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菲和芘对蚯蚓(Eisenia fetida)细胞色素P450和抗氧化酶系的影响

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菲和芘对蚯蚓(Eisenia fetida)细胞色素P450和抗氧化酶系的影响 第26卷 2007年 第2期 3月 环境化学 ENVIRONMENTALCHEMISTRY V01.26.No.2 March2007 菲和芘对蚯蚓(肪口咒施知砌)细胞色素P450和 抗氧化酶系的影响水 张 薇1,2 宋玉芳1,3一 孙铁珩1,3 宋雪英1’3 周启星1,3 郑森林1,2 (1 中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验室,沈阳,110016;2中国科学院研究生院,北京,100039; 3沈阳大学沈阳环境工程重点实验室,沈阳,lO0041) 摘要研究了菲和芘在单一低剂量污染胁迫下对蚯蚓(...
菲和芘对蚯蚓(Eisenia fetida)细胞色素P450和抗氧化酶系的影响
第26卷 2007年 第2期 3月 环境化学 ENVIRONMENTALCHEMISTRY V01.26.No.2 March2007 菲和芘对蚯蚓(肪口咒施知砌)细胞色素P450和 抗氧化酶系的影响水 张 薇1,2 宋玉芳1,3一 孙铁珩1,3 宋雪英1’3 周启星1,3 郑森林1,2 (1 中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验室,沈阳,110016;2中国科学院研究生院,北京,100039; 3沈阳大学沈阳环境工程重点实验室,沈阳,lO0041) 摘要研究了菲和芘在单一低剂量污染胁迫下对蚯蚓(E如en沉向以。)体内细胞色素P450酶系和抗氧化酶 系的影响.通过滤纸接触染毒法,检测蚯蚓细胞色素P450含量以及超氧化物歧化酶(s0D)、过氧化物酶 (POD)和过氧化氢酶(cAT)的活性.结果明,在供试浓度范围内,蚯蚓体内细胞色素P450含量和三种 抗氧化酶活性均对毒物产生了不同程度的响应.菲和芘在蚯蚓体内的代谢诱发了细胞色素P450总含量的增 加,且在此过程中有活性氧自由基产生.不同酶对毒性效应响应的域值不同,其敏感性大小为:P450> s0D(POD)>cAT.根据四个指标对污染物浓度响应的域值不同,可将四者联合应用互为补充作为一套 生物标记物体系,以满足污染物不同暴露浓度下土壤的毒理诊断,增强指示的敏感性和有效性. 关键词菲,芘,蚯蚓(眈肌缸向以口),细胞色素P450,抗氧化酶,生物标记物. 目前,应用蚯蚓体内一些敏感的生理和生化指标作为污染物暴露的标记物已成为研究的热点,其 中细胞色素P450以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(cAT)抗氧化酶系的 生物指示效应,已在水生和陆生污染暴露环境中不同生物体内得到了证实,并且受到了广泛的关 注‘1-73. 对菲和芘毒性效应的研究多集中于蚯蚓急性毒性和高等植物的毒理试验等旧_10。,例如选取细胞 色素P450酶系中的乙氧基异吩唑酮一脱乙基酶(EROD)活性和抗氧化酶系中的过氧化氢酶(cAT)活性 来指示较高浓度芘暴露下蚯蚓的生化响应,但是在供试浓度内未检测到EROD活性,而cAT活性也 未发生变化,只是在芘浓度较高(640mg·蝇。)的情况下cAT活性略有下降¨1|. 本实验以蚯蚓为供试生物,以细胞色素P450总含量和抗氧化酶系中的sOD,POD和cAT活性为 指标,通过滤纸接触试验,研究菲和芘在单一低剂量污染胁迫下蚯蚓的生理响应.探讨适合土壤多环 芳烃亚致死浓度污染诊断的生物标记物,为土壤毒理诊断提供新的手段.进而,为解释蚯蚓代谢有机 污染物的可能生理机制提供理论依据. 1材料与方法 1.1滤纸接触诱导试验 蚯蚓赤子爱胜(E蠡en如.角i如)购白天津蚯蚓养殖中心.选用2—3月龄,体重350—450mg,带有 环带的健康蚯蚓为供试品. 滤纸接触试验参照国际方法组织草案OEcD(1984)指南建立¨2|.采用长7cm,直径4cm的 平底玻璃管,玻璃管内壁衬铺滤纸,滤纸大小以覆盖玻璃管且不重合为准.以10的指数从10。2 到10~mg·ml一5个浓度和1个空白.将菲和芘溶于丙酮并稀释至所需浓度系列.在每一个试验瓶 中均加入1ml丙酮(空白)或所需浓度的菲和芘溶液,自然挥发2h后,用1ml蒸馏水润湿滤纸.每个 试验瓶中均加入1条蚯蚓(400mg±50mg),再用塑料薄膜封住玻璃瓶口,于20℃±1℃生化培养箱中 避光培养.48h后,将蚯蚓取出,测定蚯蚓体内细胞色素P450含量和抗氧化酶活性.