高效液相色谱法同时测定胃痛舒胶囊中白屈菜碱量

高效液相色谱法同时测定胃痛舒胶囊中白屈菜碱量 【关键词】 胃痛舒胶囊 摘要: 目的: 建立胃痛舒胶囊中有效成分中原阿片碱和白屈菜碱含量的高效液相色谱 测定法。 方法: 以Shimpack ODS柱(4.6mmi.d.×250mm，5μm)为分析柱:甲醇-1%三乙胺 溶液(65?35)为流动相;285nm检测，建立了胃痛舒胶囊中原阿片碱和白屈菜碱含量测定 的HPLC-UV法。 结果: 所建立的含量测定方法中原阿片碱在进样量0.0848,0.4240μg范 围内呈良好的线性关系(r=0.9996):日内和日间RSD分别为1.62%和1.89%:平均加样回收 率为98.38%。白屈菜碱在进样量0.2080,1.040μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997); 日内和日间RSD分别为1.49%和2.04%;平均加样回收率为99.23%。 结论: 以上方法简便、 准确、重现性好，可用于胃痛舒胶囊中原阿片碱和白屈菜碱含量测定。 关键词: 胃痛舒胶囊; 原阿片碱; 白屈菜碱; HPLC-UV Abstract: Objective:To establish a HPLC method for the determination Of in WEI TONG SU capsule.Methods:ODS column as analytic column;methanol-1%triethylamine(65:35)as mobile phase，285nm as detective wavelength to establish the HPLC-UV method.Results:The established HPLC-UV method had good linearity and precision within the range of0.0848μg,0.4240μg of protopine and0.2080μg,1.040μg of chelionine，the average recovery of protopine and chelionine was98.38%and99.23%respectively.Conclusion:The method is simple，accuracy and precise for the determination of chelionine and protopine in WEI TONG SU capaule. Key words: Weitong su capsule; Chelionine; Protopine; HPLC-UV 胃痛舒胶囊是以罂栗科植物白屈菜为主要原料而制成的一种用于治疗慢性胃炎、胃肠痉 挛、胃溃疡、十二指肠溃疡等胃病的纯中药新制剂，具有吸收快;无刺激性:止痛快的特点。 其镇痛作用的有效成分以白屈菜碱,1, (Chelionine)和原阿片碱,2, (Protopine)为 主。为了对其进行质量控制，本研究建立了胃痛舒胶囊中原阿片碱和白屈菜碱含量测定的 HPLC-UV法。此方法准确，稳定、重现性好、回收率高。 1 实验部分 1.1 仪器与试药 Shimazdu高效液相色谱仪，ShimazduLC-10At泵，RHEODYNE7725i 进样器，ShimazduSPD-10AtVP型紫外检测器;N2010色谱工作站;美国SARTORIOUS A6十 万分之一电子分析天平。胃痛舒胶囊(规格:1g/粒，批号:030513、030619、030704，白屈菜 碱含量应不少于2mg/g;原阿片碱含量均应不少于1mg/g);白屈菜碱对照品(由江西省药品 检验所提供，供含量测定用);原阿片碱对照品(购自中国药品生物制品检定所，含量测定 用);空白对照液(自制);甲醇(色谱纯，购自西班牙百灵威公司)，超纯水(自制)，三 乙胺(分析纯，成都化学试剂厂提供)。 1.2 方法与结果 1.2.1 色谱条件 色谱柱:shimpack ODS(4.6mm i.d.×250mm，5μm);流动相:甲醇-1%三乙胺溶液(65:35);流速:1ml/min;检测波长为285nm。柱温:25?;进样量10μl，理论板数按白屈菜碱峰计算不低于2000。在此色谱条件下，样品溶液、空白对照液的色谱图如图1所示，原阿片碱峰的保留时间为8.97min;白屈菜碱峰的保留时间为17.07min，空白对照液在相同色谱条件下未见干扰峰。 