自身抗体与自身免疫性疾病

nullnull自身抗体与自身免疫性疾病null自身免疫病、风湿病和风湿免疫病 自身免疫病 风湿免疫病 风湿病自身免疫性疾病（Autoimmune Disease, AID）自身免疫性疾病（Autoimmune Disease, AID） AID：指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。 内因（遗传易感、免疫耐受减低或丧失、调节异常、衰老体弱等） 外因（感染、物理、化学、环境等）null自身免疫病的“病谱”（按疾病累及的系统分）结缔组织疾病：类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、皮肌炎、硬皮病 神经肌肉疾病 ：多发性硬化症、重症肌无力、脱髓鞘疾病 内分泌性疾病：原发性肾上腺皮质萎缩、慢性甲状炎、青少年型糖尿病 消化系统疾病 ：慢性非特异性溃疡性结肠炎、慢性活动性肝炎、恶习 性贫血与萎缩性胃炎 泌尿系统疾病 ：自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血性综合症 血液系统疾病：自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特 发性白细胞减少症 null器官特异性 非器官特异性 桥本甲状腺炎 扩张性心肌炎 自身免疫性溶血性贫血 系统性红斑狼疮 原发性粘液水肿 恶性贫血 特发性血小板减少性紫癜 干燥综合征 甲状腺机能亢进 自身免疫性胃炎 特发性粒细胞减少症 类风湿关节炎 Addision病 自身免疫性肝炎 绝经过早（少数病例） 硬皮病 1型糖尿病 原发性胆汁性肝硬化 男性不育（少数病例） 多发性肌炎/皮肌炎 重症肌无力 原发性硬化性胆管炎 交感性眼炎 混合性结缔组织病 多发性硬化症 溃疡性结肠炎 晶状体源性葡萄膜炎 系统性血管炎 脱髓鞘疾病 克罗恩病 抗磷脂综合征 寻常型天疱疮 自身免疫性肾小球肾炎 肺肾出血综合征自身免疫病的“病谱”（按受累器官组织范围分）自身免疫病的疾病特征 自身免疫病的疾病特征 （1）患者血清中可测到高效价的自身抗体和(或)自身应答性T淋巴细胞；还有高水平的r-球蛋白。 （2）病损部位有变性的免疫球蛋白沉积。 （3）可复制出相似的动物模型。 （4）病程发作与缓解交替出现，仅少数为自限性。 （5）有遗传倾向。 （6）女性多于男性，老年多于青少年。 （7）应用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂有效。null自身免疫性疾病的重要标志。 高滴度存在于自身免疫性疾病患者。 与疾病的活动性相关。 参与免疫病理性损伤。自身抗体（autoantibodies） 由各种原因造成机体免疫系统B细胞产生针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体，称自身抗体。 null间接免疫荧光法 免疫斑点法、免疫印迹法 微孔板ELISA 免疫扩散法 悬浮微阵列法 抗原蛋白芯片法 自身抗体检测方法自身抗体检测方法自身抗体检测方法ANA筛查: 间接免疫荧光法(IFT)ANA筛查: 间接免疫荧光法(IFT) 抗原谱完整 (细胞核、细胞浆)。  检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性。  基质组合: HEp-2细胞+灵长类肝（猴肝）。 ANA：均质型（homogeneous,H)ANA：均质型（homogeneous,H)高效价的H：SLE。 低效价H：药物诱导性狼疮，幼年型RA，慢性肝病，传单。ANA：斑点型/颗粒型（speckled,S)ANA：斑点型/颗粒型（speckled,S) 核内荧光呈斑点状，如蜂窝，核仁区无荧光。 高效价S：MCTD、硬皮病、SLE、SS等各种AIDANA：核仁型（nucleolar,N)ANA：核仁型（nucleolar,N)核仁区团块状或颗粒状荧光，3－8块，状如梅花。 高效价N对硬皮病、皮肌炎、类风关等。SLE偶见。ANA：核膜型/周边形（membranous,M)ANA：核膜型/周边形（membranous,M)边缘荧光增强如环状。 高效价仅见于SLE活动期。null抗dsDNA抗体 金标准：IIF（绿蝇短膜虫）ANA其他核型ANA其他核型着丝点型：局限型硬化症（CREST综合征）；PBC患者。 核点型： 20-30% PBC患者。 胞浆颗粒型：针对细胞胞浆中的颗粒成分的抗体（抗线粒体抗体、JO-1抗体，核糖体P蛋白抗体）。 胞浆纤维型：指针对细胞微丝、微管等骨架成分的自身抗体。抗肌动蛋白抗体是I型AIH高特异指标。原肌球蛋白和波形蛋白则临床意义不明确。 分裂期细胞阳性：纺锤体，中间体等，意义尚不明确。ENA谱：免疫斑点法（靶抗原确认）ENA谱：免疫斑点法（靶抗原确认）免疫印迹法 (Immunoblots， 靶抗原确认）免疫印迹法 (Immunoblots， 靶抗原确认）ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)不是全抗原提取物膜条是变相的ELISA，只是载体不同nullANA筛选试验 抗dsDNA抗体 抗ENA抗体 抗Sm抗体： SLE标记性抗体（20%-30%）。 抗nRNP抗体：MCTD 95 -100%（高滴度）。 抗SSA抗体： SS 40 -80%，SLE30-40％，PBC20％ 抗SSB抗体： 仅见于SS 40 -80%和女性SLE20％。