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.沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响

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.沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响.沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响 vi设计 作者:王养正,吴英,王军宪,王秉文,崔刚 【摘要】 目的 观察沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响。方法 实验用 深部X线治疗机,每次以3000cGy的剂量,照射两次,造成大白鼠臀部放射性皮肤损伤。待 动物症状明显后,将?度皮肤损伤的动物随机分为6组,即阴性对照组、沙棘果油高剂量组、 沙棘果油低剂量组、沙棘籽油高剂量组、沙棘籽油低剂量组以及阳性对照组。沙棘果油及籽 油高剂量组,每天在损伤部位涂药两次,而其低剂量组每天涂药一次,阴性对照组每天涂灭 菌的注射用...
.沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响
.沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响 vi 作者:王养正,吴英,王军宪,王秉文,崔刚 【摘要】 目的 观察沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响。方法 实验用 深部X线治疗机,每次以3000cGy的剂量,照射两次,造成大白鼠臀部放射性皮肤损伤。待 动物症状明显后,将?度皮肤损伤的动物随机分为6组,即阴性对照组、沙棘果油高剂量组、 沙棘果油低剂量组、沙棘籽油高剂量组、沙棘籽油低剂量组以及阳性对照组。沙棘果油及籽 油高剂量组,每天在损伤部位涂药两次,而其低剂量组每天涂药一次,阴性对照组每天涂灭 菌的注射用水一次,阳性对照组每天涂Solcoseryl Jelly软膏一次。结果 肉眼观察结果 显示,连续用药10d后,沙棘果油、籽油及Solcoseryl Jelly组动物的局部红斑、水肿明 显减轻,创面分泌物明显减少,用药2周后,上述症状明显消退,与阴性对照组比较,明显 好转;另外,沙棘果油、籽油及Solcoseryl Jelly组的创面愈合时间明显缩短。光学显微 镜观察结果显示,沙棘果油、籽油及Solcoseryl Jelly组的皮肤损伤明显减轻,炎症反应 亦明显减轻,创面修复明显。电子显微镜观察结果显示,阴性对照组的超微结构明显受损, 而沙棘果油、籽油及Solcoseryl Jelly组的损伤明显减轻。结论 沙棘果油及沙棘籽油对 大鼠放射性皮肤损伤有明显的治疗作用。 【关键词】 沙棘果油;沙棘籽油;放射性皮肤损伤;大鼠 ABSTRACT: Objective To observe the effects of sea buckthorn pulp oil and sea buckthorn seed oil on radiation skin lesions of rats. Methods The experiment used deep x ray therapeutic machine to irradiate the rats twice, and the irradiation dosage was 3000cGy each time. This caused radiation skin lesions to rats buttock. After the symptoms became obvious, the rats suffering from Grade ? skin lesions were randomly divided into six groups: negative control group, high dose sea buckthorn pulp oil group, low dose sea buckthorn pulp oil group, high dose sea buckthorn seed oil group, low dose sea buckthorn seed oil group, and positive control group. The oil was applied to the wounded area twice a day for high dose pulp oil group and high dose seed oil group, and