高效液相色谱法测定七维牛磺酸口服溶液中维生素A和维生素E的含量

药物分析杂志Chin j Pharm Anal 2008，28(10) 一 l747一 高效液相色谱法测定七维牛磺酸口服 溶液中维生素 A和维生素 E的含量 黄铭铸，许波 (贵州省药品检验所 ，贵阳 55ooo4) 摘要 目的：建立高效液相色谱法测定七维牛磺酸口服液中维生素 A和维生素E的含量。方法：色谱柱为Waters C-s(200 mm x4．6 mm，5 m)；流动相：为甲醇 一水(98：2)；流速为 1．0 mL-rain～；检测波长为 285 nm；柱温为39 oC。结果：精密度和稳 定性良好；维生素 A进样量在0．0534～0．3201 Ixg范围内与峰面积呈良好的线性关系，r：0．9995，平均回收率为97．7％；维生 素 E进样量在 2．486～31．08 txg范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=1．000，平均回收率为 99．1％。结论：本方法简便、专 属，重复性好，可用于七维牛磺酸lZl服液中维生素 A和维生素 E的含量测定。 关键词：高效液相色谱法；七维牛磺酸口服溶液；维生素 A；维生素 E 中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：0254—1793(2008)l0—1747—03 HPLC determination of vitamin A and vitamin E in Qiweiniuhuangsuan oral solution HUANG Ming—zhu，XU Bo (Guizhou Institute for Drug Control，Guiyang 550004，China) Abstract Objective：To establish the method for the determination of vitamin A and vitamin E in Qiweiniuhuang- suan oral solution．Method：Adopted HPLC method with Waters C I 8(200 mm×4．6 mm，5 m)column；methanol — water(98：2)as the mobile phase：the flow rate was 1．0 mL·rain ；The detection wavelength was 285 nm and the column temperature was 39℃ ．Resuits：The precision and stability were fine．The calibration curves were linear in the range of0．0534～0．3201 Ixg(r=0．9995)for vitamin A and 2．486—31．08 g(r=1．000)for vitamin E． The average recovery of vitamin A was 97．7％ and that of vitamin E was 99．1％ ．Conclusion：The method iS con— venient，selective and reproducible for determ ination of vitamin A and vitamin E． Key words：HPLC；Qiweiniuhuangsuan oral solution；vitamin A；vitamin E 七维牛磺酸口服溶液是由七种维生素及牛磺酸 组成的口服溶液剂，其所含 7种维生素为维持机体 正常代谢和身体健康必不可少的主要物质，其中的 维生素 A及维生素 E为主要成分。原质量中 未制定维生素 A及维生素E含量测定方法；经查阅 文献，制剂中分别测定维生素 A与维生素E的含量 方法已有报道 。¨ 。为有效控制七维牛磺酸口服液 中维生素 A及维生素 E的含量，经过实验摸索建立 了高效液相色谱法同时测定维生素 A和维生素 E 的含量，方法简便，结果准确可靠。 1 仪器与试药 日本岛津 LC一10Avp液 相色谱 仪，SIL一 第一作者 Tel：(0851)6807060—345；E—mail：gysmzhuang@21cn．com 10ADvp自动进样器，LC一10Atvp输液泵，CTO— LC10Asvp柱温箱，SCL—LC一10Avp紫外 一可见检 测器和CLASS—VP数据处理软件；美国TSP液相色 谱仪，P一4000输液泵，uV一3000一DAD检测器和 TSP—Pl000色谱工作站。 维生素 A醋酸酯对照品：厂家提供，含量为 100．0％；维生素E对照品：中国药品生物制品检定 所(批号 10062—0007)；异丙醇(分析纯)；甲醇(色 谱纯)；水(重蒸水)；七维牛磺酸口服液：厂家生产 (批 号 ：20050903，20050904，20050910，2005091 1， 20050906) 一 1748一 药物分析杂志 Chin J Phalln Anal 2008，28(10) 2 色谱条件 色谱柱：Waters C18柱 (200 mm×4．6 Him，5 m)；流动相：甲醇 一水 (98：2)；流速：1．0 mL· rain～；检测波长：285 nm；进样量：20 L，柱温：39 ℃，理论塔板数按维生素 A峰计算，应不低于3000， 在以上条件下，维生素 A与维生素 E峰的分离良 好，色谱峰保留时间分别为 7 min及 21 rain左右。 阴性对照明，对样品的测定无干扰。色谱图见图 1。 L 图1 HPLC色谱图 Fig 1 HPLC chromatograms A．阴性对照(negative sample without vitamin A and vitamin E) B．维 生素 A对照品(vitamin A reference substance) C．维生素 E对照品 (vitamin E reference substance) D．样品(sample) 3 溶液的制备 3．1 对照品溶液 取对照品维生素 A醋酸酯及维 生素E适量，精密称定，用异丙醇分别配成维生素A 醋酸酯浓度为 10．67 Ixg·mL～、维生素 E浓度为 1．243 mg·mL一的溶液，作为对照品溶液。 3．2 供试品溶液 直接取七维牛磺酸口服液作为 供试品溶液。 3．