为减少样本带 2006年2月26习收稿. $国家自然科学基金项目(20337010,20577056);国家重点基础研究发展(973)项目(2004CB418503);沈阳大学沈阳环境工 程实验室及中国科学院沈阳应用生态研究所海外留学基金项目.+$通讯联系人,E—mail:Songyufartg@iae.ac.cn 万方数据 2期 张薇等:菲和芘对蚯蚓(E沁凡缸向i如)细胞色素P450和抗氧化酶系的影响 203 来的误差影响,每个处理组和对照组均选择8条蚯蚓染毒,随机两两组合,每组测定3次. 1.2生化测定 将蚯蚓在4℃甘油溶液(20%)中浸泡lh,移至冰冷的0.15m01.1。1KCl溶液中,将整条蚯蚓用剪 刀分割破碎后,放置在过滤装置(漏斗、三角杯和纱布组合)中用冰冷的O.15m01.1。1Kcl溶液清洗体 内血液及黄色体液,直至清洗液呈无色为止.再将蚯蚓移入装有6ml匀浆缓冲液(250mm01.1。1蔗 糖,50mm01.1。Tris,pH7.5,1mm01.1‘1D1Tr,lmm01.1。1EDTA)的25ml离心管中,内切式组织 匀浆器以8000r·min。1匀浆30s.匀浆物通过纱布过滤,将滤液装入10ml的离心管中,于低温 (4℃)超速离心机上以14700r·min一离心30min.所得上清液一部分用于测定蚯蚓的抗氧化酶活性, 另一部分制备微粒体,于4℃以46500r·min。1再次离心90min.所得沉淀用少许缓冲液重新悬浮, 逐滴加入20%的胆酸钠溶液至终浓度为0.5%,同时在冰浴中轻轻搅拌30min,以38000r·min。1 (4℃)离心45min,小心收集上清液.取lml上清液用缓冲液稀释7倍,取1ml测定蛋白含量,其余 部分用于紫外分光光度计测定P450总量. 蚯蚓体内P450含量的测定参照0mura和sato的方法¨3。,应用连二亚硫酸钠还原细胞色素P450 的cO差光谱进行.抗氧化酶活性采用紫外一可见分光光度计测定.SOD活性采用氮蓝四唑法¨1测定, 单位为u·mg。1Pr,一个酶活力单位(u)以抑制NBT光化学反应的50%来表示.POD活性的测定, 采用愈创木酚法¨4|,单位为△A盯。mg。1Pr·min~,以每分钟吸光度的变化表示酶活力的大小.cAT 活性的测定采用徐镜波等¨纠的方法,一个酶活性单位定义为:25℃,100s内使H:0:分解一半时的酶 蛋白量. 2结果与讨论 2.1 菲和芘对蚯蚓体内细胞色素P450的影响 如图1所示,当菲浓度低于10~mg·ml。1时,蚯蚓体内P450含量随菲浓度的增加呈上升趋势, 并在10一mg·ml‘1样品中达到最大值,为对照组的1.58倍;但当菲增至10~mg·ml。1时,P450含 量与对照组相当(为对照组的1.1倍),各样品组(10~mg·ml一除外)P450含量与对照组相比差异显 著(p o.05),而当菲浓度为10~mg·ml。1时,SOD的活性显著低于对照组,仅为对照组的70%(_p< 0.01),并且随着菲暴露浓度的增加,s0D有升高趋势,最大诱导倍数可达对照组的1.6倍.芘在暴 露浓度大于10~mg·ml一时,对sOD活性产生了不同程度的诱导,最大诱导倍数可达对照组的2.55 倍(10~mg·ml。),差异极显著(p<0.01).另外,暴露浓度相同,芘对sOD的诱导程度大于菲. 当4·o 。警3.o 毒 重2.0 槊1.o o 量 o () l(Pl(r “r l《y 1(r 浓度/mg·Inl一1 图1菲和芘对蚯蚓体内细胞色素P450含量的影响 (+p<0.05,一p<0.01) Fi晷1CytochmmeP450ineanhwomsexposedto phenanthreneandpyIene 山 一 300 城 二200 赳 蛭100 ∽ 0 O 10西 105 l(P1仃3 102 含量,mg·ml。1 图2菲和芘对蚯蚓体内sOD活性的影响 (4p<0.05,一p<0.01) Fi昏2SODineanhw0瑚sexposedto phenanthreneandpyr℃ne 万方数据 环 境 化 学 26卷 2.3菲和芘对蚯蚓体内过氧化物酶(POD)的影响 如图3所示,当菲的浓度大于或等于10~mg·ml。1时,蚯蚓POD活性显著高于对照水平(p< 0.05),且在10~mg·ml一暴露组产生最大诱导,为对照的1.85倍.而芘在浓度为10~mg·ml一时, 即对蚯蚓POD活性产生了极显著的诱导效应(p<0.01),并随其浓度的增加有升高趋势,在芘为10。3 mg·m1。1时达到最大值(1.88倍对照),随后略有下降,但仍显著高于对照水平.在效应浓度范围内, 芘对POD的诱导强度大于菲. 2.4菲和芘对蚯蚓体内过氧化氢酶(CAT)的影响 图4显示,菲浓度在小于或等于10~mg·ml。1时,未对蚯蚓CAT活性产生任何影响(p>0.05), 而当其增至10。