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河南省土壤中芽孢杆菌属资源调查_cropped

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河南省土壤中芽孢杆菌属资源调查_cropped河南省土壤中芽孢杆菌属资源调查_cropped 河南省土壤中芽孢杆菌属资源调查 刘秀花 , 梁 峰 , 刘 茵 , 翟兴礼 ()商丘师范学院生物系 , 河南 商丘 476000 摘要 : 为了解河南省土壤中芽孢杆菌资源状况 ,获得一批有应用价值的菌株 ,从河南省不同地区的 土壤中分离纯化需氧芽孢杆菌 。采用帄板分离法从 22 个土样中获得 415 株纯培养物 ,对其进行形 态学特征观察与测量 、生理生化试验测定 ,并依据伯杰氏系统细菌学手册进行菌种鉴定 ,它们分属 () 于 14 个不同的芽孢杆菌菌种 。其中检出率较高...
河南省土壤中芽孢杆菌属资源调查_cropped
河南省土壤中芽孢杆菌属资源调查_cropped 河南省土壤中芽孢杆菌属资源调查 刘秀花 , 梁 峰 , 刘 茵 , 翟兴礼 ()商丘师范学院生物系 , 河南 商丘 476000 摘要 : 为了解河南省土壤中芽孢杆菌资源状况 ,获得一批有应用价值的菌株 ,从河南省不同地区的 土壤中分离纯化需氧芽孢杆菌 。采用帄板分离法从 22 个土样中获得 415 株纯培养物 ,对其进行形 态学特征观察与测量 、生理生化试验测定 ,并依据伯杰氏系统细菌学进行菌种鉴定 ,它们分属 () 于 14 个不同的芽孢杆菌菌种 。其中检出率较高的 3 个菌种依次为枯草芽孢杆菌 22 . 4 %,蜡状芽 ( ) ( ) 孢杆菌 16 . 1 %, 蕈状芽孢杆菌 12 . 5 %。出土率大于 60 %的 5 个菌种分别是蕈 状 芽 孢 杆 菌 () () () () 86 . 4 %,蜡状芽孢杆菌 81 . 8 %,枯草芽孢杆菌 77 . 3 %,坚强芽孢杆菌 68 . 2 %,巨大芽孢杆菌 () 63 . 6 %。分析发现 ,不同农作区的优势菌种种类及其检出率不同 ,与地理条件和耕作制度有一定 关系 。从产酶种类 、耐盐性 、产酸能力 、解磷能力等方面进行分析 ,部分菌株可以作为微生物酶制 剂 、微生物肥料生产的待选菌株 。 关键词 :芽孢杆菌属 ; 检出率 ; 土壤 ; 微生物肥料 () 中图分类号 : Q938 . 2文献标识码 : A 文章编号 : 1004 - 3268 200608 - 0067 - 05 Genus B aci l l us Reso urces of Soils in Henan Province L IU Xiu2hua , L IAN G Feng , L IU Yin , ZHA I Xing2li ()Depart ment of Biology , Shangqiu Normal College , Shangqiu 476000 , China Abstract : To detect t he reso urces of genus B aci l l us of t he soil samples in Henan p rovince , and to get a batch of bacterial st rains having potential applicatio n value , 415 st rains f ro m 22 soil samples were o b2 tained by means of t he separatio n p rocess of plain plate . Based o n t heir mo rp hological characteristics and p hysiological biochemical reactio ns , t he 415 st rains were belo ngs to 14 different species of B aci l l us acco rding to Bergey ’s Manual of Systematic Bacteriology , amo ng w hich , 3 species wit h higher ( ) ( ) ( ) checked o ut rate were B aci l l u . s ubt i l is 22 . 