常与SSA同现。 抗Scl-70抗体：SSc 25 -75%, 标记性抗体。 抗Jo-1抗体： PM/DM 25%，标记性抗体。 抗核抗体谱null抗组蛋白抗体：药物诱导SLE（95%），SLE(30-70%) 和RA(15-50%) 。 抗核糖体P蛋白抗体：SLE（5-15%）。普遍认为其滴度与SLE的活动性相关。还与SLE的中枢神经系统症状、肾脏或肝脏受累有关。 抗核小体抗体：SLE(50-95%)，特异性约100%。SLE早期，抗核小体抗体比抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体更早出现。有15-19%的抗dsDNA抗体阴性的SLE患者中抗核小体抗体阳性。 Ro-52抗体：与多种CTD有关。正常人血清不出现，无疾病特异性。 抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体：SLE的特异性抗体(3%)。可能与SLE患者发展为弥散性增殖性肾小球肾炎有关。 抗C1q抗体：SLE标志性抗体。抗C1q水平与SLE疾病活动程度相关，是SLE患者并发肾脏损伤的重要指标，在狼疮肾诊断和活动性判定有重要作用。抗核抗体谱null pANCA ,cANCA ,xANCA 抗蛋白酶3（PR3），抗髓过氧化物酶（MPO） 其他： 抗杀菌/通透性增高蛋白（BPI） 抗人白细胞弹性蛋白酶（HLE） 抗组织蛋白酶G（CG） 抗溶菌酶（LYS） 抗乳铁蛋白（LF） 系统性血管炎 、炎症性肠病 、自身免疫性肝病 结缔组织病 药物性疾病 感染性疾病抗中性粒细胞胞浆抗体谱 null类风湿因子（RF） 抗角质蛋白抗体（AKA） 抗核周因子（APF） 抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA） 抗MCV（Sa）抗体 抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体） 抗RA33抗体 葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）抗原 profilaggrin/filaggrin类风湿关节炎相关自身抗体谱Rheumatologic diseasesRheumatologic diseasesRheumatic diseasesnullAntinuclear antibody(ANA) Anti-dsDNA antibody Anti-Sm antibody Anti-cardiolipin antibody Lupus anticoagulant（LA) Anti-Nucleosomes antibodies Anti-ribosomal RNP antibodies Anti-β2GPⅠantibody 系统性红斑狼疮（SLE） SLE中存在的自身抗体达百种以上 Yaniv S et al1.Semin ArthritiRheum,2004,34:501-537 .nullSemin Arthritis Rheum. 2004 Oct;34(2):501-37.SLE患者中存在100多种自身抗体Systemic lupus erythematosus， SLESystemic lupus erythematosus， SLEIn addition antibodies against: ssDNA, histones, U1-nRNP, SS-A, SS-B, Ku, PCNA, Cardiolipin, 2-Glycoprotein 1抗dsDNA: 特异性高。 与疾病的活动性相关（高滴度时1～3月复查一次，低滴度6月复查1次）。 预后及肾脏受累的标志。 Sm抗体: 其他疾病及正常人几乎阴性。 阳性后难转阴。 SLE相关自身抗体SLE相关自身抗体null 95%～99%可排除SLE （－） SLE治疗缓解 病情特重（大量IC沉积消耗抗体） （＋）低滴度 常见于RA等其它自身免疫性疾病 　　　高滴度　可作为诊断SLE的依据 靶抗原确认 （－）不能排除 抗dsDNA、Sm等抗体 （＋）可帮助诊断　ANA初筛SLE实验室方法的选择及结果的确认SLE疾病活动性指标SLE疾病活动性指标抗磷脂综合征（APS)抗磷脂综合征（APS) 磷脂综合征（antiphospholipid syndrome，APS）是一种非炎症性自身免疫病，血栓形成是APS突出的临床表现和主要的病理变化。患者血清中持续抗磷脂抗体阳性。 APS患者推荐的血清学指标有ACA和β2-糖蛋白1等（定量检测）。 抗心磷脂抗体：50％SLE和其他系统性 AID。ACA阳性SLE患者发生血管炎、溶血性贫血、心脏及CNS损害的几率明显高于阴性者。 抗β2-糖蛋白1 抗体：在血栓形成和磷脂综合征（APS）比 ACA更特异。可作为自身免疫性血栓形成的血清学标志。有助于自身免疫性和感染性血栓的鉴别诊断。 系统性血管炎系统性血管炎抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)筛查：系统性血管炎、炎症性肠病、自身免疫性肝炎、结缔组织病的辅助诊断。两种核型（p-ANCA和c-ANCA)。 c-ANCA及p-ANCA检测不足以证明系统性坏死的脉管炎。需做PR3-ANCA 和MPO-ANCA靶抗原确认检测。 Anti-PR3: c-ANCA主要靶抗原。