和10一mg·ml一时,CAT活性明显升高,分别为对照组的1.72和2.27倍且差异极 显著(psOD(POD)>cAT. (2)菲和芘的代谢诱导了蚯蚓体内P450含量的增加,而三种抗氧化酶活性的升高说明此代谢过 程中有活性氧自由基产生. (3)根据四个指标对污染物浓度响应域值的不同,可将四者联合应用作为一套生物标记物体系, 互为补充,以满足污染物不同暴露浓度下的土壤毒理诊断,增强指示的敏感性和有效性,避免由单一 指标的结果而可能导致的片面结论. 参。考文献 [1]LuoY,zangY,zhongYeta1.,T0xicolo百calstudyofTwoNovelPesticidesonEanhw0珊.E蠡en如/沈£渤.铂e,儿唧^ere,1999,39 (13):2347—2356 [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] 13 14 15 16 [17] 0smanAM,DenBestenPJ,vaIlN00rtPCM,MenadioneEnhaIlces0眄mdicalFornlationinEanhwo瑚Extracts:Vulnerability《 E础wo册stoQuinoneToxic时Ag∽庇%z洳冶),,2003,65:101—109 OsmanAM,VanNoonPcM,ActivationofPar8quatintheEarthwo瑚AU010bophomChloroticaisMediatedbyNAD(P)H-cytchrome cReduct鹊eActivities.P曲斑ideB抽如em西£ryo树册筘如f嗍r,2004,79:101一110 AchaziRK,nennerC,LivingstoneDReta1.,CytochromeP450andDependentActivitiesinUnexposedandPAH—exposedTerrestrial Annelids.岛唧.舶出m.珊笋面Z.,1998,12lC:339—350 KimKB,LeeBM,0】【idativeStresst0DNA,Protein,andAntioxidantEnzymes(SuPeroxideDismutaseandCatalase)inRatsTrtated withBenzo(a)pyrene.Co,槲.厶跖,1997,113:205—-212 LiVingstoneDR,Contaminan卜StimulatedReactiveOxygenSpeciesProductiona11d0xidativeD砌ageinAquatic0rganisms.A缸r.JP棚眦 B¨2..2001.42:656—一666 PetersLD,PorteC,Livi“gstoneDR,VariationofAnti耐daIltEnzymeActivitiesofSprat(印m“瑚印m££琳)L螂aeaIldOrg粕icC0n— t砌inalltIJevelsinMixedZ00planktonfromtheSouthemNon|lSea.讹^耻Po皿“如n曰以胁n,2001,42:1087—1095 宋玉芳,周启星,许华夏等,菲、芘、l,2,4一三氯苯对蚯蚓的急性毒性效应.农村生态环境,2003,19(1):36—39 宋玉芳,周启星,许华夏等,菲、芘、l,2,4-三氯苯对土壤高等植物根伸长抑制的生态毒性效应.生态学报,2002,22(11): 1945一1950 宋玉芳,周启星,宋雪英等,菲和芘对土壤中植物根伸长抑制的生态毒性效应,生态学杂志,2003,22(5):6—9 BrownPJ,I∞ngSM,Spu唱eonDJeta1.,ToxicologicalaIldBiochemicalRe8ponsesoftheEarthwo珊上以m6一c琊RⅡ6eZfWtoPyrene,a N0n-carcinogenicPolycyclicAromaticHydrocarbon.∞e,唧^删,2004,57:1675一168l 0垮mizationforEconomicC00pemtionaIldDeVel叩ment,(0ECD).PIoposalforupdatingGuideline207:Earthwo册,AcuteT0xicity Tests—OECDGuidelinekTestingofChemicak207,P矗s,Frallc。;Eu砷eanCommittee,1984 0舢raT,SatoR,neCarbonM0noxide—BindingPi舯entof“verMicrosomes.如啪.曰幻f.Ckm.,1964,239(7):2370一2378 张志良,瞿伟菁主编,植物生理学试验指导.北京:高等教育出版社,第三版,2003 徐镜波,袁晓凡,郎佩珍,过氧化氢酶活性及活性抑制的紫外分光光度测定.