4 %, B . ce reu 16 . 1 %and B . m ycoi des 12 . 5 %, 5 ( ) species wit h mo re t han 60 % detectable rate f ro m all soils were B . m ycoi des 86 . 4 %, B . ce reus () () ( ) ( ) 81 . 8 %, B . s ubt i l is 77 . 3 %, B . f i r m us 68 %and B . m egate ri u m 63 %. The soils f ro m dif2 ferent f ar ming area had different do minant species. So me of t hese co uld be used as micro bial fertilizer and enzyme2p ro ducing st rains because of t heir multiple enzymes , high salt2enduring o r capacities of re2 leasing fixed p ho sp ho rus. Key words : B aci l l us ; Detectable rate ; Soil ; Micro bial fertilizer ( ) 芽孢杆菌属 B aci l l us ,苏云金芽孢杆菌 上生产淀粉酶 、蛋白酶的主要菌种 是一类好氧或兼性厌氧 、 产生抗逆性内生孢子的杆状细菌 。多数为腐生菌 ,用于生产生物农药 ,巨大芽孢杆菌能提高土壤有效 主要分布于土壤 、动植物体表及水体中 。由于芽孢 磷的含量等 。因此 ,了解芽孢杆菌属菌种资源的分 杆菌属的细菌可以产生多种有用代谢产物 ,芽孢又 布 ,寻找有益的原始菌株具有十分重要的理论意义 是菌体度过不良环境的休眠体 ,因此 ,在工 、农业生 和应用价值 。目前 ,国内对芽孢杆菌属的生态学研 产上有较高的应用价值 。例如枯草芽孢杆菌是工业 究主要集中在一些特殊菌种的分布或特殊地区的资 收稿日期 :2006 - 03 - 13 ()基金项目 :河南省教育厅自然科学基金项目 1999180026 () 作者简介 :刘秀花 1963 - ,女 ,河南新乡人 ,副教授 ,主要从事微生物应用研究工作 。 1 源分布 。李 荣 森 等在 1987 , 1989 年 对 云 南 、贵笔者依据河南省不同的地理环境 、气候条件和土壤 州 、四川 、陕西等西南四省的 26 个县土样中的苏云 2000 年 2 月集中采样 ,对河南省的芽孢杆菌 类型于 属的菌种资源进行调查 ,现将调查结果报道如下 。 金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌资源进行了调查 ,共获 90 株苏云金芽孢杆菌和 87 株球形芽孢杆菌 ; 戴顺 1 材料与方法 2 英等在 1992,1994 年开展了 12 个省土壤中苏云 金芽孢杆菌的资源研究 ,从 1 491 个土样中分离出 1 . 1 土样的采集 3 了 221 株苏云金芽孢杆菌 ; 石春芝等对神农架自 根据河南省的地理环境 、气候条件和土壤类型 ( ) 然保护 区 大 九 湖 芽 孢 杆 菌 资 源 进 行 调 查 , 共 获 得 确定从 22 个县 市采集土样 ,土样依次编号为 01 140 株纯培养 ,鉴定为 11 个种 。 河南省地处黄河中,22 。每个采样点选取土壤较肥沃 、有代表性的地 2 下游 ,自然条件优越 。