血管壁的结构.doc

血管壁的结构.doc 动的动特点脉构 内内内内内内膜由皮、皮下动、动性膜动成。皮下动位于皮之外～动动薄的疏 松动动动动～含少量平滑肌动动。动性膜由动性蛋白成～动性膜上有动多小孔。内内构 在中动的切面上～因血管壁收动～使动性膜呈波浪～可做动、中膜的脉横内状内 分界动 ～中膜动厚～主要由10,40动平滑肌动成～故肌性动～在平滑肌之动有称脉 少量动性动动和原动动。平滑肌动动的舒动可控制管的大小～动动器官的血流量。胶径 此外平滑肌动动具有动生动动动动和基动的功能～外膜厚度中膜相近～由疏松动动动动动与 成。在外膜中膜交界动有外动性膜相隔～外膜中有小血管、淋巴管神动分布。与 中膜增生,media hyperplasia 内膜增生,intimal hyperplasia 波生坦动大鼠动动再窄的影及其病理机制脉狭响 动表动动,2010-7-1 9:48:43 来医学网荐源,动新推 　　作者,桂平 动彦动 付 李动 曲动 王动非 作者动位,沈院沈洲院心血管科～动 沈 吴鑫婷阳医学医内宁阳110002 　　【摘要】目的 探动波生坦动大鼠动动再窄的影及其病理机制。方法 动取脉狭响Wistar大鼠65只～机分动假手动动、动动动及随 波生坦动。动动动及波生坦动模动动床动皮冠动动形成动状脉(PTCA)动程行左动动动球囊动动致膜落～波生坦动动予波生坦脉内剥100 mg?kg- 1?d-1灌胃(动前1 d直至动死)。动动动后不同动相点的膜～中膜动动增殖情～采用免疫动化法动动内况并α,平滑肌肌动蛋白(αSMA), 和抗增殖动胞核抗原(PCNA)。动果 动动动动后28 d新生膜增生峰动～波生坦动动后内达14 d内达膜增生峰动。动后14、28、45 d波 生坦动膜面动动动动动明动小内减(P<0.001)。动后14 d的波生坦动膜内PCNA的性率动动动比动动著降低阳与(P<0.01)。动后14 d αactin, 的性表率动动动动明动增加阳达(P<0.01)。动动 波生坦动可通动抑制血管膜动度增殖及少血管平滑肌动胞的增殖～动型和移而有内减迁 效动防PTCA动后再窄的动生。狭 　　【动动动】 波生坦;再窄狭;动成形动脉;血管平滑肌动胞;大鼠 　　Effect and pathogenetic study of Bosentan on carotid artery restenosis in rat　　WU GuiPing, ZHANG YanHong, FU Xin, et al.,, 　　Department of Cardiology, Shenzhou Hospital, Shenyang Medical College, Shenyang 110002, Liaoning, China 　　【Abstract】 Objective To investigate the effect and pathogenetic study of Bosentan on carotid artery restenosis in rat. Methods 65 Wistar rats were divided randomly into 3 groups: sham, injury and Bosentan groups. The balloon catheter injury was performed on left common carotid artery of rat by imitating the process of percutaneous transcoronary angioplasty (PTCA) in injury and Bosentan groups. 100 mg?kg-1?d-1 Bosentan was administrated intragastricly to rats of Bosentan group (from 1 day to being killed). The process of neointimal and media hyperplasia was observed and αactin and proliferation cell nuclear antigen (PCNA), expressions were determined. Results Arterial neointima hyperplasia reached summit at 28 days in injury group and at 14 days in Bosentan group. Neointimal and media area of Bostentan at different time (14th ,28th ,45th day) were significantly decreased compared with injury group (P<0.001). The positive rate of PCNA increased statistically in Bosentan group than that of injury group at 14th day (P<0.01). The positive rat of αactin cell increased significantly in Bosentan group compared with injured group, (P<0.01) at 14th day. Conclusions Bosentan can effectively prevent artery restenosis by inhibiting neointimal hyperplasia and reducing the proliferation, migration, transconformation of vascular smooth muscle cells.　　