it was applied once a day for the low dose groups. For the negative control group, sterilized injection water was applied once a day, and Solcoseryl Jelly ointment was applied once a day for the positive control group. Results The results from naked eye observation showed that after medication for 10 consecutive days, the local erythema and edema of the groups using sea buckthorn pulp oil and seed oil and Solcoseryl Jelly ointment abated, and the secretions of the wounded surface reduced considerably. After medication for two weeks, obvious disappearance of the above symptoms was observed; compared with the negative control group, the condition improved considerably. In addition, the healing time of the wounded area of the rats was markedly shortened for the pulp oil groups, seed oil groups, and the Solcoseryl Jelly group.Optical microscopic observation showed that the injuries in the pulp oil group,seed oil group,and the Solcoseryl Jelly group vi设计 were significantly reduced, inflammatory reaction was obviously reduced, and the restoration of the wounded areas was obvious. Electron microscopic observation showed that the ultrastructure of the negative group was obviously damaged, but that of the pulp oil groups, seed oil groups, and Solcoseryl Jelly group reduced significantly. Conclusion The above results suggest that sea buckthorn pulp oil and sea buckthorn seed oil have a marked therapeutic effect on radiation skin lesions in rats. KEY WORDS: sea buckthorn pulp oil; sea buckthorn seed oil; radiation skin lesion; rat 沙棘籽油及沙棘果油是从胡颓子科植物沙棘的籽及果肉中提取。据报道,沙棘油可用于 治疗溃疡病、烧、烫伤等多种疾病[1]。张文禄等[2]报道沙棘油对肿瘤患者放射治疗所引起 的急性放射性皮炎、黏膜炎症及非放射性的皮肤炎症、溃疡、伤口愈合不良等都有较好的疗 效。高力英等[3]报道沙棘油对患者放射性皮肤损伤有防治作用。本实验观察了用超临界萃取 法提取的沙棘籽油及沙棘果油对大鼠放射性皮肤损伤的影响。 1 材料与方法 1.1 实验动物 健康的SD大鼠,雌性,体重(200?20)g,由西安交通大学医学院实验动物中心提供。 1.2 药品 沙棘籽油(sea buckthorn seed oil, SBSO)及沙棘果油(sea buckthorn pulp oil, SBPO), 用超临界萃取法提取,由芬兰土尔库大学提供。Solcoseryl Jelly软膏,由瑞士素高大药 厂生产。 1.3 仪器 深部X线治疗机为匈牙利产,型号:THX;光学显微镜为美国产,型号:AO;透射式电子 显微镜为日本产,型号:日立H 600;超薄切片机为瑞典产,型号:LKB型。 1.4 大鼠放射性皮肤损伤模型的复制 vi设计 选SD大鼠64只,体重(200?20)g,雌性。