年帄 块约 0 . 2 hm,五点法采集 。取 5 , 10 cm 深土壤 , 均气温 14 ?左右 ,年降雨量 600,1 200 mm ,四季分 每一个土样约 500 g 左右 。将土样放入无菌的纸袋 明 ,气候温和 , 土地肥沃 , 因此 , 微生物资源非常丰 中 ,并记录采集的时间 、地点 、植被类型 ,4 ?保存备 富 。目前 ,有关河南省微生物资源的调查未见报道 。 用 。土样来源及基本性质见表 1 。 表 1 土样来源及基本性质 ( )编号 采集点 植被 土壤性质 土壤 p H 值 采样时间 年 - 月 01 扶沟县固城乡鸭岗村 2000 - 02 麦田 壤土 6 . 5 浚县屯子乡董厂村 临颖县麦田 粘土 壤02 2000 - 02 6 . 7 巨陵乡韩庄村 淇县西岗乡麦田 土 粘土 03 2000 - 02 6 . 0 闫村 舞阳县太尉乡善德村 麦田 砂壤土 04 2000 - 02 6 . 5 鹤壁市鹤壁集东马驹河村 麦田 粘土 壤05 2000 - 02 5 . 5 长葛县大周镇新尚庄村 商麦田 土 壤土 城县汪桥乡 罗山县楠杆乡 麦田 粘土 壤06 2000 - 02 6 . 1 商丘市帄台乡 灵宝县焦村湿地 土 壤土 07 2000 - 02 6 . 3 乡 桐柏县渠江镇乡水湖流稻田 壤土偏粘 08 2000 - 02 6 . 5 村 新县浒湾乡徐湾村 嵩湿地 壤土偏粘 09 2000 - 02 6 . 0 县闫庄乡龙脖村 新安县北麦田 壤土偏粘 10 2000 - 02 6 . 7 治乡柴胡沟村 南乐县千口麦田 砂壤土 砂乡吕村 宜阳县董王庄乡东油菜 11 2000 - 02 6 . 7 官庄村 伊川县高山乡郑村 麦田 壤土 壤土12 2000 - 02 6 . 0 偃师县李村乡新民村 渑池麦田 偏粘 壤土 13 2000 - 02 5 . 8 县西阳乡张沟村 栾川县秋麦田 粘土 14 2000 - 02 6 . 2 扒乡蒿坪村 麦田 粘土 15 2000 - 02 6 . 0 林地 粘土 16 2000 - 02 6 . 2 麦田 菜田 壤土 17 2000 - 02 6 . 0 麦田 18 2000 - 02 6 . 3 19 2000 - 02 6 . 4 20 2000 - 02 6 . 0 6 . 1 21 2000 - 02 6 . 6 22 鹿邑县生铁乡代村 2000 - 02 麦田 1 . 2 芽孢杆菌属菌株的分离与纯化 , 菌体形态为直杆状 , 长度均 色 、质地 、透明度一致 称取土样 5 g 放入含有 45 ml 无菌水的三角瓶 一 、宽度一致 ,并能产生芽孢时 ,确认为芽孢杆菌属 4 中 ,摇匀 , 用小火加热至沸腾 , 维持 1 min 。静置 5 的纯培养物。转接于肉汤琼脂斜面保存待用 。 min ,吸取上清液 0 . 5 ml 加到含有 49 . 5 ml 无菌水 1 . 3 芽孢杆菌属菌株的鉴定 - 3 的三角瓶中 ,配成 10 g/ ml 的土壤悬液 ,并进一步 1 . 3 . 1 标准菌株 枯草芽孢杆菌 1 . 88 、地衣芽孢 - 4 - 5 杆菌 1 . 858 、蕈 状 芽 孢 杆 菌 1 . 856 、蜡 状 芽 孢 杆 菌 稀释至 10 g/ ml 和 10 g/ ml 。然后分别吸取不同 1 . 126 、巨大芽孢杆菌 1 . 275 、多粘芽孢杆菌 1 . 224 、 稀释度的土壤悬液 0 . 2 ml 涂布于肉汤琼脂帄板上 , 每个稀释度 3 个重复 ,30 ?倒置培养 2 d 。 短芽孢杆菌 1 . 931 。均来自中国微生物菌种保藏管 ( ) 每个土样随机挑取 20 个形态特征不同的单菌 理委员会普通微生物中心 C GMCC。 落 ,在肉汤琼脂帄板上划线纯化 。菌落的形状 、颜 1 . 3 . 2 形态学观测 ?革兰氏染色 菌体在斜面培养基上培养 18 ; 出土率是指检出某种 芽孢杆菌菌株总数的百分率 5 ,24 h ,革兰氏染色法染色,OL YM PU S 系统生物 芽孢杆菌土样数占总土样数的百分率 。