癌胚抗原试剂　

癌胚抗原试剂　 癌胚抗原试剂 概述 癌胚抗原(CEA)是一种肿瘤相关抗原，由Gold和Freemn于1965年首次提出，该抗原为一糖蛋白，B电泳测得分子量200000由一单链蛋白(约800个氨基酸)及糖测链组成，糖量部分占总分子量的50%到80%。 Thompson等发展的放免(RIA)可以检测到在循环血和其它体液以及正常和病态组织中非常低的CEA浓度。两年后，Hansen等对RIA测定CEA做了改进。近年来，敏感而相对简便的CEA酶免法已被采用。 CEA首先被认为是结肠腺癌的一特异抗原。更新的研究表明CEA存在于许多胃肠或肺等来源于外胚层组织的癌细胞中，结肠粘膜分泌物中也报道有少量CEA。另外在非黄疸病人正常胆汁中报道有CEA类似物质。 CEA检测对于监测治疗后伴有血循环CEA持续升高的病人具有重要价值，高CEA浓度预示有潜伏的癌细胞转移或残留。CEA值持续升高可能与发展性癌症和不良治疗反映相关。CEA值下降通常表示预后和治疗反映良好。 CEA测定用于临床上对患有结肠，乳腺，肺，前列腺，胰腺，卵巢及其它组织肿瘤的病人的随访管理。对患有结直肠，乳腺癌，肺癌病人的随访研究提示术前CEA水平有预后作用。 原理 微孔CEA酶免法为基于夹心法原理的固相酶联免疫检测。包被有抗CEA的微孔与标本(或适当的品或质控)和酶标抗体溶液一起温育。若标本中有CEA抗原，则抗CEACEA抗体一辣根过氧化物酶结合物CEA抗原结合微孔上形成抗体-抗原-抗体复合物，未结合的酶结合物洗涤除去。然后，抗原-抗体复合物与酶底物溶液(过氧化氢和TMB)保温产生颜色。加入IN硫酸终止酶反应。用酶标仪在450nm读记吸光度与在测定工作范围内的标本CEA浓度成正比。 试剂组成 1、 CEA包被微孔板:1块。 2、 CEA酶结合物:1瓶。 3、 显色A、B:各1瓶。 4、 CEA标准品:7瓶，浓度分为:0，4，10，30，60，120，240ng/ml。 5、 终止液:1瓶。 6、 浓缩洗涤液:1瓶，使用时1:10倍稀释。 操作步骤 1、 每次试验应有一孔作为空白对照，调节酶标阅读仪的零点用。 2、 反应板分别加入CEA标准品，各50ul，第一孔作为空白，其余各孔加入待测血清50ul， 各孔内加酶结合物50ul，置37?温育1小时。 3、 弃去孔中液体，用洗涤液洗涤五次，拍干。 4、 加显色液A、B，每孔1滴，室温下显色15分钟。 5、 每孔加1滴终止液反应，在450nm波长下测量各孔OD值。 结果计算 以CEA标准抗原含量为横坐标，以其相应的OD值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，以测定的孔的光密度在标准曲线上查出相应样品的CEA含量，如待测血清OD值大于标准抗原240ng/ml,可将血清稀释后再进行测定. 结果判断 临床上CEA值低于15ng/ml为健康人，95%的正常人血清值低于5ng/ml，吸烟者的CEA值稍 高，但很少高于7.5ng/ml如CEA值高于15ng/ml,则判为异常,根据临床诊断标准,进行判断. 注意事项 1. 本试剂盒保存于2-8?，有效期6个月。 2. 不同批号试剂严禁混合使用。 3. 使用器皿必须清洁，蒸馏水需新鲜配制。 4. 洗涤时应严格按操作要求进行，洗涤后必须拍干。 预期值 正常人群 N 0-4ng/ml 4-10ng/ml ,100ng/ml 1、不吸烟人160 99.3% 0.62% 0.00% 2、吸烟者 50 72.00% 15.00% 13.00% 敏感度 敏感度为1.0ng/ml 质控血清参考值: L-I=10.0(8.0-12.0) L-II=60.0(48.0-72.0)