茶文化C茶之保健作用与医疗效果

王岳飞　茶之保健作用与医疗效果中国杭州浙江大学茶学系zdcy@zju.edu.cn0571-86971263;138581199882009年3月《中华茶文化》课件一.总论茶是物质与精神同在，造物主给予人类的恩赐茶（CamelliaSinensis）健康人类身心的灵叶茶（CamelliaSinensis）健康人类身心的灵叶*茶是物质与精神同在，造物主给予人类的恩赐（一）茶树是合成珍稀化合物的天然工厂,茶是珍贵的多重性商品。（二）在环境污染日趋突显的今天，茶是人们永远的健康卫士（一）茶树是合成珍稀化合物的天然工厂农业部确定茶树为生态经济两用林，在退耕还林保护生态方面具有独特的作用。在茶叶中内含700多种成分中：这些成分互相作用，协同增效，如同一帖配伍完善的中药。茶多酚，最具价值的第七营养素（植物性化学物质）茶叶中功效成分的产品开发药品（准字号药）↑〖保健药品〗↑〖保健食品〗↑〖特殊/特种营养食品〗↑〖普通食品〗↑〖农副土特产品〗商品的多重性生活必需品艺术品礼品保健品茶既体现物质文明，又延伸精神文明俗物雅品（二）在环境污染日趋突显的今天，茶是人们永远的健康卫士1.茶陶冶情操，净化心灵——茶之品性及茶人精神茶之品性：包容、奉献、谦逊、廉洁。茶人精神：和谐宽容、谦虚谨慎、廉洁奉公、乐于奉献。——茶之“十德”与中国茶德唐代的刘贞亮认为茶有“十德”：以茶散闷气以茶驱腥气以茶养生气以茶除病气以茶利礼仁以茶敬德以茶尝滋味以茶养身体以茶可雅心以茶可行道——以茶养德茶以质朴平和的性格和涤烦健身的功效为人类所赏识，被赋予一种社会属性，成为一种精神象征。“茶可雅志”借助仪式去完成心理之修行；在把盏相敬中，以茶的香洁获得自我身心的净化和人格的升华。在现代社会中推行“以茶养德”思想，让人们从日常生活中培养道德观念，提升思想境界，对于在全社会树立社会公德，职业道德和家庭美德具有深远的影响。中国茶德著名茶人庄晚芳先生提出了以“廉、美、和、敬”为核心内容的“中国茶德”。“廉”，“廉俭育德”以清廉勤俭来养育人们的品德；“美”，“美真康乐”求真求美，涤浊健身，以求身心愉悦；“和”，“和诚相处”人与人之间以诚相待，和睦相处；“敬”敬爱于人，助人为乐。茶可达食品的最高要求，饮茶代表着一种健康的生活方式，引导民众特别是青少年的健康饮食，使茶这一健康资源得以发挥。2.茶祛病健身，有益健康唐﹒陈藏器撰《本草拾遗》中断言：“茶为万病之药”。据《中国茶经》统计92种中国历代古医，茶的传统功效有24项，即：少睡、安神、明目、清头目、止渴生津、清热、消暑、解毒、消食、醒酒、去肥腻、下气、利水、通便、治痢、祛风解表、坚齿、治心疼、疗痔治瘘、疗肌、益气力、去痰、延年益寿、其他等。加上现在疾病，如辐射损伤、肿瘤、心脑血管病、病毒（包括艾滋病）等又增加了许多茶的医疗效能，可见，陈藏器所称“茶为万病之药”是非常正确的。汉代，中国文人将茶当作长生不老的仙药。“茶为万病之药”（唐代，陈藏器说）中国古代，茶叶被当作药物使用。“茶药”以茶养生主要通过两种方式来实现：以茶为饮的饮食调养和以茶为载体的精神修养，可谓养身与养心并重。欧美人士：★茶是一种可以让人产生智慧的饮料，饮茶对思考问题进行写作乃至朋友间交谈时保持良好的气氛都有帮助。★“茶是思考和谈话的润滑剂”、★“饮茶可以让人作深切长久的思考”中外营养学家评出的十大健康食品2003年中国《大众医学》杂志组织国内权威营养学家评出十大健康食品：①大豆（豆浆、豆奶等），②牛奶、酸奶，③番茄，④绿茶，⑤荞麦，⑥十字花科蔬菜(花菜、西兰花菜、卷心菜、白菜等)，⑦海鱼，⑧黑木耳等菌菇类，⑨胡萝卜，⑩禽蛋蛋白。2002年美国《时代》推出10种现代人最佳的营养食品是：番茄、菠菜、坚果、椰花菜、燕麦、鲑鱼、大蒜、蓝莓、绿茶和红酒。德国专家评出十大健康长寿食品德国《焦点》杂志2007年2月12日公布了对人类健康最为有益的十大食品排行榜，研究人员认为常吃这些食品不仅能够充分补充人体所需的各种维生素、矿物质和营养成分，还能起到增强体质、预防疾病、延年益寿的作用。　　苹果、鱼、大蒜、草莓、胡萝卜、辣椒、香蕉、绿茶、大豆、牛奶（绿茶有神奇功效，其生物活性物质能防止动脉粥样硬化和前列腺癌，同时对减肥也大有帮助，不过为了燃烧多余的脂肪，每日至少应喝4大杯绿茶水）二.茶多功效的理论依据1、自由基的产生及基及其危害2、茶多酚对自由基具有极强的清除能力，是活性氧的克星3、抗氧化剂的作用及TP的符合度现代的自由基病因学与自由基药理学为茶的多功效提供了理论依据。什么是自由基？化学反应中共价键的断裂带有不成对电子的自由基形成离子。在光、热、高能射线、呼吸过程中电子供应不足，病理等使体内产生的自由基代谢失衡。氧自由基的生成正常情况下，生物体约有2％的总耗氧量经呼吸链旁路（单电子还原过程）生成氧自由基。缺血与再灌注、吞噬细胞激活、花生四烯酸代谢异常及补体激活是产生活性途径。其来源主要由两大细胞系统及多套酶系统。－内皮细胞：黄嘌呤氧化酶系统(XO)－中性粒细胞：髓过氧化酶系统(MPO)、还原型辅酶Ⅱ（NADPH）、脂氧化酶和环氧化酶、NO合成酶等。活性氧的代谢途径自由基促使DNA、脂质、蛋白质损伤后引发的生理异常疾病创伤环境污染放射线紫外线化学药物吸烟等机体病变癌症、心血管病、炎症、老年斑、皱纹、白内障、衰老等自由基清除剂：能提供质子的物质VEVC儿茶素1.茶多酚可通过抑制氧化酶系、络合诱导氧化的过渡金属离子来抑制自由基的产生。2.茶多酚可以激活自由基的清除体系。3.茶多酚提供质子的能力使其与自由基结合，从而达到直接捕集、消灭自由基的效果。茶多酚对人体罹病的罪魁祸首——过量的自由基具有极强的清除能力，是活性氧的克星。茶多酚多对自由基的作用1.抑制氧化酶—对细胞色素、脂氧化酶和环氧化酶的抑制2.与诱导氧化的过渡金属离子络合—TP有效络合Fe3+从而减轻自由基损伤3.直接清除自由基—作为预防性抗氧化剂，清除无机自由基：、•OH、1O2、NO、•N3—作为链阻断式抗氧化剂，清除脂自由基4.