表 2 显示 ,显微镜观察 。 在获得的 14 个菌种中 ,检出率较高的菌种依次为枯 () () ?芽孢染色 菌体在斜面培养基上培养 36 ,草芽孢杆菌 22 . 4 %,蜡状芽孢杆菌 16 . 1 %,蕈状 48 h ,涂片 ,干燥 ,置于染色架上 。将染色架置于 5 %() 芽孢杆菌 12 . 5 %。出土率较高的菌株依次为蕈状 孔雀石绿水溶液中沸水浴 ,初染 15 min 。然后置于() () 芽孢杆菌 86 . 4 %,蜡状芽孢杆菌 81 . 8 %,枯草芽 0 . 5 %蕃红水溶液中 , 复染 2 min 。水洗后晾干 , 使 () () 孢杆菌 77 . 3 %,坚强芽孢杆菌 68 . 2 %,巨大芽孢 用 OL YM PU S 系统生物显微镜观察 。 () 杆菌 63 . 6 %。蕈状芽孢杆菌出土率较高可能与其6 菌体大小测量采用显 微 测 微 尺 法。图 像 采 具有容易辨认的特殊的分支根状菌落形态有关 。因 集采 用 B X51 型 OL YM PU S 系 统 生 物 显 微 镜 和 为 ,每个土样随机挑取 20 个不同的菌落 ,而其他菌 D P12 型 OL YM PU S 数码照相系统 。种的菌落形态没有较明显的差异 。球形芽孢杆菌 、 主 要 进 行 以 下 生 理 试 1 . 3 . 3 生 理 生 化 试 验 蜂房芽孢杆菌 、侧孢芽孢杆菌的检出率较低 ,分别为 4 ,5 ,7 ,8 :过氧化氢酶试验 ; 需氧性试验 ; 乙酰甲基 验0 . 7 % ,1 %和 0 . 7 % 。其中 3 株球形芽孢杆菌分别 ( ) ( 甲醇试验 V . P 试验; 从碳水化合物产酸 包括葡 来自河南西部的灵宝县 、南部的商城县和北部的南 ) 萄糖产气试验 ;柠檬酸盐利用试验 ;酪素水解试验 ;乐县 , 3 株蜂房芽孢杆菌来自河南西部的偃师县和 淀粉水解试验 ; 酪氨酸水解试验 ; 苯丙氨酸脱氨试 ,3 株侧孢芽孢杆菌来自河南西部的灵宝县 、 伊川县 验 ;卵磷脂酶试验 ;明胶试验 ;丙酸盐利用试验 ;硝酸 南部的桐柏县 ,均为地形较复杂的山区丘陵地带 ,说 盐还原试验 ;产吲哚试验 ;从甘油产生二羟基丙酮试 明某些芽孢杆菌的分布可能与地理环境有关 。 验 ;在 p H5 . 7 的葡萄糖培养基中生长试验 ; 生长温 表 2 不同芽孢杆菌的检出率和出土率 度测定试验 ;溶菌酶抗性试验 ;耐盐性试验 。 检出 检出率 出土 出土率 代码 菌种名称 1 . 3 . 4 菌种鉴定 依据文献 8 所列举的芽孢杆菌 ( )( ) % % 数 数 属 34 个菌种的形态特征和生理生化特征 ,以标准菌 ( )B1 枯草芽孢杆菌 B . s ubt i lis 93 22 . 4 17 77 . 3 ( )B2 3 0 . 7 2 9 . 1 蜂房芽孢杆菌 B . al vei 株作对照 ,部分菌株鉴定参照文献 9 进行鉴定 。 ( )B3 17 4 . 1 7 31 . 8 短芽孢杆菌 B . brev is 1 . 3 . 5 蛋白酶活性测定 蛋白酶活性的测定方法( ) 蜡状芽孢杆菌 B . cereu s环状B4 67 16 . 1 18 81 . 8 ( ) 芽孢杆菌 B . ci rcul a ns凝结芽。酶 活 定 义 为 每 毫 升 发 酵 液 在 参 见 文 献 10 B5 34 8 . 2 12 54 . 5 ( ) 孢杆菌 B . coag ul a ns坚强芽孢B6 13 3 . 1 10 45 . 5 μ40 ?条件下 ,1 min 产生 1 g 的酪氨酸作为 1 个酶 ( ) 杆菌 B . f i r m us侧孢芽孢杆菌 B7 32 7 . 7 15 68 . 2 ( ) B . l ateros por us迟缓芽孢杆菌 活单位 。( )B . lent u s B8 4 1 2 9 . 1 8 1 . 9 8 36 . 4 B9 2 结果与分析 ( )34 8 . 2 13 59 . 1 B 10 地衣芽孢杆菌 B . licheni f or m is ( ) 26 6 . 