【Key words】 Bosentan; Restenosis; Angioplasty; Vascular smooth muscle cell; Rat　　动皮冠动介入治动冠心病血管重建治动的动后再窄动生率仍动高～而影了治动效果～因而探动再窄的防治成动动前状脉狭从响狭当 冠心病防治究的动点。再窄的形成是一动动的病理生理动程～其主要的机制动动动动血管腔炎症反动～血管皮动动动动的血管研狭个脉内 重和血管平滑肌动胞的动度增殖移〔构与迁1〕。皮素内(ET)是由皮动胞合成～具有强大的动血管和促动血管平滑肌动胞的作用内。 波生坦是一动非动动非动动性皮素受阻动。动于波生坦动大鼠动动再窄的影的究外无动道。本动动通动动察波生坦动内体断脉狭响研国内尚 大鼠动动再窄的影究其病理机制～动冠动成形动动后再动窄的防治提供新的思路。脉狭响并研状脉狭 　　1 材料方法与 　　1.1 动动动物 　　健康雄性Wistar大鼠65只～重体330,460 g～动自中科大动动动物室。国医学 　　1.2 动动动动、动品器材与 　　?波生坦(商品名,全可利片),动自动克泰隆动品公司。?2F动皮冠动动成形动状脉(PTCA)球囊动管(1.5 mm×20 mm)～动自Cordis 公司。?抗增殖动胞核抗原(PCNA)动抗(福建动新)。?抗α,平滑肌肌动蛋白(αSMA),动抗(上海动动生物公司)。?免疫动化SP动动盒(福建动新)。?伊文氏动。?DAB动色动动盒(北京中科生物技动有限公司)。 　　1.3 分动、动物干动模型制动与 　　健康雄性Wistar大鼠65只～机分动假手动动随15只～动动动25只～波生坦动25只～波生坦动大鼠自动前1天直至动死予波生坦100 mg?kg-1?d-1灌胃～假手动动和动动动动予等量蒸动水灌胃直至动死。参照Clowes〔2〕方法动动动动波生坦动动动大鼠将与禁食8 h后～腹腔注射戊巴比妥动麻醉～尾注射肝静脉素100 U/kg～沿中动切动动部皮动～在动前三角暴露区脉内脉离左动动动、动及动外动～动动分动外动～动动外动动脉扎脉断脉段～用动动动动阻动动动近心脉端血流～自动外动动血管壁剪一“V”形小切口～置入动动至近并插膈肌水平～沿动动送入PTCA球囊动管至动动动动脉3 cm～肝素动水充盈球囊～予152 kPa动力动动30 s～动慢回抽球囊至动动分脉叉动～重动3次剥脱内扎脉脉内脉与青霉膜～动动外动近段～动看动动动及动动搏动良好后动合皮下动动皮动。动后常动肌注素40 U/d～共3 d～动防感染。假手动动动暴露分左动动～动～动外动～动合皮下动动及皮动～离内脉随即喂食普通动料～自由动水。　　1.4 取材 　　动后1、7、14、28、45 d分批取材～首先动尾注射静脉5%伊文氏动生理动,水动动无膜内覆盖血管。30 min后用4%多聚甲动以13.3 kPa动行灌注固定～解剖游并离脉脉区温蜡并左右动动动动～切取左动动动动中段动染～共同行低石垂直定向包埋～以5 μm厚度切片～常动HE 染色。 　　1.5 免疫动动化法动动学定量 　　平滑肌动胞(VSMC)的增殖 分动以抗αSMA,,抗PCNA抗动行免疫动化体染色动动VSMC～增殖动胞～采用SP法动行免疫动动化法染色。 　　1.6 动壁膜、中膜面动的动量脉内 　　按照动动分～膜动学划内内内内力膜以动血管膜～外动力膜之动动中膜。在5×物动下将横完整的血管切面HE 染色动像动入动算动像系动中(江动捷达动像分析动件)～分动动量血管膜面动～机动取动动内随脉染段3个切面分析～取平均动。同动采用动算机动像分析系动动定内数膜、中膜动胞动及PCNA染色性动胞～动阳数算14 d内阳膜、中膜增殖动胞性率。 　　1.7 动动动理学 　　采用动动动学件包SPSS11.0～数据以x?s表示。动动比动采用t动动～自身前后比动采用动照t动动。 　　2 动 果 　　2.1 一般状况 　　65只大鼠分动因动中呼吸动停死亡2例～动后出血死亡1例～入球囊致动插脉断裂未完成造模2例～60只大鼠成功建模～假手动动15只～动动动22只～波生坦动23只。 　　2.2 动后动壁动动增生的动动及膜面动比动脉内 　　光动下～动后1 d～正常大鼠动动膜动动动皮动胞～中膜动动形脉内内状排列波浪动性膜和平滑肌动胞动成～球囊动动后1 d动膜脉内剥脱～球囊动动后7 d可动新生膜形成～中膜内亦有所增厚～动后14 d动动动膜动动增厚～至内28 d内达内膜增生高峰～此后膜有动小动动～但差异不动著～中膜动化不明动～而波生坦动动后14 d内达内膜增生高峰动～波生坦动增生膜面动在动后14、28、45 d与动动动比动～差异动著(P<0.01)～动表1～动1。表1 不同动动血管膜面动比动内(略) 　　2.3 动后各动血管壁PCNA阳性动胞的动化 　　动后7 d假手动动无PCNA阳两内性动胞～其他动新生膜可动少量PCNA阳性动胞～而中膜可动大量PCNA阳性动胞～动后14 d动动动新生膜可动大量内PCNA阳性动胞～而波生坦动PCNA阳性动胞动7 d增加～但动动动动明动少减(P<0.01)～动表2。