环境化学,1997,16(1):73—76 PachecoM,SantosMA,‘4,伊i皿oo,zgMiZf口£.LiverERODandErythrDcyticNuclearAbnomalitieslnductionbyCyclophosph啪ideand PAHs.zko溉如ozE聊;r0凡.S够,1998,40:71—_76 PanLQ,RenJY,LiuJ,Re8ponsesofAntioxidantSystemsandLPOLevelt0Benzo(a)pyreneandBenzo(k)nuomntheneintheHae- m01ymphoftheScallop蕊fo哗&瑚矗.踟irDn凇咖fPoff以沾n,2005,14董(3):443—451 万方数据 206 环 境 化 学 26卷 一—————————————————————————————————————————————————————一 Z戤ⅣG耽i1·2 S0ⅣG舭.∥愕1’3 SOⅣGyh扣n91,3 幻加Ua.砌曙1·3 SUⅣ死e一舡n91,3 zHENGsen.1甜'2 (1 KeyLab。rat。ryof,rerrestrialEc。l。gicalProcess,Institute ofAppliedEc01。gy,chineseAcademyofsciences,shenyang,110016,chi“8; 2 GraduatedSchool,ChineseAcadeIIIy0fSciences,Beqing,100039,Chin8; 3 KeyLab。ratory0fEnvironmentEn舀neering,ShenyallgUniVersity,Shenyang,11004l,China) ABS’I’RAC’l’ 啊einfluenceofphenanthreneandpyreneoncytochromeP450andantioxidantenzymes0±eanhwoms (E玉eni口居fid口)wasstudied.Bymeansofcontactingwit}lcontaminated6lterpaper,earthwonns we。eexposed tothepollutants.Earthwo咖wasusedtodetecttotalcytochromeP450contentandtheaetiVitiesofsuperoxide dismutases(SOD),guaiacolperoxidases(POD)andcatalase(CAT).Resultsindicatedthat,withintested concentmtions.totalP450contentsandtheactivitiesofthreeantioxidantenzymeshadresponses tothetoxlc卜 tiesofphenantllreneandpyTene.Metabolism0fmesetwoPAHs inearthwo珊inducedmeincreasingofP450 content,andreactiveoXygenspeciescouldbegenerated asby—productinthatpmcess·Incontrast,theoxlda。 tivestressofeanhwo唧scausedbypyrenewasharderthanbyphenanthrene.Concentrationthresholdsof responsefordiffbrentenzymesdif亿red,卸dtheirsensibilitiestothePAHpollutantsfollowthesequence of P450>SOD(POD)>CAT.’Therefore,thefourindexescouldbeusedtogetherasasuitofbiomarkersto satisfvthediagnosisindifferenteXposureconcentrationsandtoenhancethesensitiVity andeffectiVityofindica。 ting. Keywords:phenallthrene,pyrene,earthwoHns(眈en玩弦i如),cytochmmeP450,antioxidan‘ enzvmes,biomad【er. 