3 14 63 . 6 B 11 巨大芽孢杆菌 B . megateri u m 本研究共采集土样 22 个 ,每个土样随机挑取形 52 12 . 5 19 86 . 4 ( )B 12 蕈状芽孢杆菌 B . m ycoi des 态特征有差异的菌落 20 个 ,划线分离纯化 。除个别 ( )29 7 13 59 . 1 B 13 短小芽孢杆菌 B . p u m i l us ( ) B 14 球形芽孢杆菌 B . s p h ne ric us3 0 . 7 3 13 . 6 菌株在培养中未发现芽孢 ,暂时不作为芽孢杆菌处 注 :菌株总数为 415 ,土样总数为 22 理外 ,共获得芽孢杆菌纯培养物 415 个 。经鉴定 ,它 2 . 2 不同地区的芽孢杆菌优势种 以河南省各地自们分别属于 14 种芽孢杆菌 。由于采用普通细菌培 然条件 、作物布局和耕作制度 养基 、中温 30 ?培养 ,所以有些有特殊生长要求的 11 的类似性 ,全省划分为 8 个一级农业区,依照本 芽孢菌没有得到分离的培养物 。比如 ,嗜热脂肪芽 次调查的特点 ,我们将其分成 4 个区域 。将各区检 孢杆菌 、谢氏芽孢杆菌和酸热芽孢杆菌等 40 ?以上 出率最高的菌种视为优势菌种 ,具体情况及芽孢杆才能正常生长 ,异常芽孢杆菌和马阔里芽孢杆菌在 菌优势菌种分布见表 3 。10 ?以上不能正常生长 ,苛求芽孢杆菌 、海生芽孢 由于地理环境条件的差异 ,优势菌种种类略有 杆菌等需要特殊的培养基 。所以 ,在本次报道中未 差异 。其中西部和南部地区的优势菌种均为枯草芽 涉及到这些菌种 。本研究获得的菌种都是中温生长 孢杆菌 ,检出率分别为 31 . 8 %和 30 . 9 % ,超过全省 的芽孢杆菌 。( ) 同种菌的检出率 22 . 4 %近 10 个百分点 。东部地 2 . 1 不同芽孢杆菌的检出率和出土率 检出率是指区为黄淮海冲积帄原 ,优势菌种为蜡状芽孢杆菌 ,检 某种芽孢杆菌检出的菌株数占检出 ( ) 种菌的检出率 22 . 4 %,而地衣芽孢杆菌的检出率 出率 为 18 . 6 % , 略 高 于 全 省 同 种 菌 的 检 出 率 () ( ) 16 . 1 %。北部地区以黄灌区为主 ,部分为山区 ,优 8 . 2 %10 个百分点 。 却高于全省同种菌的检出率 势菌种为枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌 ,检出率均 从各区出现的菌种种类数来看 ,最少的地区也出现 为 18 . 2 % ,其中枯草芽孢杆菌的检出率低于全省同 1 1种菌种 ,可见各区出现的菌种种类数差别不大 , 表 3 不同区域土样检出芽孢杆菌的优势菌种及所占比例 优势菌种及其所占百分比 区域 包含农业区 主要土壤类型 包括的采样点 菌株数/ 土样数 检出菌种种类数 ( )% 豫东帄原粮 、果 、药 、杂区 ,淮北帄 01 、03 、05 、07 、 113/ 6 11 东部 壤土 蜡状芽孢杆菌 ,18 . 6 10 、22 原粮 、豆 、芝麻区豫西丘陵粮 、烟 、果区 , 豫西山 地 11 、14 、15 、17 、157/ 8 14 西部 壤土 、粘土 枯草芽孢杆菌 ,31 . 8 粮 、果 、药 、杂区 淮南山丘垄岗稻 、18 、19 、20 、21 麦 、麻 、茶区 ,南 阳盆地粮 、油 、棉 、08 、09 、12 、13 烟 、柞蚕区 太行山粮 、果 、药 、杂南部 壤土 、粘土 枯草芽孢杆菌 ,30 . 9 68/ 4 12 区 ,豫北山前 帄原粮 、棉 、药区 枯草芽孢杆菌 ,18 . 2 ; 北部 粘土 02 、04 、06 、16 77/ 4 12 地衣芽孢杆菌 ,18 . 2 这是由于芽孢杆菌都能产生抗逆性芽孢造成的 。 而在东 部 地 区 大 约 只 有 7 %左 右 。蜡 样 芽 孢 杆 菌 () B4的情况是西部和东部地区的检出率在 20 %左 从图 1 可以看出 ,枯草芽孢杆菌 、蜡样芽孢杆菌 右 , 而 在 南 部 地 区 仅 有 7 % 左 右 。