3 阴性对照溶液 按处方比例及制备工艺，配制 不含维生素 A及维生素 E的阴性样品，作为阴性对 照溶液。 4 方法与结果 4．1 线性关系考察 分别精密量取维生素 A醋酸 酯对照品溶液5，10，15，20，25，30 及维生素E对 照品溶液2，5，10，15，20，25 IxL，注入液相色谱仪中 测定。以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标进行回 归，维生素 A及维生素E回归方程分别为： ，，：4．595 x 10 X 一1．900×10 r=0．9995 Y：1．107×10 X +8．592×10 r=1．000 结果表明，维生素 A及维生素 E进样量分别在 0．0534～0．3201，2．486～31．075 Ixg范围内线性关 系良好。 4．2 精密度试验 分别精密量取维生素 A醋酸酯 及维生素 E对照品溶液各20 L，注入液相色谱仪， 重复进样 7次，测定峰面积，计算 RSD分别为 0．59％和0．079％ 。 4-2 重复性试验 取同一批样品(批号20050903)，按 样品测定方法分别测定 5次，维生素 A的平均含量 为 101．4％，RSD为 0．78％；维生素 E平均含量为 96．3％，RSD为0．87％，表明方法的重复性较好。 4．3 稳定性试验 取供试品溶液分别在0，1，2，5， 8，12 h测定维生素 A及维生素 E的峰面积，结果 RSD分别为0．71％和 0．22％。表明供试品溶液在 12 h内基本稳定。 4．4 定量限 以信噪比为 10：1，维生素 A醋酸酯 的定量限为 1．6 ng；维生素E的定量限为 1．2 ng。 4．6 加样回收率试验 精密量取已知含量的样品 (批号 20050903)1．5，2．0，2．5 mL，各3份，置5 mL 量瓶中，精密加入 1 1．36 lxg·mL 的维生素 A醋酸 酯对照品溶液各 1．5，2．0，2．5 mL，加异丙醇至刻 度，摇 匀；另精 密量 取 已测含 量 的样 品 (批 号 20050903)3．0，4．0，5．0 mL，各 3份，置 10 mL量瓶 中，精密加入 1．381 mg·mL 的维生素 E对照品溶 液各 3．0，4．0，5．0 mL，加异丙醇至刻度，摇匀。精 密量取上述各溶液20 L，注入液相色谱仪，按上述 色谱条件进行测定。结果维生素 A醋酸酯及维生 素 E的加样 回收率 (T／,=9)分别 为 97．7％ 和 99．I％ 。 4．7 样品测定 精密量取不同批号的供试品溶液 与对照品溶液各20 ，，按上述色谱条件测定峰面 积，外标法计算含量，结果见表 1。 表 1 七维牛磺酸口服液中维生素 A及维生素 E的含量测定结果(标示量％，n=3) Tab 1 Determination of vitamin A and vitamin E in Qiweiniuhuangsuan oral solution(1abded amount％。n=3) 5 讨论 5．1 通过二极管阵列光谱扫描，表明两主峰光谱均 一 ，为纯峰。在此条件下维生素 A紫外最大吸收波 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2008，28(10) 长为285 nm，考虑到维生素 A的含量较少，故选择 285 llm为测定波长。 5．2 本实验方法采用样品不经提取分离直接进样 分析，方法简便易行，结果准确可靠，重复性好。 参考文献 1 J1ANG Ye(蒋晔)，uu Hong—ju(刘红菊)，HAO Xiao—hua(郝晓 花)．RP—HPLC determination of nine watel~一soluble vitamins(反 相离效液相色谱法同时测定 9种水溶性维生素)．Chin J Pharm Anal(药物分析杂志)，2005，25(3)：339 2 DENG Fu—liang(邓富良)，ZHOU Ping(周平)，CHEN Ben—mei (陈本美)，et a1．Determination of vitamin A，D2，E in multivitamin and muhimineral capsules by HPLC assay(高效液相色谱法测定维 康胶囊中维生素 A，D2，E的含量)．Chin Pham J(中国药学杂 志)，2004，39(10)：784 (本文于2008年8月 18 13修改回) ● II◆ 一● ● ● ‘● ● it◆ ● ● ◆ ● ．O- ◆ ● ”● ● 一-● ◆ ◆ ● ◆ ● ● ‘● I；I◆ ● ”◆ ◆ I 11 4P- ● li p◆ 一◆ 4b- ◆ ’● ● 1·◆ 『● ● ◆ ’● ◆ 全国药包材检验工作研讨会通知(第二轮) 在国家药包材实验室建设财政专款的大力帮助下，截至2007年底全国31个省级药检所均增加了 药包材的检验内容，国家药包材技术监管的主要框架已经形成，同时江苏、安徽、河北等省近年开展了辖 区内尝试性的包材监督抽验工作，取得了良好的效果，为药包材的技术监管打下了一定的基础。 为进一步提高药品包装的检测水平，加强药包材实验室之间的技术交流和相互联系，中国药品生物 制品检定所将在北京召开全国药包材检验工作研讨会，会议时间定于2008年 11月20～21日，会议地 点北京。欢迎各级药检所有关人员积极参会。现就会议有关事宜通知如下： 一 、会议主要内容(以当天会议日程为准)： 1、“十一五”国家科技支撑计划重点项目“药用新辅料临床前安全性评价及包装材料的相容性安全 研究”的工作内容与研究思路 2、药包材国家标准体 系的现状 3、药包材微生物限度的检测 4、药包材鉴别用红外光谱图集起草情况 5、药包材技术监管模式 6、药包材检验中的注意事项 7、药包材玻璃产品的检测及发展趋势 8、药用胶塞与药品的相容性研 究 9、药包材的审评程序及审评技术要点 10、主题讨论(药包材监管检验中存在的问题及对策) 二、注意事项： l、11月19日报到，请准时参会。 2、参会代表交通费、食宿费自理，会议统一安排食宿。 为保证会议顺利召开，务请您看到通知后，于2008年 11月8号前以传真或电子邮件的形式告知参 会人员的信息。 联系人：王峰、汤龙；电话：010—67095696；传真：010—67052750E—mail：wangf@nicpbp．org．en，tan· glong 77@ hotmail．corn 详情请浏览中检所网站：WWW．nicpbp．org．cn