于照射前一天将动物两侧臀部脱毛。照射前20min,用0.06mol/L戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉,然后将大鼠固定在动物板上,把臀部两侧用制好的带有2×3cm3大小孔的铅板覆盖,暴露脱毛部位,置于深部X线治疗机球管下,再用厚铅板覆盖大鼠其他部位。照射的电压180kV,电流12mA,照射距离30cm,每次剂量3000cGy,间隔两天再照射一次,总剂量为6000cGy。根据文献报道[5 6] ,急性放射性皮肤损伤分为四个时期。第一期为早期反应期,第二期为假愈期,第三期为症状明显期,第四期为恢复期。又按其严重程度(主要是症状明显期的症状)分为3度。1度:早期反应局部出现红斑,假愈期1-2周,红斑暂消失,临床症状明显期出现持续性红斑,同时发生脱毛。2度:早期反应期与1度相似,出现红斑,假愈期1-3周,症状明显期出现二次红斑,数日后红斑处出现水疱。3度:早期反应有红斑、水肿等,假愈期数小时至10d,症状明显期出现二次红斑、水疱、坏死、溃疡。本实验复制了2度放射性皮肤损伤模型。 1.5 实验分组与给药 待模型动物的症状明显后,将皮肤2度损伤的动物随机分为阴性对照组、SBPO高剂量组、SBPO低剂量组、SBSO高剂量组、SBSO低剂量组以及阳性对照组。SBPO和SBSO高剂量组每天在损伤部位分别涂SBPO和SBSO两次,SBPO和SBSO低剂量组每天局部涂药一次,阴性对照组每天外涂灭菌的注射用水一次,阳性对照组每天外涂Solcoseryl Jelly软膏一次。 1.6 观察指标 ?肉眼观察局部反应:每天观察受照射部位的反应,并进行。据相关文献[4]对局部红斑、水肿的程度进行评分。红斑:无红斑0,轻度红斑(微红)1,中度红斑(红)2,重度红斑(明显红)3;水肿:无水肿0,轻度水肿(勉强可见)1,中度水肿(明显可见,边缘高出周围皮肤)2,重度水肿(皮肤隆起1mm,轮廓清楚)3,水肿破溃,有创面形成4,最高总分值7。照射后到创面愈合的时间(d)为愈合时间。?病理组织学及超微结构观察:给药后第18天时,每组取4只动物,分别于一个照射部位取材,用10%(体积分数)甲醛溶液固定,做常规切片,HE染色,用光学显微镜进行病理组织学观察。同时每组取2只动物,分别于一个照射部位取材,2.5%(体积分数)戊二醛前固定,10g/L(1%)四氧化锇后固定,乙醇系列脱水,Epon812浸透,包埋,聚合,超薄切片,以铀、铅双重染色,电子显微镜下进行超微结构观察、拍照。 1.7 统计学处理 采用SPSS 13.0软件进行统计分析,创面愈合时间先来用单因素方差分析,判断组间变异,然后两组间比较用t检验,局部红斑、水肿,按其评分的分值进行定量,并计算出?s,用t检验统计。检验水准α=0.05。 vi设计 转贴于 233网校中心 上一页1 2下一页 下一篇:晚期癌症患者疼痛自我管理干预的研究进展 2 结 果 2.1 皮肤损伤的动物模型观察 照射后2-4h,大鼠照射部位出现暂时性红斑(早期反应期),此后红斑消退进入假愈期(又称潜伏期),假愈期持续4-7d。然后进入症状明显期,出现持续性红斑、皮肤粗糙、脱屑、水肿、结痂、脱毛,水肿破溃后形成创面,并有分泌物渗出,形成放射性皮肤2度损伤(bullous dermatitis)的动物模型。此后进入恢复期,上述症状逐渐消退,创面脱痂、愈合。 2.2 SBPO及SBSO对局部症状的影响 2.2.1 SBPO及SBSO对皮肤红斑、水肿的影响 见1。表1 SBPO及SBSO对皮肤红斑、水肿的影响(略) 结果显示,连续用药10d后,SBPO组、SBSO组及Solcoseryl Jelly组的局部红斑、水肿明显减轻,创面分泌物明显减少,与阴性对照组比较明显好转。 2.2.2 SBPO及SBSO对创面愈合时间的影响 见表2。表2 SBPO及SBSO对创面愈合时间的影响(略) 结果显示,SBPO组、SBSO组及Solcoseryl Jelly组的创面愈合时间明显缩短。 vi设计 2.3 光学显微镜下观察的结果 ?SBPO高剂量组:创面修复,表皮明显增厚,角化细胞、颗粒细胞增多,排列3-4层,胞浆内黑色素细胞增多,棘细胞增生、体积大。真皮浅层内小血管扩张充血,散在炎细胞浸润(淋巴细胞),结缔组织增生。皮下组织内小血管、淋巴管扩张,周围有淋巴细胞、单核细胞、少量嗜酸性粒细胞的浸润,小血管轻度充血。?SBPO低剂量组:创面部分修复,表皮角质细胞增生,颗细胞增多,胞浆内可见较多的黑色素颗粒,棘细胞增生。部分创面仍可见皮肤表皮组织坏死,表面有纤维素渗出,其间弥漫中性粒细胞浸润。真皮内可见中性粒细胞浸润,汗腺萎缩、毛囊角化上皮增生。真皮、皮下组织水肿,弥漫性淋巴细胞、单核细胞浸润,小血管扩张、充血。?SBSO高剂量组:创面修复、表皮的角质层细胞增生,颗粒细胞增多,层数增生3-4层,少量淋巴细胞、单核细胞浸润。