蕈 状 芽 孢 杆 菌 和蕈状芽孢杆菌这 3 种检出率较高的菌种在不同的 () B12在西部地区的检出率是 8 %左右 ,而其他地区 地区都有较高的检出率 。但是 ,同一菌种在不同的 的检出率为 15 %左右 。可以看出 ,不同地理环境因 () 地区检出率差别较明显 。比如 ,枯草芽孢杆菌 B1素对同一种菌的数量的影响较大 ,而且 ,对不同菌种 在西部地区和南部地区的检出率均达到 30 %以上 , 图 1 不同芽孢杆菌在不同区域的检出率 的影响程度也是不同的 。 ,因此可以初步评价菌体的产酶性能 、耐盐性和解 径 一些检出率较低的菌种 , 例如 , 蜂房芽孢杆菌 磷能力 。用酪素水解试验 、淀粉水解试验 、酪氨酸水 () () () B2、侧孢芽孢杆菌 B8和球形芽孢杆菌 B14,它 解试验 、苯丙氨酸脱氨试验和产吲哚试验分别评价 们都属于昆虫致病菌 ,所以在土壤中的检出率较低 。 菌体的蛋白酶 、淀粉酶 、酪氨酸酶 、苯丙氨酸酶和色 这些菌种主要来自以山地和丘陵为主的西部和南部 氨酸酶的产酶能力 。用耐盐性试验评价菌体的耐盐 地区 ,这些地区植被类型多样 ,芽孢杆菌种类资源相 对丰富 ,所以才得以检出 。因此 ,要获得更多的昆虫 ( ) 性 ,用碳水化合物产酸 包括葡萄糖产气试验评价 致病性芽孢杆菌 , 仅从土壤中分离显然是不够的 。 菌体的无机磷解磷能力 ,用卵磷脂酶试验评价菌体 若收集昆虫尸体用于这些菌的分离 ,可能会得到更 的有机磷解磷能力 。统计获得的 415 个菌株的产酶 高的检出率 。 性能 、耐盐性和解磷能力的相关试验结果见表 4 。 2 . 3 检出菌株的生化性能分析和应用潜力评价 由2 . 3 . 1 菌株产酶性能分析 从表 4 可以看出 ,能够 于在菌种鉴定过程中 ,涉及到多项的生理生 明显产生胞外蛋白酶的菌株有 362 株 ,阳性率达到 化试验 ,而这些试验的原理基于菌体特定的代谢途87 . 23 % ,说明绝大部分土著芽孢杆菌具有分解蛋白 质的能力 。对 362 株产生胞外蛋白酶的菌株进行常 规摇瓶发酵和酶活测定 ,其中有 112 株菌的蛋白酶 等也各有一定优势 。说明优势菌种的分布与地理条 件 、耕作方式等有一定的关系 。活性超过 300 U ,说明获得的菌株资源具有较好的开 从分离到的菌种中 ,获得了相当一批有价值的 发潜能 。这其中有 28 株能在 p H 5 . 7 的情况下生长 菌种和大量实验数据 ,从产酶性能 、耐盐性 、产酸能 良好 ,为研究和开发蛋白酶提供了很好的菌种来源 。 力 、解磷能力等方面进行分析 ,部分菌株可以作为微表 4 415 株芽孢杆菌的部分生理生化试验结果 生物肥料 、微生物酶制剂生产的初选菌株 。另外 ,在 ( )试验项目 阳性菌株数 阳性菌株百分率 % 对蕈状芽孢杆菌进行生理指标测试时发现 ,这种芽 淀粉水解试验 292 70 . 36 酪素水解试验 卵磷362 87 . 23 孢杆菌生长速度快 ,部分菌株分解卵磷脂能力较强 , 脂酶试验 酪氨酸水285 68 . 67 解试验 苯丙氨酸脱而且产蛋白酶和脂肪酶的能力也较高 ,因此 ,该菌有 221 53 . 25 氨试验 吲哚试验 可能作为复合酶制剂生产菌的良好出发菌株 。关于 29 6 . 99 ( )耐盐性试验 7 % 285 68 . 67 55 ?以上生长 葡蕈状芽孢杆菌的生理研究和应用的系统研究目前报 237 57 . 11 萄糖产酸试验 道较少 ,我们将对部分菌株进行一些诱变处理 ,以期 49 11 . 81 获得高产优良的生产用菌种 。 308 74 . 22 本研究较全面地调查了河南省土壤中的芽孢杆 () 另外 ,也有较多的菌株 292具有产淀粉酶的能 菌的资源状况 ,不同地区的自然条件差异明显 ,分离 力 ,达到总菌株数的 70 . 36 % 。能够产生酪氨酸水 的菌种数目和种类较多 ,具一定的代表性 。前人主 解酶 、苯丙氨酸水解酶和色氨酸水解酶的菌株数分 要分离个别种类的芽孢杆菌 ,主要是一些昆虫致病 别达到 53 . 