对抗氧化体系的激活—SOD，GSH-Px的激活—再生体内高效抗氧化剂，VE、VC等现代科学研究揭示，茶独特的防病健身功效主要来自茶叶中的茶多酚，也就是说茶多酚是茶叶中最主要、最精华、对人体最有益的成分。自由基理论认为，过量自由基侵袭构成细胞膜的脂质及蛋白质，产生各种不安定的自由基，造成机体的损害，成为各种疾病最主要的病因。而茶多酚是天然高效抗氧化剂，不仅能抑制自由基的产生，而且能有效清除人体内过量的自由基，达到防病健身的功效。儿茶素对清除作用及其协同增效在各儿茶素的组合研究中，值得注意的是茶多酚复合体对自由基的清除力不比单体EGCG差，而且处理12各种儿茶素组成比例是按天然的比例组合对·的清除力最强，说明茶树在进化过程中即优化了自身儿茶素组成比例，如果人为的加大EGCG的比例，如处理14达到90%，其抗氧化能力也不见得特别好。1985-2005年茶与健康世界文献量茶与健康研究文献量的增长(KaoYHetal,2006)茶和其他植物的抗氧化活性（CaoG等，1996）绿茶红茶大蒜洋葱玉米甘蓝菠菜甜菜辣椒花椰菜生菜胡萝卜茄子马铃薯堇菜甘蓝南瓜黄瓜抗氧化活性%20406080茶多酚的还原电势和相对抗氧化活性(HalliwellBetal1999）1.0±0.020.28维生素C1.0±0.030.48维生素E3.5±0.03---红茶1000ppm3.8±0.03---绿茶1000ppm6.2±0.430.54TF二没食子酸酯2.9±0.080.51TF4.8±0.060.43(-)EGCG4.9±0.020.55(-)ECG3.8±0.060.43(-)EGC2.4±0.020.57(-)EC相对抗氧化活性还原电势(V)化合物不同茶类的抗氧化活性(JAVinson2000)1/IC50(μM)(绿茶乌龙茶红茶抗氧化剂的作用及TP的符合度抗氧化剂（Antioxidant简称AO）是指可阻止FR链锁反应启动和蔓延，终止FR反应过程的物质。虽然把能与FR反应而除去FR的物质称为自由基清除剂，但由于两者的作用往往是交叉的，人们习惯把它们统称为抗氧化剂，即这种物质能清除或抑止FR的产生，阻断FR反应的蔓延，从而预防或减轻FR对生物机体的损伤，所以抗氧化剂根据作用对象不同而分为预防性和治疗性两种，即：因为FR的寿命短，反应快，而且生物靶分子又在特定的部位，所以AO应满足下列条件以及茶多酚（TP）具有的符合度，才能实现其药理作用。①AO分子能到达目标部位途中不被代谢、分解、失活。TP的药动学研究表明，口服TP2h后不但可在血液和多种脏器中检出，并在体内转化成更稳定的糖苷化合物.②AO分子可与毒性FR迅速反应，有效地切断FR反应链。TP不但可清除、·OH和脂质自由基，还可抑制NO和反应形成的过氧亚硝基（ONOO—）·的氧化活性。③AO与FR进行反应后生成的R’毒性比原来的R·小。TP与FR反应形成较稳定的半醌自由基，而且部分可进一步氧化成无毒的聚合物。④进一步反应与体内的抗氧化体系协同增效。TP不仅可激活SOD、CAT、GSH—PX的活性，而且可通过顺序修复，再生VE使其不断发挥清除FR的作用。3、抗氧化剂的作用及TP的符合度茶多酚由于它自身的特殊结构不仅螯合消灭金属离子这些FR链反应的引发剂，阻止、抑制自由基的产生，而且还可清除捕集FR使自由基反应链中断，而在机体内不同的微环境和代谢生化反应链中起抗氧化作用，以此广泛地参与、介导和调节机体内的生化反应链来实现其生物功能或药理作用。药物代谢过程是药物在体内产生药效及毒性的主要过程，茶儿茶素可通过食道进入胃和小肠，并由小肠黏膜吸收进入门静脉，在肝脏酶作用下转化为各种代谢物，并通过心脏输送到全身各个器官而发挥多种保健作用。虽然饮用绿茶后血液中儿茶素浓度较低，仅为6~10umol/L，但服用茶多酚片后，血浆中EGCG浓度可达4~6mmol/L,达到了保健和药效作用的有效浓度。但茶儿茶素进入体内后半衰期较短，一般仅为0.5~4h，且90%以上的儿茶素在体内发生代谢转化或由粪便或尿液排出。因此深入定量地研究各种儿茶素的药理毒理学、代谢动力学及其代谢物活性鉴定对茶儿茶素的生物利用性、新药申报及茶的消费与疾病防治的联系都具有十分重要的意义。三.　系统毒理学安全性评价第五章急性毒性研究第六章遗传毒理学（致突变作用）研究第七章大鼠30天喂养试验研究第八章致畸作用的研究第九章长期毒性试验（90天喂养试验）研究。第十章对正常大鼠呼吸、血压、心电图及神经系统的影响第十一章对正常人试食研究总论：茶多酚属高效低毒化合物，在适当剂量下（成人每次口服150－200mg，每天500－1000mg）长期服用是安全的。四　茶的保健功效第12章茶儿茶素制剂对实验性高脂血症动物血脂含量影响的研究1材料与方法1.1样品及性状1.2剂量设计2.3样品处理及配制2.4实验动物2.5高脂高营养饲料2.6给样途径2.7实验方法（一A）茶儿茶素制剂对实验性高脂血症动物血脂含量影响的研究　茶儿茶素制剂保健功效研究2结果茶儿茶素制剂对大鼠体重的影响的结果见表12-1。表12-1.茶儿茶素制剂对受试大鼠体重的影响58.4±6.0*99.7±10.2*270.4±12.3*170.7±6.910空白对照61.2±5.4104.2±9.2274.6±18.5170.4±6.5100.90g/kg62.4±5.6106.2±9.5276.5±14.6170.3±6.8100.30g/kg66.7±5.5113.4±9.4283.5±14.1170.1±6.4100.15g/kg70.8±6.0120.8±10.3291.4±14.3170.6±6.710模型对照增重率(%)增重实验末实验前组别体重(g)动物数*P<0.05与模型对照组相比由上表可见，实验末空白对照组与模型对照组及各剂量组相比，增重明显下降，有显著性差异，说明模型成立，而各剂量茶儿茶素制剂对动物体重无明显影响。　