网织红细胞计数SOP（手工法）

文件编号: xxxx医院 XXXX 临床检验实验室 版序:xxxx 页码:第1 页，共2 页 网织红细胞计数(Ret) [原理] 网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构。 [标本的收集与处理] 1，用EDTA-K2 0 .2ul抗凝静脉血1ml，轻轻摇动抗凝。凝集，溶血，血量小 于0.5 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本，拒收。 2，直接采集未稍血液。 [操作步骤] 一，百分计数; (一)试剂: 1，10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液:煌焦油蓝1g，枸橼酸钠0.4g，氯化钠0.85g 溶于双蒸馏水100ml中，过滤后备用; 2，10g/L煌焦油蓝ACD溶液:取ACD保养液(血库用)20ml，用1mol/L NaOH调至PH 7.5左右，加入研细的煌焦油蓝200mg，溶解后过滤备用。 (二)方法: 1，于小试管中滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液或煌焦油蓝ACD溶液。 2，加入末梢血2滴于上述试管中，混匀。 3，静置15--20min后，取用1滴制成薄片。 4，油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数，以百分率或绝对值。 (三)质量控制: 1，活体染色时间不能过短，室温低时，放37 C温箱。 2，最好制片2张，每张计数500个红细胞，避免分布不均匀引起的误差。 涂片要薄而均匀，不使红细胞重叠。 3，为计数方便，可于目镜中放一中间有孔之硬纸片，缩小视野，便于计数。 4，试剂定期重配，以免变质沉淀。 5，用瑞氏--姬姆萨染液复染后可使网织红细胞计数结果减少。 6，因操作误差大，不宜用波片直接染色法。 7，网织红细胞也可用荧光染色或流式细胞仪计数。 8，抗凝血标本应尽可能快地制片。 (四)参考范围: 成人:0.005--0.015 ( 0.5%--1.5% ); 新生儿:0.03--0.06 ( 3%--6% ) 文件编号: xxxx医院 XXXX 临床检验实验室 版序:xxxx 页码:第2 页，共2 页 网织红细胞计数(Ret) 二，网织红细胞绝对值计数 网织红细胞% X 红细胞/ul 网织红细胞/ul=------------------------------ 100 参考值: ( 24--84 ), 10E9/L( 2.4--8.4 万 /ul ) [临床意义] 1，增加:示骨髓造血功能旺盛，各型贫血均可增多，溶血性贫血增加尤为 显著，恶性贫血或缺铁性贫血应用维生素B12或供铁质后显著增多，表示 有疗效。 2，减少:再生障碍性贫血。