万方数据 菲和芘对蚯蚓(Eisenia fetida)细胞色素P450和抗氧化酶系 的影响 作者: 张薇, 宋玉芳, 孙铁珩, 宋雪英, 周启星, 郑森林, ZHANG Wei, SONG Yu-fang, SUN Tie-heng, SONG Xue-ying, ZHOU Qi-xing, ZHENG Sen-lin 作者单位: 张薇,郑森林,ZHANG Wei,ZHENG Sen-lin(中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点 实验室,沈阳,110016;中国科学院研究生院,北京,100039), 宋玉芳,孙铁珩,宋雪英,周启星 ,SONG Yu-fang,SUN Tie-heng,SONG Xue-ying,ZHOU Qi-xing(中国科学院沈阳应用生态研究 所陆地生态过程重点实验室,沈阳,110016;沈阳大学沈阳环境工程重点实验室,沈阳,100041) 刊名: 环境化学 英文刊名: ENVIRONMENTAL CHEMISTRY 年,卷(期): 2007,26(2) 被引用次数: 16次 参考文献(17条) 1.宋玉芳;周启星;许华夏 菲、芘、1,2,4-三氯苯对土壤高等植物根伸长抑制的生态毒性效应[期刊论文]-生态学报 2002(11) 2.宋玉芳;周启星;许华夏 菲、芘、1,2,4-三氯苯对蚯蚓的急性毒性效应[期刊论文]-农村生态环境 2003(01) 3.Peters L D;Porte C;Livingstone D R Variation of Antioxidant Enzyme Activities of Sprat(Sprattus sprattus)Larvae and Organic Contaminant Levels in Mixed Zooplankton from the Southern North Sea[外文 期刊] 2001(11) 4.Livingstone D R Contaminant-Stimulated Reactive Oxygen Species Production and Oxidative Damage in Aquatic Organisms[外文期刊] 2001(8) 5.Kim K B;Lee B M Oxidative Stress to DNA,Protein,and Antioxidant Enzymes (Superoxide Dismutase and Catalase) in Rats Treated with Benzo(a)pyrene[外文期刊] 1997 6.Achazi R K;Flenner C;Livingstone D R Cytochrome P450 and Dependent Activities in Unexposed and PAH-exposed Terrestrial Annelids[外文期刊] 1998 7.Osman A M;Van Noort P C M Activation of Paraquat in the Earthworm Allolobophora Chlorotica is Mediated by NAD(P)H-cytchrome c Reductase Activities[外文期刊] 2004(3) 8.Brown P J;Long S M;Spurgeon D J Toxicological and Biochemical Responses of the Earthworm Lumbricus Rubellus to Pyrene,a Non-Carcinogenic Polycyclic Aromatic Hydrocarbon[外文期刊] 2004 9.宋玉芳;周启星;宋雪英 菲和芘对土壤中植物根伸长抑制的生态毒性效应[期刊论文]-生态学杂志 2003(05) 10.Luo Y;Zang Y;Zhong Y Toxicological Study of Two Novel Pesticides on Earthworm[外文期刊] 1999(13) 11.Osman A M;Den Besten P J;van Noort P C M Menadione Enhances Oxyradical Formation in Earthworm Extracts:Vulnerability of Earthworms to Quinone Toxicity[外文期刊] 2003(1) 12.Pan L Q;Ren J Y;Liu J Responses of Antioxidant Systems and LPO Level to Benzo(a)pyrene and Benzo(k)fluoranthene in the Haemolymph of the Scallop Chlamys Ferrari[外文期刊] 2005(03) 13.Pacheco M;Santos M A Anguilla anguilla L.Liver EROD and Erythrocytic Nuclear Abnormalities Induction by Cyclophosphamide and PAHs[外文期刊] 1998(1/2) 14.