茶儿茶素制剂保健功效研究茶儿茶素制剂对大鼠动物胆固醇TC的影响的结果见表12-2。表12-2.茶儿茶素制剂对动物胆固醇TC的影响2.15±0.22*1.98±0.2210空白对照2.36±0.23*1.97±0.12100.90g/kg2.82±0.311.98±0.10100.30g/kg3.14±0.241.96±0.10100.15g/kg3.28±0.271.97±0.0910模型对照实验末实验前胆固醇(mmol/L)动物数组别由表12-2可见，茶儿茶素制剂各剂量组与模型对照组相比，TC明显下降，且呈剂量效应关系，虽然低剂量组胆固醇TC下降了4.3%，中剂量组下降了14.0%，但未达到显著性差异，高剂量组下降了28.0%，达到显著性差异（P<0.05），已接近空白对照，说明样品茶儿茶素制剂对动物有降低动物血清TC作用。*P<0.05与模型对照组相比　茶儿茶素制剂保健功效研究茶儿茶素制剂对大鼠动物甘油三酯TG的影响的结果见表12-3。表12-3.茶儿茶素制剂对动物甘油三酯TG的影响1.20±0.13*1.09±0.1510空白对照1.46±0.19*1.10±0.12100.9g/kg1.83±0.161.09±0.09100.3g/kg1.96±0.131.08±0.05100.15g/kg2.01±0.231.12±0.0910模型对照实验末实验前甘油三酯(mmol/L)动物数组别由表12-3可见，茶儿茶素制剂各剂量组与模型对照组相比，TG明显下降，且呈剂量效应关系，低剂量组TG下降了2.5%，中剂量组下降了9.0%，高剂量组下降了27.4%，达到显著性差异（P<0.05），已接近空白对照，说明样品茶儿茶素制剂对动物有降低动物TG作用。*P<0.05与模型对照组相比　茶儿茶素制剂保健功效研究表12-4.茶儿茶素制剂对动物高密度脂蛋白胆固醇HDL-C的影响0.76±0.120.68±0.1310空白对照0.76±0.120.68±0.11100.9g/kg0.74±0.140.70±0.12100.3g/kg0.74±0.130.71±0.12100.15g/kg0.73±0.140.68±0.1310模型对照实验末实验前高密度脂蛋白(mmol/L)动物数组别由表12-4可见，茶儿茶素制剂各剂量组与模型对照组相比，高密度脂蛋白胆固醇HDL-C有一定的增加，但未达到显著性差异（P﹥0.05），由于本研究各组之间高密度脂蛋白胆固醇HDL-C与空白对照相比，均未达到显著性差异（P﹥0.05）。说明对于考察动物高密度脂蛋白胆固醇HDL-C的变化，本实验模型并不成功，需要进一步研究。*P<0.05与模型对照组相比　茶儿茶素制剂保健功效研究现将茶儿茶素制剂对动物胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇三方面影响综合成下图：茶儿茶素制剂0.90g/kg茶儿茶素制剂0.30g/kg茶儿茶素制剂0.15g/kg高脂血症组茶儿茶素制剂0.90g/kg茶儿茶素制剂0.30g/kg茶儿茶素制剂0.15g/kg高脂血症组茶儿茶素制剂0.90g/kg茶儿茶素制剂0.30g/kg茶儿茶素制剂0.15g/kg高脂血症组*0**TCTGHDL-C100%↓4.3%↓14.0%↓28.0%↓27.4%↓9.0%↓2.5%100%100%↑1.4%↑1.4%↑4.1% 由上可见，实验末样品0.90g/kg剂量组胆固醇、甘油三酯与模型对照组相比分别下降了28.0%和27.4%。下降幅度很大，与模型对照组相比已达显著水平。*P<0.05与模型对照组相比　茶儿茶素制剂保健功效研究3结论本研究结果也表明，样品茶儿茶素制剂连续喂养30天后，在大鼠的血清总胆固醇TC、甘油三酯TG、高密度脂蛋白胆固醇HDL-C三项考察指标中，已到血清总胆固醇TC、甘油三酯TG二项指标呈阳性，高密度脂蛋白胆固醇HDL-C也有一定的上升，根据保健食品动物实验结果判定原则，茶儿茶素制剂具有调节血脂作用。根据这一研究结果，可进一步考察其对人高脂血症的影响。 　茶儿茶素制剂保健功效研究1材料与方法1.1样品及性状茶儿茶素制剂每片300mg，含茶多酚100mg，另一个为安慰剂。推荐摄入量为1.8g（6片）/人/日。1.2受试者选择1.2.1纳入标准选择单纯血脂异常者(指TC、TG、LDL三项中一项或一项以上增高，或HDL减少者)50例为受试者。年龄40~70(平均56)岁，男24例、女26例；其中TC异常者35例，TG异常者45例，HDL-C异常者30例，LDL-C异常者38例。血脂正常值：TC<5.72mmol/L、TG<1.69mmol/L、HDL-C男>1.05mmol/L，女>1.15mmol/L。1.2.2排除标准：（一B）茶儿茶素制剂对高血脂人群的功效研究1.3试食方法停用其它调血脂药二周，冠心病及高血压者原用的药物剂量不变。试食组服用茶儿茶素制剂，每日2次，每次3片，0.30g/片，连续观察30天。1.4观察方法1.5功效判定根据卫生部保健食品人体试食试验指导原则判定标准。显效：达以下任何一项者，TC下降至正常或≥20％、TG下降至正常或≥40％、HDL-C上升至正常或≥0.25mmol/L、TC-HDL-C/HDL-C下降≥20%；有效：TC下降10％<20％、TG下降20％~<40％、HDL-C升高4％～<0.25mmol/L、TC-HDL-C/HDL-C下降10％～<20％；无效：未达有效标准者。1.6统计学处理　茶儿茶素制剂保健功效研究　茶儿茶素制剂保健功效研究2结果2.1功效血脂异常50例中其中TC异常者35例，TG异常者45例，HDL-C异常者30例，LDL-C异常者38例。茶儿茶素制剂调节人体血脂紊乱试验结果见表13-1。表13-1.