真皮、皮下组织小血管轻度扩张充血,少量淋巴细胞浸润。?SBSO低剂量组:创面大部分已修复,光镜下见正常皮肤结构。少部分皮损部位见表皮细胞增生活跃,角质层细胞、棘细胞、基底细胞增生明显。真皮、皮下组织内小血管扩张、充血,散在淋巴细胞、单核细胞浸润。?阳性对照组(Solcoseryl Jelly组):表皮大部分结构正常,仅部分表皮内棘细胞间连接松散,有大小不等的空泡形成,角质细胞、棘细胞增生。真皮、皮下组织中小血管轻度扩张、充血。?阴性对照组:创面皮损明显。表皮层及真皮浅层组织坏死,大量纤维素、中性粒细胞渗出。真皮内水肿、小血管扩张、充血,广泛中性粒细胞浸润。皮下组织内血管扩张,广泛水肿,炎细胞浸润(图1)。 2.4 电子显微镜下的观察的结果 ?SBPO高剂量组:角质层部分溶解;颗粒层细胞质中可见到较多的大小不一的透明角质颗粒,部分细胞器溶解;棘细胞间隙较宽,可见到较多的桥粒结构,部分细胞质溶解;基底膜不完整。?SBPO低剂量组:颗粒细胞质中有较多的大小不一的透明角质颗粒,细胞核染色质分布均匀,核仁清晰可见,棘细胞间有较多的桥粒结构,基底膜连续中断。其形态学改变基本同SBPO大剂量组。?SBSO高剂量组:角质层基本完整,颗粒层细胞质中可见到较大的角质颗粒,较多的桥粒结构分布在棘细胞内,细胞内可见到较多的核糖体,基膜较完整。其形态学改变基本同正常组。?SBSO低剂量组:细胞排列整齐,颗粒层细胞内可见到较多的角质颗粒,棘细胞间桥粒结构较多,结构清晰,基膜连续。其形态学改变基本同SBSO大剂量组。?阳性对照组(Solcoseryl Jelly):角质层细胞部分溶解,颗粒层细胞排列较整齐,可见到透明角质颗粒;棘细胞及基底细胞间隙较宽,可见到桥粒连接;基底膜不完整,可见到淋巴细胞浸润。其形态学变化较阴性对照组显著改善。?阴性对照组:角质层细胞大部分溶解或消失;颗粒层细胞亦有部分溶解,细胞质中的角质透明颗粒尚可看见,细胞排列紊乱;棘细胞层细胞间隙部分增大,部分缩小,桥粒连接减少或消失,胞质内出现空泡;基层细胞层排列紊乱;基底膜部分溶解、消失、连续性中断,细胞间可见到淋巴细胞浸润(图2)。以上形态学改变在SBSO大、小剂量组最好;SBPO大、小剂量组及阳性组次之。 3 讨论 vi设计 本实验复制了2度放射性皮肤损伤模型,其表现与文献报道一致。据报道,有用小鼠、豚鼠、小猪等动物做放射性皮肤损伤实验,但小鼠及豚鼠耐受性差,小猪不易得到[6]。本实验成功的复制了大鼠放射性皮肤损伤的动物模型。此模型具有简便、可靠,且大鼠耐受性强,不易死亡等优点,在药理学的研究中具有实用价值。 本实验的肉眼观察结果表明,给药10d后,SBPO组、SBSO组及Solcoseryl Jelly组的红斑、水肿等局部症状明显减轻,创面分泌物明显减少,与阴性对照组比较,明显好转;创面愈合时间明显缩短;光学显微镜观察结果表明,SBPO组、SBSO组及Solcoseryl Jelly组的皮肤损伤明显减轻,炎症反应亦明显减轻,创面修复明显;电子显微镜观察结果表明,阴性对照组的超微结构明显受损,而SBPO组、SBSO组及Solcoseryl Jelly组的损伤明显减轻。以上结果提示SBPO及SBSO对大鼠放射性皮肤损伤有明显治疗作用。SBPO及SBSO中含有丰富的维生素A、维生素E、不饱和脂肪酸以及磷酯、甾醇类、甜菜碱等多种生物活性成分[7]。维生素A能维持上皮组织结构的完整性和正常功能,促进伤口愈合;维生素E有抗脂质过氧化作用,而放射性损伤与脂质过氧化作用密切相关;不饱和脂肪酸也是促进组织修复的重要物质。所以,SBPO和SBSO对放射性皮肤损伤的治疗作用,可能与其中含有的多种活性成分有关。 【参考文献】 [1]刘凤云. 沙棘油的药理研究 [J]. 生物学, 2005, 40(2):13 15. [2]邹元生,苏琳,张敬昌,等. 沙棘果油药理研究进展 [J]. 沙棘, 2006, 19(1):24 26. [3]高力英,田晓刚,魏世鸿. 放射性皮肤损伤268例防治 [J]. 肿瘤学杂志, 2003, 9(6):380 380. [4]郑玉霞,李永宏. 沙棘护肤品皮肤刺激性试验研究 [J]. 沙棘, 2006, 19(4):25 27. [5]王玉洁,董峰,沈薇. 复方沙棘油制剂抗β粒子辐射损伤动物实验研究 [J]. 中华放射医学与防护杂志, 2004, 24(3):255 255. [6]郭鹞. 人类疾病的动物模型 [M]. 北京:人民卫生出版社, 1990:226 227. [7]安俊龙,安利俊,刘均洪. 沙棘油中有效成分和药用成分的研究 [J]. 化学工业与工程技术, 2004, 25(3):1 3. 转贴于 233网校论文中心 上一页 1 2下一页 下一篇:晚期癌症患者疼痛自我管理干预的研究进展 vi设计
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