韦格纳肉芽肿（WG）的敏感而特异的指标，特异性超过95%。PR3-ANCA水平与疾病程度和疾病活动度有关。 Anti-MPO: p-ANCA主要靶抗原。与显微多动脉炎（MPA）、坏死性新月体性肾小球肾炎（NCGN）、结节性多动脉（PAN）、SLE、RA、药物诱导的狼疮（DIL）等相关。MPO浓度与病情活动度有直接关系。 Anti-GBM: 与 Good-Pasture综合征、急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎等有关。累及肺时，阳性率在50%；累及肺后，阳性率在80-90%。Sharp syndrome (MCTD)Sharp syndrome (MCTD) 几乎100％MCTD患者均为单独U1RNP高滴度阳性，抗体滴度与疾病活动性相关。 在30-40%的SLE患者中也可检出抗U1-nRNP抗体，但几乎总伴有抗Sm抗体。nullANA Anti-SS-A antibody Anti-SS-B antibody Anti-α-Fodrin antibody Anti-M3R antibody AMA-M2? ACA? Anti-CCP? 干燥综合征（SS） Sjögren‘s SyndromeSjögren‘s Syndrome alpha-fodrin（ α-胞衬蛋白：原发性SS 指标） 原发性干燥综合症的标志性抗体，阳性率96％。 抗α-胞衬蛋白抗体能早于SS-A和SS-B被检测出，即可在SS-A和SS-B抗体均阴性的干燥综合征患者血清中检出。 与活动度有关。 故抗α-胞衬蛋白抗体能有效降低ANA、抗SSA、抗SSB抗体阴性患者的漏诊，是现有SS检验指标的必要补充。Ro-52:(正常人阴性） 1、SLE患者Ro抗体阳性易并发肾小球肾炎。 2、孕妇Ro抗体阳性小孩有先天性心脏病的可能。 Progressive systemic sclerosis (SSc)Progressive systemic sclerosis (SSc)limited PSS diffuse PSSPolymyositis/Dermatomyositis (PM/DM)Polymyositis/Dermatomyositis (PM/DM)In addition antibodies against: Ku (Overlapping with PSS), diverse aminoacyl-tRNA transferases (OJ, EJ, KJ)RA-specific autoantibodies RA-specific autoantibodies Antibodies against citrulline containing proteins: RA Keratin (AKA) CCP (cyclic citrullinated peptide) RA33 GPI Anti-perinuclear factor (APF)自身免疫性肝病（肝脏自身抗体谱）自身免疫性肝病（肝脏自身抗体谱） 疾病类型 相关自身抗体 自身免疫性肝炎（ AIH ） Ⅰ型AIH ANA/ASMA Ⅱ型AIH anti-LKM-1 /anti-LC-1 Ⅲ型AIH anti-SLA (可溶性肝抗原) 原发性胆汁性肝硬化（ PBC） AMA (M2/M4/M8/M9 ) anti-gp210， sp100 ACA 原发性硬化性胆管炎（PSC） pANCA 自身免疫性肝病的诊断和治疗完全不同病毒性肝炎目前比较公认的部分标志抗体目前比较公认的部分标志抗体ANA和特异性抗体检测指南ANA和特异性抗体检测指南nullAntinuclear antibodies and their detection methods in diagnosis of connective tissue diseases: a journey revisited 。Yashwant Kumar* Alka Bhatia and Ranjana Walker Minz Diagnostic Pathology 2009, 4(1): 1746-1756.null抗核抗体（ANA）。 抗可提取性核抗原抗体（ENA 6项）。 ANA谱12项：6项＋核小体/核糖体P蛋白/组蛋白/着丝点/ ds-DNA抗体/Ro-52抗体。 抗ds-DNA抗体。 抗中性粒细胞胞浆抗体（cANCA/pANCA）。 类风湿关节炎5项（RF/AKA/CCP/RA33/GPI）。常规开展的自身抗体项目null肝脏自身抗体9项 (ANA/SMA/AMA/M2/SLA/LKM/ANCA/LC-1/sp100/gp210) 血管炎3项(PR3-ANCA / MPO-ANCA / GBM)。 不孕不育7项 （ASAB/ACA/EMAB/ACA/2-糖蛋白1 /卵巢抗体/透明带抗体） 磷脂综合征2项（ACA＋ 2-Glycoprotein 1 ）。 原发性干燥综合征（抗α-胞衬蛋白抗体）。 天疱疮(寻常天疱疮抗体/类天疱疮抗体)。常规开展的自身抗体项目交流目的交流目的检验医师应与临床医师密切联系、配合 方法的局限性， 临床的复杂性 项目合理选择， 结果合理解释 自身抗体检测总体原则： 临床需求决定检测模式： 诊断需求，时间（？），经济水平 无AID临床表现的患者： 筛查实验足矣（ANA?自免8？) 有AID临床表现的患者： 筛查实验并不完美，筛查实验和确认实验缺一不可谢 谢 各 位 聆 听 谢 谢 各 位 聆 听