重组人干扰素α-2b软膏透皮试验研究

重组人干扰素α-2b软膏透皮试验研究 重组人干扰素α-2b软膏透皮试验研究 药物研究2007年第l6卷第l4期 重组人干扰素0【一2b软膏透皮试验研究 王忠,杨宝峰 (1.哈药集团生物有限公司,黑龙江哈尔滨150020;2.哈尔滨医科大学药理教研 室,黑龙江哈尔滨150086) 摘要:目的考察不同透皮吸收促进剂对重组人干扰素一2b软膏透皮吸收的促进效 果.方法采用单室水平扩散池,计时2h后从接受室 内取样,用细胞病变抑制法测定透过Swiss小鼠腹部皮肤的干扰素的活性.结果在 软膏中加入透皮吸收促进剂能明显改善透皮吸收.且以 2%水溶性氮酮和2%1,2一丙二醇联合应用的效果最好.结论2%水溶性氮酮和 2%1,2一丙二醇联用,提高了药物生物利用度和疗效. 关键词:重组人干扰素一2b软膏;透皮试验;透皮吸收促进剂 中图分类号:R965.1;R986文献标识码:A文章编号:1006—4931(2007)14—0030— 02 StudyofTransdermalAbsorptionTestofRecombinantHuman仅一2bInterferonOintment WangZhong,Baof~,,d (』.HaerbinPharmaceuticalGroupBioproductCo.,LTD.,Haerbin,Heilongfiang,China15 0020; 2.DepartmentofPharmacology,HarbinMedwineUniversity,Haerbin,Heilongfiang,Chin a150086) Abstract:0bjectiveToevaluatetheeffectsofseveralpenetrationenhancersforrecombinanth uman一2binterferonointmentMethods SinglehorizontaldiffusioncellwasadoptedastheapparatusforSwiss— miceabdomenskinpenetrationinvitro,Frombeginingto2h,the samplefetchedfromreceivingcellweremeasuredactivityofinterferonwiththewayofcytopa thogeniceffect.ResultsTheointmentsadded penetrationenhancershadobiviouslyimprovementintransdermalabsorptionthanthosenot added.ConclusionCombinedapplicationof2% aqueoussolubleazoneand2%1.2一propyleneglycolhascoordinativeeffectandincreasesthebioavailabilityandcurativeeffect ofthe ointment. Keywords:recombinanthuman一2binterferon;transdermalabsorptiontest;penetrationenhancer 重组人干扰素一2b软膏具有广谱抗病毒,抑制细胞增殖等 作用,能增强巨噬细胞的吞噬功能,增强细胞毒T细胞的杀伤作用 和天然杀伤性细胞的功能,主要用于治疗由人乳头状瘤病毒引起 的尖锐湿疣,也可用于治疗由单纯性疱疹病毒引起的口唇疱疹及 生殖器疱疹….干扰素是由160多个氨基酸组成的蛋白质,为大分 子物质,在透皮吸收方面会影响药物的吸收,进而影响药物的生物 利用度和疗效.本研究考察不同透皮吸收促进剂对重组人干扰素 一 2b软膏透皮吸收的促进效果,旨在优化工艺,确定最佳处方, 保证药物的疗效. 1材料与方法 1.1仪器,试药与动物 由水平扩散池组成的体外透皮扩散装置(中国科学院上海有 机化学研究所玻璃仪器厂);79HW一1型恒温磁力搅拌器(浙江 乐成电器厂);CS501型超级恒温器(重庆试验设备厂);MCD一 15AC型二氧化碳培养箱(SANYO);BNO2248型酶标仪(Molecular Devices);SW—CJ一2FD型洁净工作台(上海博迅实业有限公司医 疗设备厂);弯头的注射器(取样用).十二烷基硫酸钠(哈尔滨市化 学试剂厂);1,2一丙二醇(哈尔滨金丽化工试剂有限公司);水溶性 氮酮(广州精细化学工业公司);wish细胞株,水疱性口炎病毒(VSV 病毒),均由中国药品生物制品检定所提供;DMEM细胞培养液,胰 蛋白酶一EDTA,胎牛血清(GIBCO生产);人血白蛋白(河南中泰药 业有限公司);羧甲基纤维素钠(淮南山河药用辅料有限公司);一 水合枸橼酸,二水合枸橼酸钠(北京益力精细化学公司).Swiss小 鼠,雌雄兼用,体重(20?2)g(哈尔滨制药总厂实验动物中心),动 物合格证编号为SCXK(黑)2003—0001. 