动后14 d～动中两膜PCNA阳减性动胞少～动表2～动2。动动动比动波生坦动与PCNA阳减异性动胞少有动著差(P<0.01)。 　　2.3 动后各血管壁平滑肌αSMA,表情达况 　　假手动动血管壁平滑肌αSMA,几达内阳达乎无表。动后动动动和波生坦动动后膜及中膜均呈少量性表～动后14 d～αSMA,阳达性表动前增加～28 d后动化不明动～动后14 d波生坦αSMA,阳达异性表率动动动动增加有动著差(P<0.01)～表2～动2。表2 动后14 d各动血管PCNA和αSMA,表比动达(略) 　　3 动 动 　　冠介入治动动后再窄的动生是动动的病理生理动程～是血管脉狭内构局部动动后所动生的一动修动反动～其中血管皮动动动动的血管重和血管平滑肌动胞动度增殖和移是动致迁PTCA动后再窄的主要病理基动〔狭2〕。 　　皮素具有强内氧脉状烈的动血管作用和促动血管平滑肌增生的作用～在缺、动激、动粥动硬化、高血动等病理动下ET1,水平动著升高〔3〕,PTCA动程中有不同程度的皮动动～会内剥脱与Wang等〔4〕动动～大鼠动动球囊形成动后脉 ET1,、ET3,、ETA及ETB mRNA存在动动依动性增高。目前已有相动究表明研PTCA动后血动ET动度升高～且局部升高更动明动〔5〕～再窄的动生率狭随伴着ET及其受表的增多～体达所以有理由动动抑制ET受可体减狭以少再窄的动生。　　本动动通动建立大鼠动动球囊动动模型～动动动动后不同动脉脉响脉期血管的增生以及波生坦动其影动行了动动的动察。在动后动壁动动增生方面～球囊动动后7 d即内可动新生膜增生形成～动后14 d动动动、波生坦动膜动动增厚～至内28 d动动动新生膜增生高峰。动床内达PTCA动后患者血管再窄动生动动主要在动后狭3,6个月～4个内月动占50%〔6〕～动一动律与脉内在动动中大鼠动动动动模型动后膜增生有着相同的动动～提即尽内狭示动早通动抑制膜的增生以降低再窄的动生动展。波生坦动在动动动后7、14、28及45 d增生膜面动内与减动动动比动明动少～且波生坦动动后14 d动膜增生已达脉内峰动～提示波生坦动动动动具有明动的抑制膜增生的作用。　　PCNA是一动动胞增殖有动的 与参与DNA合成的核蛋白～是动能在增殖动胞中合成和表的核多动动。因此～达内PCNA的合成及表动胞的增殖动～分化达与状活动程度密切相动～是反映动胞增殖功能的敏感的动动指动〔7～8〕。本动动动明动动动后脉7 d新生 内即膜及中膜有PCNA阳性动胞～至动后14 d新生膜内PCNA阳性动胞动一步大量增加～但波生坦动在动后14 d内膜、中膜动胞增殖率动动动动动著少～提减即示波生坦可在动后早期动血管壁平滑肌动胞增殖具有抑制作用。 　　VSMC是一动多功能性动动胞～其功能主要是通动收动和松叶来来弛动持血管壁的动力～通动增生和动胞外基动合成动持血管完整性。VSMC增殖、移迁内体最动动致新生膜形成。在人动育动程中～VSCM具有动表型～收动型和合成型。血管壁动生动动动两当 VSCM即由收动型向合成型动生逆向动化～VSMC表型动化是PTCA动后再窄～动狭脉学粥动硬化血管重塑的共同病理基动。αSMA,是VSMC表型动化的敏感指动～其表少动达减志着动胞由收动型向合成增殖型动化〔9〕～PTCA动后皮动胞受动～动中机内械性刺激加之生动因子共同作用～动中膜脉静止的VSMC原癌基因被激活～动生去分化～由高分化非增殖型收动表型向低分化增殖型合成表型动动～向血管膜移～增殖分内迁并内狭泌动胞外基动～形成动度增殖的新生膜～动致管腔窄。本动动动动动后7 d～动动血管膜～中膜内αSMA,均呈动性表～动后阳达14 d动动血管αSMA,阳达达性表大量增加～波生坦动动动动动表明动增加～提示波生坦能有效抑制平滑肌动胞由收动型向增殖型动化～少新生膜的形成。减内 　　动上～本动动动动波生坦通动抑制动脉内减迁粥动新生膜的动度增殖～少血管平滑肌动胞的增殖～动型及移～可有效动防PTCA动后再窄～狭将脉如果相动大动模动床动动最动动动动作用～有助于提高冠介入动的动效。 　　【参献考文】 　　1 Holvoet P, Sinnaeve P. Angioassociated migratory cell protein and smooth muscle cell migration in development of, restenosis and atherosclerosis〔J〕.J Am Coll Cardiol,2008;52(4):3124., 　　2 Miyauchi T～Masaki T.Pathophysiology of endothelium in cardiovascular system〔J〕.Annu Rev Physiol～1999;61:391415., 　　3 Forrester JS～Fishbein M～Helfant R,et al.A paradigm for restenosis based on cell biology,clues for the development of new preventive therapies〔J〕. 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