茶儿茶素制剂调节血脂紊乱有效率(％)76.0(23)24.0(12)20.0(10)56.0(28)50TC-HDL-C/HDL-C87.0(18)13.0(3)26.1(6)60.9(14)38LDL-C83.3(15)16.7(5)16.7(5)66.7(20)30HDL-C73.3(33)26.7(12)33.3(15)40.0(18)45TG80.0(28)20.0(7)22.9(8)57.1(20)35TC总有效（n）无效（n）有效（n）显效（n）例数\从表13-1可见，茶儿茶素制剂调节人体血脂紊乱疗效分别为80.0％（TC）、73.3％（TG）、83.3％（HDL-C）及87.0％（LDL-C）。目标市场每年400吨儿茶素年销售额1.5亿元　茶儿茶素制剂保健功效研究儿茶素制剂对血脂（mmol/L）异常的改善幅度见表13-2。表13-2.茶儿茶素制剂对血脂（mmol/L）异常的改善幅度-21.73.6±1.3*4.6±1.450TC-HDL-C/HDL-C-17.93.54±0.78*4.31±0.5138LDL-C+23.91.31±0.20*1.05±0.1230HDL-C-22.72.11±0.96*2.73±0.9145TG-18.15.64±28.1*6.89±0.5335TC变化率（%）药后药前例数 茶儿茶素制剂组高脂血症组茶儿茶素制剂组高脂血症组茶儿茶素制剂组高脂血症组茶儿茶素制剂组高脂血症组茶儿茶素制剂组高脂血症组↓21.7%100%↑23.9%100%↓17.9%100%↓22.7%100%↓18.1%100%TCTGLDL-CHDL-CTC-HDL-C/HDL-C*****2005年底目标市场50吨/Y　茶儿茶素制剂保健功效研究2.2血脂改善幅度茶儿茶素制剂对50例患者血脂改善幅度的人体试食结果：图13-1.茶儿茶素制剂对血脂异常和50例患者血脂的改善幅度（*P＜0.05，与用药前相比）结果表明，茶儿茶素对50例患者三种血脂的影响(包括正常及异常者)，TC下降12.9％(P>0.05)，TG下降21.9％(P<0.05)，LDL-C下降10.8％(P<0.05)，HDL-C上升8.6％(P<0.05)，TC-HDL-C/HDL-C下降21.7％(P<0.05)。表13-3.茶儿茶素制剂对50例患者血脂（mmol/L）改善幅度-21.73.6±1.3*4.6±1.4TC-HDL-C/HDL-C-10.83.36±1.173.77±0.11LDL-C+8.61.28±0.24*1.18±0.22HDL-C-21.92.08±0.78*2.66±0.76TG-12.95.54±0.876.36±0.68TC变化率（%）药后药前 *P<0.05与药前对照组相比3讨论根据保健食品人体试食试验结果判定标准（卫生部，2003）：①血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)二项指标阳性，而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)不显著低于对照组，可判定受试样品具有调节血脂功能或辅助降血脂作用；②血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)二项指标中一项指标阳性，而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)不显著低于对照组，可判定受试样品具有辅助降血清总胆固醇作用或辅助降血清总胆固醇作用。而我们的研究结果已符合上述标准，因此，茶儿茶素制剂调节血脂功能或辅助降血脂作用的功能已得到研究证实。　茶儿茶素制剂保健功效研究（二）茶儿茶素制剂增强免疫力功能研究1材料与方法1.1样品1.2动物及分组1.3方法1.3.1ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)1.3.2二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应试验(耳肿胀法)1.3.3抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)1.3.4血清溶血素测定试验(血凝法)1.3.5小鼠碳廓清试验1.3.6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验(半体内法)1.3.7NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)1.4数据统计处理方法　茶儿茶素制剂保健功效研究2结果2.1茶儿茶素制剂对体重、胸腺/体重比值及脾脏/体重比值的影响茶儿茶素制剂对昆明种小鼠的体重及茶儿茶素制剂对BALB/C小鼠的体重的影响结果表明：茶儿茶素制剂各剂量组昆明种小鼠及BALB/C小鼠的体重与阴性对照组相比，差异无显著性(P>0.05)。结果表明茶儿茶素制剂各剂量组昆明种小鼠及BALB/C小鼠的体重、胸腺/体重比值及脾脏/体重比值与阴性对照组相比，差异无显著性(P>0.05)。　茶儿茶素制剂保健功效研究2.2茶儿茶素制剂对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响茶儿茶素制剂对ConA诱导的鼠脾淋巴细胞转化试验（MTT法）结果：图14-1.茶儿茶素制剂对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响(*P<0.05,与阴性对照组比较)Fig.14-1EffectsofteacatechinspreparationonlymphocytetransforminducedbyConA各剂量组间差异有极显著意义（P<0.01）。茶儿茶素制剂中、高剂量组与阴性对照组比较差异有显著意义（P<0.05）。结果表明茶儿茶素制剂具有增强细胞免疫功能的作用。　