细胞膜的通透性

null细胞生物学实验细胞生物学实验广东药学院 生命科学与生物制药学院实验三 细胞膜的通透性实验三 细胞膜的通透性一、实验目的与要求一、实验目的与要求 1. 掌握细胞膜通透性的实验方法。 2. 观察并掌握相对分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质对细胞膜通透性的影响。二、实验原理二、实验原理细胞膜在不断变化的环境中必须保持自身的稳定状态才能生存。细胞膜允许一些物质通透，又能降低甚至阻止另一些物质的通透，所以细胞膜具有选择通透性。二、实验原理二、实验原理血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。未溶血溶血渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起溶血及细胞膜破裂。此时光线较容易通过溶液，使溶液呈现透明即溶血。二、实验原理二、实验原理在不同相对分子量、脂溶性大小以及电解质和非电解质等各种溶液中， 红细胞质膜对各种溶质的渗透性不同。由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此，通过观察红细胞溶血现象时间的不同来渗入速度，从而测量各种物质通透性的差别。三、实验、仪器和主要试剂三、实验材料、仪器和主要试剂1. 材料：含适量肝素的兔血。 2. 实验仪器 小烧杯，试管，试管架，刻度吸管，注射器，秒等。 3. 试剂 乙二醇、丙三醇、葡萄糖；甲醇、乙醇、丙醇等。四、实验方法与四、实验方法与步骤1 .相对分子质量大小对膜通透性的影响 在编号的三支试管中，分别加入2ml的1mol/L 等摩尔浓度的乙二醇、丙三醇、葡萄糖高渗液，分别滴加两滴血液，用手腕轻轻摆动，晃动试管观察溶血时间，最长延长至15分钟，记录溶血时间、实验结果。四、实验方法与步骤四、实验方法与步骤2 . 脂溶性大小对细胞膜通透性的影响 在3 支试管中，各加入3mol/L甲醇、乙醇、丙醇溶液2ml 后，分别滴加血液2 滴，轻轻摇动试管并观察溶血现象，记录各管的溶血时间。 四、实验方法与步骤四、实验方法与步骤3 . 电解质和非电解质对细胞通透性的影响 在16 支试管中，各加入不同浓度的葡萄糖及氯化钠溶液2ml 后，分别滴加血液2 滴，轻轻摇动试管，室温放置15min，观察发生溶血的浓度，确定等渗浓度，并计算等渗摩尔系数。 五、注意事项五、注意事项1. 溶血现象可用一张有字的白纸来辅助识别，能够清楚地透过溶液看到溶液后方纸上清晰的字迹时，为完全溶血。 2. 因相对分子质量大小对膜通透性有影响，所以将溶血时间适当地延长至15min，15min时 仍然不溶即判断为不溶血。 3. 注意同组实验过程的同步性，尤其滴加血液的操作要迅速。