1.2样品处方及制备方法 丙三醇600g,羧甲基纤维素钠20g,透皮吸收促进剂适量,20% 人血白蛋白15mL_重组人干扰素一2b原液0.5mL(5.0×10IU), 柠檬酸缓冲液(0.4mol/L,pH=5.0)约350mL,总计1000g. 先将羧甲基纤维素钠用丙三醇分散,搅拌,混合均匀后,加入 透皮吸收促进剂及部分柠檬酸缓冲液,继续搅拌2min,加入人血 ? 30? 白蛋白与重组人干扰素一2b原液混合及剩余部分柠檬酸缓冲 液,低速搅拌,10min后成均匀,细腻,增稠的膏体即可. 1.3小鼠离体皮肤制备… 脱臼处死小鼠,用手术剪子将小鼠颈部皮肤剪开,然后将小鼠 背部皮肤剪开,将小鼠外皮剥下,内皮紧贴在干净的玻璃板上,将 8%的硫化钠适量滴于小鼠外皮毛上,放置几分钟后外皮毛溶解 掉,用手术刀片将皮毛刮净(但不要破坏角质层),用纯化水将脱毛 后的皮肤冲洗干净,将内皮层脂肪组织刮净(但不要破坏真皮组 织),再冲洗干净,根据水平扩散池的面积大小,剪取面积大小适宜 的腹部皮肤,放人生理盐水中备用. 14体外透皮扩散试验… 采用单室水平扩散池,将预处理过的皮肤固定于水平扩散池 接口处,使角质层面向供给室,真皮层面向接受室,供给室内为重 组人干扰素一2b软膏2g,接受室内充满注射用水,使真皮层完 ,2h 全接触注射用水,开动恒温水浴循环和磁力搅拌器,开始计时后用带弯头的注射器从接受室内取样,测定通过皮肤的干扰素的 活性.考察不同透皮吸收促进剂处方,根据通过小鼠腹部皮肤的干 扰素量的多少确定和优化处方. 1.5样品活性测定 根据2005年版《中国药典(三部)》附录56页中的干扰素生物 学测定法(细胞病变抑制法)进行活性测定,测定结果,用计算 机程序对结果进行处理.供试品生物学活性(IU/mL)=品生物 学活性(IU/mL)×(供试 品预稀释倍数×供试品 相当于标准品半效量的 稀释倍数)/(标准品预稀 释倍数×标准品半效稀 释倍数). 2结果 试验结果见表1.上 述含不同透皮吸收促进 表1加入不同透皮吸收促进剂 软膏样品的透皮吸收情况(n=3) 透皮吸收促进剂透皮量' 种类用量(%)(?s,Iu) 注:是指2g软膏2h内透过皮肤的量. 中国药业ChinaPharmaceuticals 2007年第16卷第14期 含谷氨酰胺双肽的肠外营养对危重病的改善作用药物研究 姜海平,刘春安,王达安 (1.暨南大学医学院第一附属医院普外科,广东广州510630;2.暨南大学医学院病理 生理教研室,广东广州510630) 摘要:目的了解谷氨酰胺双肽(Gln)增强的肠外营养(parenteralnutrition,PN)对普外 科危重病患者病情的改善作用.方法将40例符合诊 断标准的普外科危重和大手术后患者随机分成治疗组和对照组,各20例,均给予 常规外科治疗,并于术后第1—3天后开始肠外营养,连 续7d,其中治疗组的氮量由20%L一丙氨酰一L一谷氨酰胺溶液供给【0.5g/(kg?d)】, 其余部分由7%一11.4%的氨基酸溶液供给.两组 患者分别于肠外营养前和营养后7d抽取外周血测量血红蛋白(Hb),白蛋白(Alb), 转铁蛋白(TRF),免疫球蛋白G(IgG),IgA,IgM,并进行 急性生理和慢性健康评分系统(APACHEII)评分.结果治疗组经肠外营养治疗后 IgG和TRF分别由治疗前(9.2?3.1)g/L和(1.17? 0.3)g/L增高至(14?2.8)和(1.36?0.7)g/L,差异显着(P<0.05),且治疗组APACHE ?评分又较对照组下降(P<0.05).结论Gin增强 的肠外营养能改善普外科危重病患者蛋白质代谢,提高机体免疫功能,减轻病情的 危重程度. 关键词:谷氨酰胺;肠外营养;全身炎症反应综合征 中图分类号:R969.4;11977.4文献标识码:A文章编号:1006—4931(2007)14—0031 —02 EffectsofGlutamineCombinedwithParenteralNutritionon SIRSandMODSOccurringinCriticalPatients JiangHaiping,LiuChunaft,WangDaaft (J.DepartmentofGeneralSurgery,TheFirstAffiliatedHospitalofMedicalCollege,JinanUniversity,Guangzhou,Guangdong,China510630; 2.DepartmentofPathologyandPhysiology,MedicalCollege,JinanUniversity,Guangzhou,Guangdong,China510630) Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofAla— glutamine(Gin)inenhancingparenteralnutritiononcriticalpatientsingeneral