茶儿茶素制剂保健功效研究2.3茶儿茶素制剂对二硝基氟苯小鼠迟发型变态反应的影响茶儿茶素制剂对二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应试验（耳肿胀法）研究结果：图14-2.茶儿茶素制剂对二硝基氟苯(1-Fluor-dinitrobenzol,DNFB)小鼠迟发型变态反应的影响（﹡P<0.05，与阴性对照组比较）Fig.14-2EffectsofteacatechinspreparationondelayedallergyreactioninducedbyDNFB茶儿茶素制剂各剂量组间差异有极显著意义（P<0.01）。茶儿茶素制剂高剂量组与阴性对照组比较差异有显著意义（P<0.05）。结果表明茶儿茶素制剂具有增强细胞免疫功能的作用。　茶儿茶素制剂保健功效研究2.4茶儿茶素制剂对溶血空斑数的影响茶儿茶素制剂对抗体生成细胞检测试验（Jerne改良玻片法）的结果：对各组溶血空斑数均值进行单因素方差分析，各剂量组间差异末见有显著意义（P>0.05）。结果表明茶儿茶素制剂在150mg/kg.BW/d、300mg/kg.BW/d和600mg/kg.BW/d(相当于人体推荐荐摄入量的5倍、10倍和20倍)剂量时，对抗体生成细胞试验结果未见有影响。2.5茶儿茶素制剂对小鼠血清溶血素抗体积数的影响血清溶血素的测定（血凝法）结果：图14-3.茶儿茶素制剂对小鼠血清溶血素抗体积数的影响（﹡P<0.05，与阴性对照组比较）Fig.14-3Effectsofteacatechinspreparationonmiceserumhaemolysin茶儿茶素制剂中、高剂量组与阴性对照组比较差异均有显著意义（P<0.05）。结果表明茶儿茶素制剂，具有增强体疫液免疫功能的作用。　茶儿茶素制剂保健功效研究2.6茶儿茶素制剂对小鼠吞噬指数的影响小鼠碳廓清试验结果：对各组吞噬指数的均值进行单因素方差分析，组间差异有显著意义（P<0.05）。茶儿茶素制剂高剂量与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。结果表明茶儿茶素制剂，具有增强小鼠单核吞噬功能的作用。图14-4.茶儿茶素制剂对小鼠巨噬细胞吞噬指数的影响（﹡P<0.05，与阴性对照组比较）Fig.14-4Effectsofteacatechinspreparationonphagocyticindexofmacrophageinmice　茶儿茶素制剂保健功效研究2.7茶儿茶素制剂对小鼠腹腔巨噬细胞巨噬鸡细胞的吞噬率及吞噬指数的影响小鼠腹腔巨噬细胞鸡红细胞试验（半体内法）结果见：对各组吞噬率、吞噬指数的均值进行单因素方差分析，组间差异有极显著意义和显著意义经Dunnett’st检验，茶儿茶素制剂中、高剂量组吞噬率及高剂量组吞噬指数与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。结果表明茶儿茶素制剂在600mg/kg.BW/d(相当于人体推荐摄入量的20倍)剂量时，具有增强小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的作用。图14-5.茶儿茶素制剂对小鼠腹腔巨噬细胞巨噬鸡细胞的吞噬率及吞噬指数的影响（﹡P<0.05，与阴性对照组比较）Fig.14-5Effectsofteacatechinspreparationonphagocyticindexofmacrophageinmice　茶儿茶素制剂保健功效研究2.8茶儿茶素制剂对NK细胞活性的影响NK细胞活性测定试验（乳酸乳氢酶测定法）结果：对各组小鼠NK细胞活性均值进行单因素方差分析，组间差异末见有显著意义(P>0.05)。结果表明茶儿茶素制剂在150mg/kg.BW/d、300mg/kg.BW/d和600mg/kg.BW/d(相当于人体摄入量的5倍、10倍和20倍)剂量时，未见具有增强NK细胞活性的作用。　茶儿茶素制剂保健功效研究3结论本研究茶儿茶素制剂增强免疫力功能试验的结果总结如下：1、实验动物的体重、胸腺/体重比值和脾脏/体重比值的检测结果表明，茶儿茶素制剂在对动物的体重、胸腺/体重比值和脾脏/体重比值未见明显影响。（O）2．ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验结果表明，茶儿茶素制剂具有增强小鼠细胞免疫功能的作用。（O）3．二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应试验结果表明，茶儿茶素制剂具有增强小鼠细胞免疫功能的作用。（O）4．抗体生成细胞检测试验结果表明，茶儿茶素制剂对抗体生成细胞检测试验结果未见有影响。（X）5.血清溶血素试验测定结果表明，茶儿茶素制剂具有增强小鼠体液免疫功能的作用。（O）6．小鼠碳廓清试验试验结果表明，茶儿茶素制剂具有增强小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的作用。（O）7．小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果表明，茶儿茶素制剂具有增强小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用。（O）8．NK细胞活性测定试验结果表明，茶儿茶素制剂未见具有增强NK细胞活性的作用。（X）根据卫生部规范结果判定：在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性四个方面任两个方面结果阳性，可判定该样品具有增强免疫力功能作用。因此，茶儿茶素制剂具有增强免疫力功能。茶叶是一种良好的免疫功能调节剂（1）对动物的免疫功能既有刺激促进作用又有部分抑制作用，而以促进作用为主。