1.2.2 对照品溶液的配制和线性范围考察 分别精密称取白屈菜碱对照品2.60mg;原阿片碱对照品1.06mg，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成每1m1含白屈菜碱52.0μg;原阿片碱21.2μg的对照溶液。分别精密吸取对照品溶液4，8，12，16，20μl，进样，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，各对照品进样量(μg)为横坐标，得到原阿片碱的回归方程为:A=449425X(μg)+1014(r=0.9996)。白屈菜碱的回归方程为A=598462X(μg)+3028(r=0.9997)测定结果说明:原阿片碱在进样量0.0848,0.4240μg范围内呈良好的线性关系;白屈菜碱在进样量0.208,1.040μg范围内呈良好的线性关系。 1.2.3 供试品溶液的配制 取本品10粒，去掉外壳，倒出内容物，精密称取1.5g，置50ml玻璃离心管中，加甲醇20ml超声提取5min，离心(3000rpm)15min，取上清液，滤过，精密量取续滤液10ml至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 1.2.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定对照品和供试品的原阿片碱和白屈菜碱峰面积积分值，用外标曲线法与峰面积计算，即得。 1.2.5 进样精密度实验 精密吸取对照品溶液10μl，重复进样5次，测定原阿片碱和白屈菜碱峰面积积分值。求得峰面积的RSD为分别1.07%和1.14%，说明进样精密度良好。 1.2.6 日内精密实验 取同一供试品(批号:030513)，照含量测定方法试验，每隔一定时间进样测定原阿片碱和白屈菜碱峰面积积分值，计算相对标准偏差。求得日内RSD分别为1.62%(n= 5)和1.49%(n=5)。 1.2.7 日间精密度实验 取同一批(批号:030513)样品，于五个不同的日期，按前文方法，分别制备对照品溶液和供试品溶液，照含量测定方法试验，测定原阿片碱和白屈菜碱峰面积积分值，计算含量，求得的日间RSD分别为1.89%(n=5)和2.04%(n=5)，说明本方法重现性良好。 1.2.8 回收率实验 采用加样回收法，精密称取已知含量样品约1g，共5份，置50ml玻璃离心管中，加甲醇20ml超声提取5min，离心(3000rpm)15min，取上清液，滤过，精密量取续滤液10ml至25ml量瓶中，分别精密加入前述对照品溶液10ml，加甲醇稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件，吸取10u1进样测定，计算回收率，结果原阿片碱的回收率为98.38%，RSD为1.81%;白屈菜碱回收率为99.23%，RSD为1.14%。 1.2.9 样品的测定 照前述方法制备供试品溶液，对三批样品进行含量测定，结果见表1。表1 三批样品的原阿片碱和白屈菜碱测定结果(略) 2 讨论 原阿片碱含量测定的方法有高效液相色谱法,2, 、薄层扫描法,3, 、高效毛细管电泳法,4, 、分光光度法,5, 等，白屈菜碱的含量测定方法有分光光度法,5, 、高效液相色谱法,6, 等。制剂中原阿片碱和白屈菜碱的含量测定采用高效液相色谱法较为简便，而且专属性较高。本研究采用反相高效液相色谱法，以三乙胺为扫尾剂，建立了胃痛舒胶囊中原阿片碱和白屈菜碱含量测定的HPIC-UV法。此方法准确，稳定、重现性好、回收率高，可以用于胃痛舒胶囊的质量控制。 参考文献: ,1, 何志敏，佟继铭，宫凤春.白屈菜碱镇痛作用研究,J,.中草药，2003，34(9):837-838.,2, 顾孝红，唐 平，靳祖英.反相高效液相色谱法测定夏天无中原阿片碱的含量,J,.时珍国医国药，2002，13(10):608-609. ,3, 罗跃华，熊 蔚，许 妍，等.薄层扫描法测定夏天无中原阿片碱的含量,J,.中草药，2000，31(9):669-670. ,4, 杨友宝，王英豪.毛细管电泳在中药有效成份分析中的应用,J,.中国中医药，2004，2(9):6-9. ,5, 韩剑明，邬小英.不同采地夏天无中总生物碱的含量比较,J,.中药通报，1988，13(3):165-165. ,6, 安彩贤，杨广德，叶建涛，等.RP-HPLC法同时测定小果博落回中血根碱和白屈菜红碱的含量,J,.中成药，2001，23(11):702-703.