徐镜波;袁晓凡;郎佩珍 过氧化氢酶活性及活性抑制的紫外分光光度测定 1997(01) 15.张志良;瞿伟菁 植物生理学试验指导 2003 16.Omura T;Sato R The Carbon Monoxide-Binding Pigment of Liver Microsomes 1964(07) 17.OECD Proposal for Updating Guideline 207:Earthworm 1984 本文读者也读过(4条) 1. 张薇.宋玉芳.孙铁珩.刘淼.ML Ackland.Belogolova Galina.ZHANG Wei.SONG Yu-fang.SUN Tie-heng.LIU Miao .ML Ackland.Belogolova Galina 土壤低剂量芘污染对蚯蚓若干生化指标的影响[期刊论文]-应用生态学报 2007,18(9) 2. 张薇.宋玉芳.刘淼.孙铁珩.ZHANG Wei.SONG Yufang.LIU Miao.SUN Tieheng 苯并(a)芘对蚯蚓细胞色素P450和 抗氧化酶影响[期刊论文]-辽宁工程技术大学学报(自然科学版)2009,28(5) 3. 张薇.宋玉芳.孙铁珩.李昕馨.刘淼.陈朗.Zhang Wei.Song Yufang.Sun Tieheng.Li Xinxin.Liu Miao.Chen Lang 土壤低剂量荧蒽胁迫下蚯蚓的抗氧化防御反应[期刊论文]-土壤学报2007,44(6) 4. 张薇.宋玉芳.孙铁珩 多环芳烃菲污染土壤的蚯蚓细胞色素P450生物标记诊断[期刊论文]-毒理学杂志 2005,19(3) 引证文献(16条) 1.赵丽.邱江平.李凤 铜离子污染胁迫对蚯蚓重要抗氧化物酶活性的影响[期刊论文]-中国农学通报 2011(26) 2.尹冬雪.苏玉红.乔敏 多环芳烃芘对拟南芥的生物毒性效应[期刊论文]-安徽农业科学 2011(23) 3.尹冬雪.苏玉红.乔敏 环芳烃芘对拟南芥的生物毒性效应[期刊论文]-农业科学与技术:英文版 2011(6) 4.朱淑贞.祝凌燕.刘慢.常春 五溴联苯醚-镉胁迫下蚯蚓抗氧化防御反应[期刊论文]-环境科学与技术 2010(11) 5.宋玉芳.王磊.李昕馨.张薇.陈朗.Freestone David.吉普辉.Ackland M Leigh 植物CytP450和抗氧化酶对土壤菲 、芘暴露的生态毒理响应[期刊论文]-环境科学学报 2009(2) 6.宋玉芳.王磊.李昕馨.张薇.陈朗.Freestone David.吉普辉.Ackland M Leigh 植物CytP450和抗氧化酶对土壤菲 、芘暴露的生态毒理响应[期刊论文]-环境科学学报 2009(2) 7.杨健.赵丽敏.陈巧燕.邓德汉.易当皓 水力负荷对生物滤池中蚯蚓抗氧化酶和消化酶活性的影响[期刊论文]-环境 科学 2009(4) 8.王磊.宋玉芳.张薇.陈朗.David Freestone.M Leigh Ackland 蚯蚓(Eisenia fetida)细胞色素P450及抗氧化酶系 对环境浓度苯并(a)芘的响应[期刊论文]-农业环境科学学报 2009(2) 9.宋玉芳.李昕馨.张薇.David Freestone.M. Leigh Ackland.陈朗.吉普辉.杨晓霞 植物CytP450和抗氧化酶对土壤 低浓度菲、芘胁迫的响应[期刊论文]-生态学报 2009(7) 10.宋玉芳.李昕馨.张薇.David Freestone.M. Leigh Ackland.陈朗.吉普辉.杨晓霞 植物CytP450和抗氧化酶对土 壤低浓度菲、芘胁迫的响应[期刊论文]-生态学报 2009(7) 11.邓欢.郭光霞.乔敏 多环芳烃污染土壤毒性评价指标的研究进展[期刊论文]-生态毒理学报 2009(1) 12.刘硕.周启星 抗氧化酶诊断环境污染研究进展[期刊论文]-生态学杂志 2008(10) 13.刘嫦娥.段昌群.王旭.陈运锋.刘飞.杨媛.朱辉清.王汉明 阿特拉津和绿麦隆对赤子爱胜蚓组织抗氧化酶活性的 影响[期刊论文]-环境化学 2008(4) 14.聂湘平.王翔.李凯彬.吴淑勤 三氯异氰尿酸对剑尾鱼(Xiphophorus helleri)毒性及其抗氧化酶影响[期刊论文] -海洋与湖沼 2008(5) 15.刘嫦娥.段昌群.王旭.杨媛.刘飞.朱辉清.陈运锋.王汉明 丁草胺和乙草胺对蚯蚓CAT和SoD活性的影响[期刊论文 ]-环境化学 2008(6) 16.聂湘平.王翔.李凯彬.吴素琴.鹿金雁.杨宇峰 抗生素药物环丙沙星对剑尾鱼的毒性效应[期刊论文]-中山大学学 报(自然科学版) 2007(5) 本文链接:http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_hjhx200702018.aspx
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