（2）对免疫功能低下的动物有刺激促进免疫力提高或回升作用，但对正常动物的免疫功能有一定的调节作用，即对非特异性免疫及细胞免疫有促进作用，对体液免疫有抑制作用，可防止免疫过强。（3）可通过机体的免疫器官（中枢免疫器官胸腺和周围免疫器官脾脏）、免疫细胞（淋巴细胞、NK细胞、白细胞介素、巨噬细胞、红细胞等）及免疫分子（免疫球蛋白、补体等）起到调节免疫系统的功能。（4）TP影响机体免疫功能的机理之一是通过减低细胞过氧化物含量或通过清除免疫途中生成的过量自由基。（三）茶儿茶素制剂抗氧化和延缓衰老作用的研究　茶儿茶素制剂保健功效研究2茶儿茶素制剂抗氧化作用的功能研究2.l材料与方法2.1.1样品性状2.1.2剂量设计2.1.3样品处理2.1.4实验动物2.1.5给样途径2.1.6实验方法血中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)含量和血中超氧化物歧化酶(SOD)活力。　茶儿茶素制剂保健功效研究2.2结果2.2.1茶儿茶素制剂对SD大鼠体重的影响由表15-1可见，茶儿茶素制剂各剂量组对SD大鼠体重的影响与老年对照组相比，均无显著性差异。2.2.2茶儿茶素制剂对SD大鼠血中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）含量的影响茶儿茶素制剂对动物血中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）含量的影响结果见下：-1.31±0.20**10青年对照-39.91.55±0.32**100.9g/kg-24.81.94±0.35*100.3g/kg-13.62.23±0.43100.15g/kg-2.58±0.5010老年对照MDA含量与老年对照比较下降（%）MDA含量（nmol/ml）动物数组别茶儿茶素制剂各剂量组对动物血中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）含量有很大的影响，且明显呈剂量效应关系。。茶儿茶素制剂对SD大鼠血中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）含量的影响（**P<0.01,*P<0.05与老年对照组相比）　茶儿茶素制剂保健功效研究2.2.2茶儿茶素制剂对SD大鼠血中超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响茶儿茶素制剂对SD大鼠血中超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响实验结果：-194.4±19.6**10青年对照+48.6196.7±10.7**100.90g/kg+28.4170.0±12.0*100.30g/kg+12.2148.5±12.4100.15g/kg-132.4±11.410老年对照SOD含量与老年对照比较增加（%）超氧化物歧化酶（SOD）活力（u/ml）动物数组别，茶儿茶素制剂各剂量组对SD大鼠血中超氧化物歧化酶SOD含量有很大的影响，同其对MDA含量的影响一样,具明显剂量效应关系。　茶儿茶素制剂保健功效研究2.3茶儿茶素制剂抗氧化作用的功能研究结论实验结果表明：样品能明显增加SOD酶活性，降低丙二醛含量,表明茶儿茶素制剂抗氧化作用试验结果阳性。　茶儿茶素制剂保健功效研究3茶儿茶素制剂延缓衰老作用的功能研究——果蝇生存试验3.l材料与方法3.1.1样品性状及处理3.1.2剂量设计样品人体推荐剂量为每日1.8g/60kg本试验设四个剂量组，分别为含样品浓度0.01%、0.02%、0.06%和0.18%的培养基，每组用果蝇400只，雌雄各半。对照组给予普通玉米粉培养基。3.1.3实验动物OregonK野生型黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)3.1.4实验方法收集八小时内新羽化的果蝇成虫，乙醚麻醉下区分雌雄，随机分组，分别称重后进行试验。二周后，试验组分别给予含不同浓度样品的培养基。实验条件：气温24～260C，相对湿度50～60％．每四天更换新鲜配制的培养基一次。每两天观察果蝇生存数和死亡数，直到全部果蝇死亡为止。计算出半数死亡时间、平均寿命和平均最高寿命等三个指标。　茶儿茶素制剂保健功效研究3.2结果茶儿茶素制剂对果蝇生存试验的影响结果见表15-4。 表15-4.茶儿茶素制剂对果蝇生存试验的影响a由寿命最长的20只果蝇计算得出,*P<0.05，与普通对照组相比 76±2*70±4*56±10*45±12*554310106902002000.1872±270±4*49±1244±14*484310607102002000.0671±265±448±1342±12484110007002002000.0271±565±547±1242±1346419906502002000.0170±462±846±1340±1246391060640200200普通对照雌雄雌雄雌雄雌雄雌雄平均最高寿命（天）a平均寿命（天）半数死亡时间（天）平均体重（ug）样本数（只）茶儿茶素制剂浓度（%）由表15-4可见，茶儿茶素制剂0.06%、0.18％剂量组雄性果蝇和0.18％剂量组雌性果蝇的半数死亡时间与对照组相比均延长4天以上；0.06％、0.18％剂量组雄性果蝇和0.18%剂量组雌性果蝇的平均寿命及最高寿命与对照组相比，均有显著性差异（P<0.05）。　茶儿茶素制剂保健功效研究4讨论本研究结果表明：茶儿茶素制剂能明显增加SOD酶活性，降低MDA含量,根据卫生部规范结果判定的原则：过氧化脂质任一指标和抗氧化功能酶活性任一指标均为阳性，可判定该受试样品抗氧化动物实验结果阳性。因此，茶儿茶素制剂具有抗氧化作用,并可能具有延缓衰老的作用。