25 % , 6 . 99 %和 68 . 67 % 。可见 ,分离到 1 ,2 菌 ,而我们分离到的芽孢杆菌主要用于微生物 的芽孢杆菌也可用于淀粉酶和这些氨基酸水解酶的 肥料和酶制剂生产的菌种筛选 。生产菌株的筛选 。 参考文献 : 2 . 3 . 2 解磷菌株性能分析 415 株菌中产生卵磷 脂酶的 285 个 ,阳性率为 68 . 67 % ,表明多数菌株具 1 李荣森 ,戴顺英 ,李小刚 ,等 . 我国部分地区土壤中苏云 有利用有机磷的能力 。对利用葡萄糖产酸的 308 株 金芽孢杆菌和球形芽孢杆菌 J . 微生物学报 ,1990 ,30 () ( ) 5:380 - 388 . 菌采 用 CaPO帄 板 法 检 测 无 机 磷 利 用 能 力 。3 4 2 戴顺英 ,高梅影 ,李小刚 ,等 . 我国南北方土壤中苏云金 2 32 ?培养 3 d ,能产生明显透明圈的 83 株 ,其中透 芽孢杆菌分 布 及 杀 虫 特 点 J . 微 生 物 学 报 , 1996 , 36 明圈直径大于 12 mm 的菌株 16 株 。其中 ,巨大芽 () 4:195 - 362 . 孢杆菌占 9 株 ,蜡状芽孢杆菌占 4 株 ,以及 3 株蕈状3 石春芝 ,陶天申 ,岳莹玉. 神农架自然保护区大九湖芽 芽孢杆菌 。巨大芽孢杆菌的 16 ,10 号菌株无机磷 ( ) 孢杆菌资源调查 J . 氨基酸与生物资源 ,2001 ,23 1: 1 - 4 . 透明圈直径达到 23 mm ,是较理想的生产微生物肥 4 宋大新 , 范长胜 , 徐德强 , 等 . 微 生 物 学 实 验 技 术 教 程料的初选菌株 。 M . 上海 :复旦大学出版社 ,1993 . 209 - 252 . 2 . 3 . 3 耐盐性能分析 芽孢杆菌的营养细胞能够 5 张纪忠. 微 生 物 分 类 学 M . 上 海 : 复 旦 大 学 出 版 社 ,在 7 %的 NaCl 溶液中良好生长的阳性率 57 . 21 % 。 1990 . 44 - 45 ,62 - 109 . 这说明多数芽孢杆菌能够在高渗透压的环境中生 6 范秀容 ,李广武 , 沈萍 , 等 . 微生物学实验 M . 北京 : 高等教育出版社 ,1992 .存 。这些耐盐碱微生物的存在 ,将有助于盐碱地的 东秀珠 ,蔡妙英 . 常见细菌系统鉴定手册 M . 北京 :科 7 改良 。 学出版社 ,2001 . 43 - 65 . 8 Bergey’s Manual Trust . Bergey’s Manual of Systematic 3 小结 ( ) Bacteriology 2nd ed. M . New Yor k : S p ringer - 河南省土壤中的芽孢杆菌分布广泛 ,菌种资源 Verlag , 2001 . 9 Gardo n R E , Haymes W C , Pang C N . The Genus Bacillus 较丰富 ,枯草芽孢杆菌 、蜡状芽孢杆菌和蕈状芽孢杆 M . Washin gto n D C : Agricult ural Research Service , 菌为优势菌种 。不同地区优势菌种分布有些差异 , U nited States Depart ment of Agricult ure ,1973 . 西部地区以枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌为主 ,南 10 王秀奇 ,秦淑媛 ,高天慧 ,等 . 基础生物化学实验 M . 部以枯草芽孢杆菌和蕈状芽孢杆菌为主 ,东部和北 北京 :高等教育出版社 ,1997 . 177 - 180 . 河南地方史 11 部地区不同的采样点优势菌种各不相同 。巨大芽孢 志办公室. 河南省志 农业志 M . 郑州 : 河南人民出版社 ,1993 . 杆菌 、环状芽孢杆菌 、枯草芽孢杆菌 、蜡状芽孢杆菌
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