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快速病理切片制作

2017-10-20 6页 doc 18KB 49阅读

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快速病理切片制作快速病理切片制作 苏州卫生职业技术学院 病理检验教研室 史 恩 溢 第 六 单 元 总目录 ? 快速病理切片是指在尽可能短的时间内将小块组 织制成病理切片,以便迅速作出病理诊断的过程 ? 是临床外科(包括妇产科、五官科等手术科室) 手术中的一项重要的辅助工作 ? 常用的方法主要有快速石切片和冰冻切片等 ? 常规的病理检验一般从取材开始需24,48小时完 成诊断 ? 快速病理诊断时,病人和医生在手术过程中等待病 理诊断结果进而决定下一步手术措施,这就需要快 速病理切片 ? 一般从取材后开始,快速石...
快速病理切片制作
快速病理切片制作 苏州卫生职业技术学院 病理检验教研室 史 恩 溢 第 六 单 元 总目录 ? 快速病理切片是指在尽可能短的时间内将小块组 织制成病理切片,以便迅速作出病理诊断的过程 ? 是临床外科(包括妇产科、五官科等手术科室) 手术中的一项重要的辅助工作 ? 常用的方法主要有快速石切片和冰冻切片等 ? 常规的病理检验一般从取材开始需24,48小时完 成诊断 ? 快速病理诊断时,病人和医生在手术过程中等待病 理诊断结果进而决定下一步手术措施,这就需要快 速病理切片 ? 一般从取材后开始,快速石蜡切片应30,40分钟 出片,快速冰冻切片应15,20分钟出片 ? 常规病理切片从取材后需经固定、脱水、透明、 浸蜡、包埋、切片、烤片和染色等步骤 ? 一般(至少)补充固定1h、脱水2h、透明15min、浸 蜡30min、包埋30min 、烤片30min ? 组织的大小和厚薄、温度、所用试剂种类和浓度、 处理方法等均可改变制片所需的时间 ? 快速石切片主要是通过提高处理的温度、试剂的浓 度,改变试剂的种类、处理方法等,主要缩短了固 定、脱水、透明、浸蜡、包埋和染色的时间,从而 可以较快地制成切片 ? 冰冻切片省却了脱水、透明、浸蜡、包埋等步骤, 切成薄片后再固定使时间大大缩短,冰冻切片组织 材料新鲜,容易着色,故染色时间亦可适当缩短, 制片速度更快 ? 快速石蜡制片,在临床病理诊断工作中应用较多, 是一种效果较好的快速切片方法,目前在我国普遍 使用 ? 利用此技术能在较短时间内制出切片,及时作出诊 断,是许多医院病理科的重要工作 ? 快速石蜡制片要求是“快”、“好”、“安全” ? 快速石蜡制片过程中所应用的试剂,大多为低沸点 易燃药品,如果一旦与火源相遇,则易引起燃烧; 有些试剂毒性较大,在操作过程中要注意防护 ? 有毒试剂(气体)应在抽风设备下操作;易燃试剂 操作时应远离火源 ? 凡能进行常规石蜡切片的也可制 作快速石蜡切片,只需增加一个 电炉或水浴锅,也可自制加温器 ? 使用超声波组织快速处理仪效果 更佳 ? 先用20,福尔马林液固定, 1,2min,使组织有一定硬 度,进行修(平)整削薄, 再固定1,2min ? 一般是新鲜标本,大小、厚度 1cm×1cm×,0.2cm ? 固定作用是很重要的关键 ? 一般采取加热二重固定法,温度控制在85?左右 ? 将丙酮脱水的组织投入已熔化 之石蜡内,加热(85?左右) ? 一般3,4min,即可进行包埋 ? 当组织表面气泡消失、下沉即 说明浸蜡过程已完随后 ? 将固定好的组织投入纯丙酮(30ml),加热(85?左右) ? 丙酮吸水作用强,对组织收缩变硬较显著 ? 一般3,5min或待30ml丙酮挥发尽 ? 或当组织在丙酮中轻飘上浮、颜色灰白即可 ? 因丙酮可溶解石蜡,故不需再行透明 ? 固定、脱水、浸蜡过程的温度一般控 制在80,90? ? 可用超声波组织快速处理仪来处理, 通过超声波来加速组织细胞与试剂的 分子运动,达到固定、脱水、浸蜡的 目的 ? 具有切片整体紧密、操作安全方便, 组织收缩度小,细胞结构清洗,着色 效果好 ? 蜡块稍冰冻后即可按常规方法进 行切片 ? 为防止染色时脱片,附贴前应先 在载玻片上涂胶(蛋白甘油或白 胶水) ? 将事先做好的空蜡块,用镊子加温后将蜡块表面融 化(面积与组织一致,深度约2mm,注意不要让蜡液 流掉),把组织平整地放入蜡块内,待变蜡液稍凝固, 立刻放入冷水中压平 ? 快速石蜡切片的H-E染色与常规H-E 染色基本相同 ? 为了缩短时间,有些非主要步骤可 省略,增加染液浓度或加温也可缩 短染色时间 ? 将附贴好的切片,用吸水纸轻压(吸去水分并使组 织与载玻片贴牢) ? 用酒精灯均匀加热切片,不停得移动切片,注意观 察,待石蜡熔化(由白色变为透明)即离开火焰, 冷却片刻(使水分蒸发) ? 再次烤化石蜡即可入二甲苯脱蜡 快速石蜡切片 常规石蜡切片 取材 1×1×(,)0.2cm 1.5×1.5×0.2,0.3 固定 20%福尔马林,85? 5min 10%福尔马林,45? 1h 脱水 纯丙酮,85? 4min 乙醇(低?纯),45? 2h 透明 不需 — 二甲苯,45? 15min 浸蜡 石蜡,85? 4min 石蜡,65? 30min 包埋 利用空白蜡块 数min 常规、冷却较慢 30min 切片 常规,需涂胶 数min 常规,不需涂胶 数min 烤片 火烤 数min 烤箱或电吹风,60,70? 1h 染色 H-E 数min H-E 数min 合计 30,40min ,5h ? 冰冻切片在组织学技术中应用广泛,对临床病人的 术中快速病理诊断尤其具有重要意义,目前快速病 理诊断的趋势 ? 冰冻切片制作时不经各级乙醇的脱水、二甲苯的透 明等过程,故对脂肪和类脂的保存较好,常用于脂 肪染色和神经组织髓鞘的染色 ? 组织化学染色等也常用冰冻切片 ? 新鲜组织、甲醛固定的组织和低温 冷藏的组织块等用于于冰冻切片 ? 大小、厚度以1cm×1cm×0.3, 0.4cm为宜 ? 恒冷箱切片机种类较多,常根据实际情况加以选用 ? 一般调节温度为-25?左右 ? 将带组织并涂有OCT的组织固着器放于到速冻台上 ? 冻结后装到机头上,调整组织切面于刀刃平行并贴 近刀刃,将厚度调到适当位置后,进行切片 ? 切出的切片直接用载玻片帖附 ? 固定、水洗后可直接染色 ? 染色方法可按常规H-E染色或快速 石蜡 H-E染色 ? 略 ? 略 ? 略
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