本研究结果还表明：茶儿茶素制剂明显延长果蝇的半数死亡时间、平均寿命和最高寿命,根据卫生部发布的结果判定的原则：若果蝇生存试验,过氧化脂质和和抗氧化酶活性三项指标均为阳性，即可判定该受试样品具有延缓衰老作用。因此，茶儿茶素制剂具有的延缓衰老作用已获充分证实。3.3果蝇生存试验结论卫生部果蝇生存试验判定标准（卫生部，2003）是：①两个性别平均寿命指标均阳性。②单一性别平均寿命和最高寿命两项指标阳性或者平均寿命和半数死亡时间两项指标阳性，且与对照组相比半数死亡时间延长4天以上。符合上述二项之一者判定为阳性。本实验结果表明：样品茶儿茶素制剂能明显延长果蝇的半数死亡时间、平均寿命和最高寿命，延缓衰老作用功能检验阳性。当代茶圣：吴觉农92茶界泰斗：庄晚芳89、陈椽95、王泽农95、张堂恒80茶界元老：陈兴琰92、吴振铎91*、冯绍裘88、申屠杰99、张志澄88、张天福96+、陆松侯92+、庄任89+、阮宇成89*、陈观沧89、刘祖生*、童启庆*、杨贤强*、王镇恒、施兆鹏*、陈宗懋*(茶学院士)当代中国茶业科技奠基人当代茶圣：吴觉农92茶界泰斗：庄晚芳89*、陈椽95、王泽农95、张堂恒80*茶界元老：陈兴琰92、张天福98+、冯绍裘88、申屠杰98、张志澄88、陆松侯94+、庄任90+、阮宇成90*、陈观沧90+、茶寿108岁米寿88岁米=80+8=88岁茶叶可以延缓衰老、减轻老年多发病自由基学说和免疫功能衰退学说是二种重要的现行衰老学说，我们的研究除了证明茶叶的有效成分是一种卓越的自由基清除剂和免疫功能调节剂外，还进行家蝇的寿命试验，结果表明，茶多酚对家蝇的平均寿命比对照延长36.1-49.9％。并优于阳性对照绞股兰皂甙。可明显提高家蝇脑内SOD的活性和降低脂褐素的含量，因脂褐素在脑内的沉积与老年痴呆症有关。肿瘤、心脑血管病、糖尿病、玻璃体浑浊、白内障等是老年人的易发病，我们在临床上观察到茶多酚对上述病症的良好疗效，而且对“明目”有良好的作用。随着人口逐步老龄化，早老痴呆症也渐增，十分需要一些能保护脑组织的天然产物以改善老年人的生活质量。我们采用脑缺血再灌注、加速度、FeSO4一半胱氨酸体系、Fe2＋/F3+体系、脑皮层线粒体和脑突触神经质体损伤等几种脑损伤的病理模型证明了茶多酚对脑损伤均有一定的保护作用。茶对神经退化性疾病(如帕金森氏症、老年性痴呆等）有明显预防效果和疗效。1999年最早在以色列和美国开始进行研究，发表的文献量从2001年起明显增多。现在在日本、德国、韩国、新加坡等国也进行研究。儿茶素对神经退化性疾病的作用机理:神经退化性疾病的发生据认为与体内铁的吸收、输导、分布和贮藏有关。在退化的神经元的末端有铁的积累，在人脑中主要存在于黑质（substantianigra),苍白球（globuspallidus)和齿状回（dentategyrus).脑的这三个部位和神经退化性疾病有关。(SMandeletal,2006)1抗氧化作用；2儿茶素可透过人体的血-脑屏障，进入人脑，对铁产生螯合作用，效果和目前药效肯定的铁螯合剂—VK28相仿。S.Mandeletal,2006,Molecul.Nutr.Fd.Res.,2006,50:229-2343据美国研究结果，绿茶和红茶提取物（5-25μg/ml）即可产生神经保护效果。S.Bastianettoetal,2006,Eu.J.Neurosci.,23:55-644据日本研究结果，茶氨酸同样具有神经保护效应。TKakuda,2002,Biol.Pharm.Bull.,25:1513-15185据以色列用大鼠进行的研究表明，EGCG可以降低铁-调节的淀粉状蛋白先成物蛋白，起到治疗效果。LReznichenkoetal，2006，J.Neurochem.,97：527-536　茶儿茶素制剂保健功效研究（四）茶儿茶素制剂美容祛斑人体试食研究1材料和方法1.1样品1.2受试对象1.3试食方法1.4仪器与试剂2观察指标2.1安全性指标2.2功效性指标2.2.1颜面部黄褐斑面积大小检测2.2.2颜面部黄褐斑颜色深浅检测3试验数据统计4功效判定5结果5.1一般情况5.2试食前后两组黄褐斑变化情况5.2.1茶儿茶素制剂对黄褐斑颜色的影响5.2.2茶儿茶素制剂对黄褐斑面积的影响5.3茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用功效评定5.4茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用的安全性6讨论　茶儿茶素制剂保健功效研究1材料和方法1.1样品1.2受试对象100例黄褐斑受试者均为女性，年龄在18-65岁。1.3试食方法100例黄褐斑受试者，随机分为受试组和对照组。受试组食用茶儿茶素制剂胶囊，每日2次，每次3粒，每粒0.3克，连续观察30天。对照组食用安慰剂，剂量与受试组相同。1.4仪器与试剂　茶儿茶素制剂保健功效研究2观察指标2.1安全性指标2.2功效性指标2.2.1颜面部黄褐斑面积大小检测用标尺测量受试前后整个颜面部黄褐斑的面积(cm2)。2.2.2颜面部黄褐斑颜色深浅检测（卫生部，2003）按照中国科学院地理研究所设计研制，测绘出版社1992年出版的《实用标准色卡》(第一版)中的棕色(Y+M+BK即黄+晶红+黑的叠色)色卡为黄褐斑深浅的判断标准：I度(15、20、5)，Ⅱ度(30、40、10)，III度(40、60、15)。3试验数据统计4功效判定（卫生部，2003）对试食前后黄褐斑颜色积分和面积变化进行统计，同时计算有效率。色卡Ⅰ度、Ⅱ度、III度分别计1分，2分和3分。功效判定标准有效：黄褐斑颜色下降I度，面积减少>10％，且不产生新黄褐斑；无效：黄褐斑颜色及面积无明显　茶儿茶素制剂保健功效研究　茶儿茶素制剂保健功效研究5结果5.1一般情况共观察100例，均为女性。其两组观测前一般情况比较见表1。表1.试食前一般情况比较（s）从表中可见，试食前两组各项指标相比差异无显著性，具有可比性。