【doc】睾丸免疫接种法用于决速制备动物空肠弯曲菌抗血清

【doc】睾丸免疫接种法用于决速制备动物空肠弯曲菌抗血清 睾丸免疫接种法用于决速制备动物空肠弯 曲菌抗血清 ? 338?实用医药杂志2008年03月第25卷第03期PracJMed&Pharm,Vol25,2oo8 —03No,03 2.1PA对大鼠肠道脂类吸收的影响试验组的脂 肪和胆固醇排出量明显高于对照组,组问比较有非 常显着性差异(尸<0.O1,表1). 表1各组大鼠脂肪和胆固醇排出量(x+-sl 与对月镘组比较'P<0.01 2.2PA对大鼠JfitH~的影响PA对TC有显着降低 作用,第28天后试验组与对照组比较有非常显着 性差异(P<O.O1),其次为VLDL;对TG的影响第90 天后显效.见表2. 表2各组大鼠TG,TC,VLDL含量(;) 组别n剂量TG(mmol/L)TC(mmol/L) (PA)第28天第9o天第28天筇90天 ! 第28天第9O天 曩料10普+o2.03?o.681.9.8?o.732.12?o.7l2.33?o.84o.95?o.o7o.98+o.1o 嘉料lo高+o3.15?o.983.26?0.864,16?o.794.36?o.82l27?o181.i4+ol3 1%PA组10高+1%258~0.932.26~0.76"2.86~0.68"2.74~0.751.10~0.09.1.06~0Il" 2%PA组10高+2%2.46+_0.882.23~082.2.85f0.91"2.66~084"102~0II1I1+0.13" 3%PA组10高+4%2.20~0.792.06~0.78"2.68~0.82"2,64~_0.77"I.II~008I.00+0.12" 与对照组比较'P<0.05.'伙0.01 2.3PA对大鼠体重的影响30d后,试验组体重 增长低于对照组,第90天后试验组体重明显低于 对照组(尸<0.01,表3). 表3各组大鼠体重变化(;?s) n 普通饲料对照组 高脂饲料对照组 l%PA组 2%PA组 3%PA组 l0普+o82.67~11.06196.08~10.86318.55~012.66 10高+084.83~12.II216.75~12,52335.64~1I35 10高+l%85.58~11.23200.13~1I.3832576~1231 10高+2%83.76~10.98198.64~1I.67"32138~II86 lO高+4%81.45~12.06197.33~12.09"320.52~1I34. 365.43+lO.67 39856+0l】.32 380l3l+lOl8" 374.25+l1.82" 372.2l+l3.67" 与对照组比较'P<O.05.'<0.01. 24PA对肾和睾丸周同脂肪组织含量的影响试 验组肾与睾丸周同脂肪组织量与体重比值,较对照 组为低(尸<0.01,表4). 表4各组大鼠肾和睾丸周围脂肪组织含量(;?s) 与对ji《{组比较0,0l. 3讨论 本文结果显示:PA能阻止大鼠肠道对脂肪和 胆同醇的吸收,降低浆中的TG,TC和VLDL,控 制体重增长,减少脂肪沉积.其机制在于PA掺人食 物后,改变了食物的组成141.由于PA的高度亲水性, 增加了食物水分,增大食糜体积,使食糜在肠道形 成透析柱样结构,束缚脂肪,胆同醇和胆酸,从而生 理性调节脂肪,胆固醇的吸收和胆酸的回收,阻断 后者的肝肠循环,使胆固醇顺向分解和排山,这样 既减少外源性胆固醇的吸收,又促进内源性胆同醇 的排山.对脂肪的吸收亦受到阻抑性涮节,中TG 相继下降,由此导致体内脂肪沉积减少.体重得以 控制.这些生理性干预效应大大增加了PA在疗养 康复中的应用价值. 参考文献 1候址明.脱乙酰壳聚糖(Chitosan)肠道阻脂吸收机制的实验研 究.全同?届海洋物质与天然药物会议集.1999288. 2管华诗,蓝进,崔英林,等.褐藻酸钠降低I(IL~作用的研究.巾国 海洋药物,1984,2(10):16. 3吴东儒,李振华,黄德民,等.糖类生物化学.北京:高等教育出版 社.1987.442. 4郑建仙.功能性食品(1I).北京:巾同轻工业出版社.1999.579. 