surgery.MethodsFortysurgicalpatientswithcriticalillweredividedintoGingroupandcontrolgroup.Allpatientsweretreatedwithroutine surgicaltreatmentcombinedwithparenteralnutritionandobservedfor7d.20casesinGingroupweretreatedwithGinsuppliedby20% L—Ala—Ginsolution【dosage:0.5g/(kg.d)】 andanother20casesincontrolgroupwithoutGin.ThedataaboutHb,Alb,TRF,IgG,IgM, IgAandscoresofacutephysiologyandchronichealthevalution(APACHEII)wereanalyzedr etrospectively.ResultsThelevelofIgGTRF increasedmoreaftertreatment(14?2.8,1.36?0.7)thanbefore(9.2?3.1,1.17? 0.3)inGingroup(P<0.05).ThescoreofAPACHE? decreasedsignificantlyintwogroups(P<0.05),andthedecreaseinGingroupwasmoreobv iousthanthatincontrolgroup(P<0.05). ConclusionGin— intensifiedparenteralnutritioncanimproveproteinmetabolismandimmunofunction,helpt oresumethefunctionofcells andorgansandreducetheseveredegreeofcriticalpatientsingeneralsurgery. Keywords:glutamine;parenteralnutrition;systemicinflammatoryresponsesyndrome 外科创伤,大手术,严重感染常会导致全身炎症反应综合征 (sins)继而发生多器官功能障碍综合征(MODS),对SIRS进行及 时干预能阻止MODS的发生,可以提高外科危重病的抢救成功率. 针对SIRS的特征运用免疫营养手段改善患者的免疫功能和调理 急性炎症反应,是目前营养支持领域研究的热点.笔者运用谷氨酰 胺(Gin)增强的肠外营养对普外科危重病患者进行治疗,观察患者 营养,免疫功能和病情的变化. 1资料与方法 1.1临床资料 剂软膏样品的3次透皮吸收试验结果表明:在软膏中加入透皮吸 收促进剂能明显改善透皮吸收,在加入透皮吸收促进剂的软膏样 品中,水溶性氮酮和1,2一丙二醇联合应用软膏的吸收效果最好, 因此2%水溶性氮酮和2%1,2一丙二醇联合,具有协同作用,确定 为最佳吸收促进剂处方,二者联合提高了药物生物利用度和疗效. 3讨论 重组人干扰素一2b属于大分子蛋白类药物,在正常情况下, 透过皮肤的量很小,如果不加入透皮吸收促进剂,则重组人干扰素 一 2b软膏用于病毒性皮肤病的生物利用度就很低,疗效不明显. 本研究的透皮吸收促进剂,对软膏的透皮吸收起到了较好作用.小 剂量的干扰素经皮吸收后能直接作用于被病毒侵袭的部位,直接 达到靶细胞而起作用,所用干扰素剂量小,无副作用及过敏反应, 并可在体内诱生干扰素而增强其作用】. 中国药业ChinaPharmaceuticals 2005年3月至2006年10月收治的外科重急症,多发性创伤, 大手术后,严重感染患者40例,达到SIRS诊断标准(1992年美国 胸科医师学会和危重症医学会联席会议制订),即符合以下4项 中的2项或2项以上:1)体温>38oC或36?;2)心率>90次/min; 3)呼吸>20次/min,或血二氧化碳分压(PaCO)<32mmHg(4.26 kPa);4)白细胞>12.0×10/L或<4.0×109/L,或未成熟白细胞> 0.10.患者病种为肝破裂并血气胸,肠破裂并颅脑外伤,残胃癌, 胃癌,结肠癌,肝癌,胃穿孔,门脉高压食管下段静脉破裂大出血, 肠外瘘,胰头癌,肠梗阻,急性化脓性梗阻性胆管炎,胃及十二指 参考文献: [1]刘成,胡晋红,朱金刚,等.促渗荆对来氟米特体外经皮渗透的影响 [J].中国药学杂志,2002,37(7):507. 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