38.72±21.442.12±0.6638.28±5.6850受试组38.26±19.662.02±0.7438.66±5.9950对照组黄褐斑面积（cm2）黄褐斑颜色（积分）年龄例数（n）分组　茶儿茶素制剂保健功效研究　茶儿茶素制剂保健功效研究5.2试食前后两组黄褐斑变化情况5.2.1茶儿茶素制剂对黄褐斑颜色的影响两组黄褐斑颜色变化情况见表2和图1。**P<0.01受试组与对照组相比；##P<0.01受试组试食后与试食前相比；，34.97±20.16**#38.72±21.4450受试组37.83±18.5638.26±19.6650对照组试食后试食前例数(n)组别由表2及图1可见，人体试食后茶儿茶素制剂组黄褐斑颜色积分平均下降0.60度，平均下降幅度达28.3%，与试食前比较差异有极显著性(P<0.01)，与对照组比较差异也有极显著性(P<0.01)。（2.02%）结果表明茶儿茶素制剂对黄褐斑颜色减退效果非常显著。　茶儿茶素制剂保健功效研究5.2.2茶儿茶素制剂对黄褐斑面积的影响两组黄褐斑面积变化情况见表16-3和图16-2。34.97±20.16**#38.72±21.4450受试组37.83±18.5638.26±19.6650对照组试食后试食前例数(n)组别**P<0.01，自身对照（受试组试食后与试食前相比）；#P<0.05，组间对照（受试组与对照组相比）由表3及图2可见，人体试食后茶儿茶素制剂组黄褐斑面积平均减少3.75±cm2，与试食前比较差异达极显著性水平(P<0.01)，与对照组比较差异也有显著性(P<0.05)。结果表明茶儿茶素制剂对黄褐斑面积减少效果显著。　茶儿茶素制剂保健功效研究5.3茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用功效评定茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用功效评定见表16-4。表16-4.茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用功效表16-4可见，人体试食后茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用功效50例中有28例有效，总有效率达56%，而对照组仅6例，相比较差异达极显著水平(P<0.01)。结果表明茶儿茶素制剂对黄褐斑效果显著。　茶儿茶素制剂保健功效研究56.00**22**28**50受试组12.0044650对照组总有效率%无效有效例数(n)组别**P<0.01，组间对照（受试组与对照组相比）　茶儿茶素制剂保健功效研究5.4茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用的安全性茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用的安全性检查见表16-5。 表16-5茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用试验前、后两组血象、血脂、血糖、肝肾功能的变化（s）Table16-5Comparisonofhemogram,bloodlipid,bloodglucose,hepaticfunctionandRenalfunctionbeforeandafteradministrationteacatechinspreparation5.4茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用的安全性茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用的安全性检查见表5。表5茶儿茶素制剂祛黄褐斑作用试验前、后两组血象、血脂、血糖、肝肾功能的变化食用茶儿茶素制剂一个月，两组血象、肝肾功能各项检测指标均在正常范围内，说明茶儿茶素制剂对机体健康无损害。82.86±8.7082.23±8.3183.20±7.9281.23±8.92肌酐(μmo1/L)4.92±0.594.95±0.594.90±0.604.82±0.60尿素氮(mmo1/L)20.12±4.0921.14±4.5218.76±3.5821.38±4.17谷草转氨酶(μ/L)21.66±8.2721.92±9.4120.44±7.8422.16±9.00谷丙转氨酶(μ/L)42.78±2.0343.11±1.7043.65±1.7343.59±1.88血清白蛋白(g/L)72.24±2.3171.85±1.9472.83±1.9372.55±2.03血清总蛋白(g/L)4.74±0.504.79±0.464.88±0.454.82±0.48血糖(mmo1/L)1.66±0.241.62±0.261.61±0.221.59±0.21高脂蛋白(mmo1/L)1.27±0.781.30±0.821.09±0.201.05±0.20甘油三脂(mmo1/L)4.42±0.464.43±0.524.53±0.594.47±0.54胆固醇(mmo1/L)118.02±11.70118.58±12.24120.00±9.85118.16±9.91血红蛋白(g/L)5.68±1.485.84±1.435.27±1.225.30±1.25白细胞（×109/L）4.22±0.434.20±0.464.31±0.404.28±0.43红细胞（×1012/L）试验后试验前试验后试验前对照组（n=50）受试组（n=50）项目6讨论本研究100例黄褐斑受试者，按黄褐斑颜色、面积情况随机分为受试组和对照组(各50例)，分别食用茶儿茶素制剂和安慰剂，每日2次，每次3粒。30天后结果表明：受试组连续食用茶儿茶素制剂30天，黄褐斑颜色积分下降与试食前比较差异有显著性(P