasetabletstndogs WANGRu—xing,ZHANGYu—li,CHENDa—wei(1.InstituteofChinese MateriaMedicaChengdeMedicalCoilege, HebeiChengde067000,China)2.DepartmentofOtolaryngology,AffiliatedHospitalofchengdeMedicalCollege,HebeiCheng— de067000,China)3.DepartmentofPharmaceutics,CollegeofPharmacy,LiaoningShenyangPharmaceuticalUniversity,Liangn— ingShenyangl10016,China) ABSTRACY,OBJECTIVETostudythepharmacokineticsandrelativebioavilabilityofketoprofenindogs.METHODSSix dogsweredividedintotwogroupsbydoublecrossingmethodintwoweeks.Theketoprofeninplasmawasmeasuredby HPLC.Therelativebioavilabilityandpharmacokineticparametersofketoprofenmonolithicosmoticpumpcontrolled-release tabletswerecomputedby3P97.RESULTSThepharmacokineticparametersoftestandreferencepreparationforketoprofen were:T(2.51?0.67)and(1.44?0.26)h,C(7.12?1.27)and(6.01?1.65)mg?L一,AUG)-t(66.15?2.32),(59.28? 3.69)/~g?h?mL,respectively.Therelativebioavilabilityofthecontrolled—r eleasetabletswas110.58.O3NCLUSIONKe— toprofenmonolithicosmoticpumpcontrolled-releasetabletshavemarkedcontrolled—releasecharacters.Theketoprofenmono— lithicosmoticpumpcontrolled—releasetabletsandthenormaltabletswerebioequivalent. KEYWORDS:ketoprofenmonolithicosmoticpumpcontrolled-releasetablets;HPLC;bioavilability;pharmacokinetics 酮基布洛芬(ketoprofen)是一种非甾体类消 炎,镇痛,解热药,其特点是高效低毒,疗效优于同类 药布洛芬.酮基布洛芬口服吸收迅速(一次给药后, 约0.5,2h达血浆峰浓度),消除较快,普通片剂一 般每天给药需3,4次,但酮基布洛芬具有消化道不 良反应,长期服用会导致消化道溃疡,出血等症 状_1].本实验以酮基布洛芬普通片剂为对照制剂, 研究自制的酮基布洛芬单室渗透泵片在家犬体内的 药动学特征和相对生物利用度,建立测定血浆中酮 基布洛芬血药浓度的测定方法. 1材料 高效液相色谱仪,包括1580型输液泵,1575型 紫外检测器(日本分光公司);酮基布洛芬对照品(西 南合成制药厂,批号0105012,含量99.990A);酮基 布洛芬单室渗透泵片(自制,规格:50mg/片,批号 020307);酮基布洛芬普通片(西南合成制药厂,规 格:5Omg/片,批号0106023);内标萘普生原药(浙 江天心制药厂,批号020212,含量99.9). 2方法与结果 2.1受试动物及给药方法6只健康成年舍犬(承 [作者简介]王汝兴,男,硕士,助理研究员,电 话:0314—2291143,Email:wangrul973@sina.com