温度PH对酶活力的影响

温度PH对酶活力的影响 二(教案与讲稿 一、教案 授课专业和班2005级临床本科及麻醉本课程名称 生物化学实验 级 科 温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性授课学授课内容 4学时 的影响 时 实验授课地点 日期 2006.10.13 节次 6、7、8、9节 室 掌握温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理;唾液淀教学目的 粉酶所催化的酶促反应过程;熟悉各种仪器的使用和操作。 温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理，怎样设计合教学重点 理的实验来验证温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响。 教学难点 让学生理解温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原理 教具 黑板、粉笔、实验材料、实验仪器等。 教学 小班讲课 再次强调实验室要求，对上次的实验进行和总结 10分钟 简述实验过程，并对实验所用的实验仪器作介绍 5分钟 阐述温度、pH、促进剂和抑制剂对酶活性影响的基本原 教学过程 理，并对实验的结果进行预测。 35分钟 设计合理的实验方案并进行操作(学生) 100分钟 实验结果观察与讨论 10分钟 (1)张文峰，黄林邦主编《分析与检测实验技术》(江西高校出版参考书籍 社) (2)周爱儒主编《生物化学》(第六版，人民卫生出版社) (1)影响本次实验的因素, 思考题或/ 及作业 (2)怎样才能克服影响实验结果的因素, 课后总结 二、讲稿 [实验目的] 1: 掌握温度、PH值、激活剂、抑制剂对酶活性影响的基本原理 2: 熟悉各种仪器的使用和基本操作 [实验原理] 唾液淀汾酶所催化的反应为: 淀汾——>糊精(不彻底产物)——>麦芽糖(彻底产物)。 碘液显色反应:碘液本身为棕色，与淀粉反应显深蓝色，与分子量大小不同的糊精呈蓝、紫、红等色，与麦芽糖不呈色。 1.温度、PH值、激活剂、抑制剂对酶活性的影响情况 温度:对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应的温度为最适温度时，最有利于 酶促反应的进行。温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、失 活; 2.pH:酶活性最大时的环境pH为最适pH。pH不仅会影响酶的活性，还会影响 底物的解离状态，从而影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。 -激活剂与抑制剂:激活剂能增加酶的活性，而抑制剂则会抑制酶的活性，Cl3. 2+为唾液淀粉酶的促进剂，而Cu是唾液淀粉酶的抑制剂。 [操作步骤] 1(收集唾液(自来水漱口、收集唾液5ml于小烧杯、蒸馏水稀释10倍、小漏斗 棉花团过滤、置37度水浴箱中保温，备用。) 2(取试管10支，分三组按下表操作: A(温度组 A1管 A2管 A3管 唾液(2ml) 冰水浴10分钟 37度水浴10分钟 100度沸水浴10分钟 20d 20d 20d 1%淀粉(含NaCl) 冰水浴15分钟 37?水浴15分钟 100?水浴15分钟 碘液 2d 2d 2d 显色 深棕色 浅棕色 蓝色 B(PH值组 B1管 B2管 B3管 磷酸盐缓冲液(2ml) PH值5.0 PH值6.8 PH值8.0 1%淀粉(含NaCl) 2ml 2ml 2ml 唾液 10d 10d 10d 摇匀，立即置37度水浴箱中保温，每隔1分钟从2号管中吸取溶液1d加到白瓷盘坑中0.3%碘液中。当碘液不变色时刻，分别向3管中加入0.3%碘液2滴，观察颜色变化。 显色 浅蓝色 浅棕色 浅蓝色 C(激活剂、抑制剂组 C1管 C2管 C3管 C4管 1%淀粉(不含NaCl) 20d 20d 20d 20d 溶液(2d) 1%NaCl 1%CuSO 1%NaSO 蒸馏水 424 唾液 10d 10d 10d 10d 摇匀，立即置37度水浴箱中保温，每隔2分钟从1号管中吸取溶液1d加到白瓷盘坑中0.3%碘液中。当碘液不变色时刻，分别向4管中加入0.3%碘液2滴，观察颜色变化。 显色 浅棕 深蓝 紫、红或浅蓝 紫、红或浅蓝 结果与分析:(学生) 讨论:(学生)