三黄片总黄铜含量测定

广西中医药大学药学院实验 课程名称： 药物分析学 实验名称： 三黄片中总黄酮的含量测定 授课老师： 潘小姣 授课时间： 2012-10-21 年级： 2009级 专业： 中药学 姓名： 黄艳萍 学号： 0909013 成绩： 一、目的要求 1. 熟悉紫外可见分光光度法应用于测定中药制剂中总黄酮含量的原理和操作方法。 2. 熟悉紫外-可见分光光度法测定的计算方法。 二、实验原理 黄酮类物质在254-260nm波长范围内显色。加入亚硝酸钠后被还原，和铝离子络合形成络合物在碱性条件下显红色，并发生红移，在500nm处有最大吸收。吸光度与芦丁的浓度呈线性关系，所以根据测定吸光值曲线可以计算样品总黄酮含量。 三、仪器和试药 仪器 超声波清洗器 厂家：昆山试超声仪器有限公司 型号：KQ5200B 紫外可见分光光度计 厂家：美国安捷伦 型号：8453 编号：20020406 试剂：55%乙醇、5%NaNO2、10%Al(NO3)3、4%NaOH 药剂：三黄片（无） 四、实验内容 1. 对照品溶液的制备 精密称定芦丁对照品适量，置于50ml量瓶中，加55%乙醇至刻度，得0.6034mg/ml的对照品溶液，摇匀，备用。 2. 供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣，精密称定有2.4813g，研细，取约0.15g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入乙醇10ml，密塞并静置10min，而后超声处理15min，虑过，取续滤液，即得。 3. 测定 分别精密吸取上述芦丁对照品溶液和供试品溶液各1ml,分别置25ml量瓶中，加55%乙醇6ml，加5%NaNO2溶液1ml,摇匀，室温放置6min,再加入10%Al(NO3)3溶液1ml，摇匀，室温放置6min，加入4%NaOH溶液10ml，加55%乙醇至刻度，摇匀，室温放置15min，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在510nm处测定吸收波度。 五、实验结果 一）实验图形 对照品 # Name Abs<510nm> 0.26847 第一组 # Name Abs<510nm> 0.71379 第二组 # Name Abs<510nm> 0.68104 二）计算 其中W取样1=0.1499g,W取样2=0.1509g,C对照=0.6034mg/ml，A对照=0.26847，A样1=0.71379 ，A样2=0.68104，所以可得出结果如图： 取样片重W 平均片重W 吸光度A 含量 对照 0.26847 取样1 0.1499g 0.24813g 0.71379 26.5556mg 取样2 0.1509g 0.24813g 0.68104 25.2697mg 六．分析 1.在求平均片重时因为是取一个同学的且我们自己在去包衣时很干净，就是我们的总重偏重了，忽略其他中间因素，总重偏重可使结果偏高。 2. 在多种样品称量中没有保证移液管的全部干燥，带有少量的水，稀释了各体积，造成浓度偏小，使结果偏小。 3.一般反应会不完全，存在只络合了其中一个的络合物的现象，使得红移偏小，可以影响实验峰的吸收。 4.无法确定三黄片中其他成分是否与硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠系统发生反应影响峰的吸收造成结果的不确定因素。 七．思考题 1.分析亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法的局限性？ 答:1）某些具有邻二酚羟基类化合物也会和铝离子络合显色，影响结果； 2）某些黄酮类成分与铝离子络合，不在500nm处有最大吸收，影响测定结果，使测定结果偏小； 综上，用亚硝酸钠—硝酸铝—氢氧化钠对成分不明确的待测物进行含量测定，结果不 准确，该方法用做总黄酮含量测定专属性不强。 _1412720296.unknown _1412723493.unknown