『收稿同期:2007—10—101l小文编辑:韩仲琪工庆法l 睾丸免疫接种法用于决速制备动物空肠弯曲菌抗血清 于庆潭 (济南军区青岛第二疗养院检验中心实验科,山东青岛266071) 【关键词】空肠弯曲菌抗血清 [~1tt分类号JR392.7 睾九 【文献标识码JB 当前,空肠弯曲菌多以血清学分型而以往制备空肠弯 曲菌抗血清的方法比较烦杂,免疫接种次数较多,所需时间 长.笔者拟用睾丸免疫接种法,观察动物的抗体涨消情况,以 探讨快速制备此种抗血清的可能性.现将实验结果如 下. 1与方法 基础研究 1.1材料4株空肠弯曲菌均白鸡群分离,并按们杰细菌鉴 定手册所述方法鉴定.免疫原与反应原:将培养后空肠弯曲 菌用0.5%的甲醛PBS配成浓度约10亿/ml的菌液,作为接 种家兔用的免疫原,同时也作为试管凝集反应的反应原;另 一 种方法是.细菌不用甲醛处理,而是将培养菌置于紫外灯 下照射30min,最后用PBS配成浓度约l0亿/ml的菌液备 医药杂志2008年o3月笫25卷第o3划PtaeJMed&PhatI11_Vol25.2008— 03NO.03 用.实验动物用体重2kg以上的雄性健康家兔l0只,免疫接 种经检测血清空肠弯『ffI菌抗体滴度均为阴性. 1.2方法 1.2.1免疫接种法采用翠丸内接种法,双侧罩丸符注射 0.5ml同种免疫原.8只家兔分别用经甲醛处理的4株空肠 弯『ffI菌免疫原,2只家兔用经紫外线处理的一株免疫原进行 免疫接种,一次接种后,定期采血检测抗体滴度,观察抗体涨 消情况.待抗体滴度明下降后,进行冉次罩丸免疫接种,并 观测动物的同忆应答. 1.2.2空肠弯『ffI菌抗血清滴度测定法血清从l:20开始用 生理盐水做倍比系列稀释.用试管凝集反应检测m清巾空肠 弯曲菌的抗体滴度,『古J时附仃反廊原生理盐水对照,观 测结果.出现++以上凝集强度的血清最高稀释度为该血清的 抗体滴度. 2结果 l0只家兔首次免疫接种后,绝大多数于1Od内均能产生 1280,5I20的抗体效价.1抗体下降进行_LL}7父罩丸免疫接种 后.第3天全部家兔都出现抗体同升.分别均达1—20000以 上.详见表l. 3讨论 本研究从观察兔睾丸免疫接种后抗体涨消规律人手,探 讨此种免疫法快速制箭空肠弯nn菌抗血清的可能性.实验结 果显示.4株鸡源空肠弯『ffI菌分别首次接种的家兔于7,l0[1 血清抗体滴度达到高峰,俄罗斯学者在制备伤寒沙门抗血 清的研究所获得的结果相似….很然,此法具行操作简易, 免疫次数少,节约免疫原,速效等优点,足一个值得推荐的免 疫方法.至于睾丸免疫法为何_仃如此好的结果,其机理有待 进一步研究阐明. ? 339? 表l首次与再次睾丸免疫接种后的结果 为甲醛处理的免疫原 本实验除应用甲醛处理的免疫原外,叫'还应用了紫外 线照射处理的免疫原,以比较二者的免疫效果.曾仃学者指 出,甲醛处理细菌能破坏其表面的蛋白质构型,损伤免疫原, 紫外线作用于核酸,不损伤绌菌蛋白质,所以细菌的免疫 原性较强刚.本实验虽经紫外线处理的空肠弯nn菌获得了较 好的免疫效果.但…于所用动物太少.是否优于甲醛处理的 免疫原.尚需要做更多的试验比较,方能定论. 参考文献 1吴光先.空肠弯曲菌肠炎研究的进展.同外流行病学进展,1985, I:l3. 2HoliJG,KriegNR,SneathPHA,eta1.BelgeySnlarlua|ofdeter— minativebacteriology,9thed,WilliamsWilkins,1994.58—61. 3裴志.国外筛选的脆弱类朴菌荧光抗体的价.上海第一医 学院,1985,12(6):4I7. 【收稿日期:2007一10一I9】l小文编辑:韩仲琪王庆法1 个案与短篇 罗哌卡因致 臂丛神经阻滞恢复延迟1例 杜素娟丁明王丙琼赵斌 (89医院麻醉科,山东潍坊261021) 【中图分类号】R971.2【文献标识码JB 患者女,3l岁.右手食巾指开放伤3h就诊,拟行食巾 指内固定神经血管修复术.心电监护仪示心半89次/min. 呼吸16次/min,血压123/76mmHg.侪行右侧肌『uJ沟臂丛麻 醉.左手食指固定皮肤,右手持20ml注射器7G针头,垂直 皮肤刺入肌问沟,略向下脚侧进针深约2cm,即出现异感,稍 退针,同抽无血液,无脑脊液,无大量气体,即注0.5%罗哌卡 因少许,患者13述患侧上肢及耳部胀痛,冉退针少许,同打fI儿 血液,尤脑脊液,尤气体,压迫穿刺部位上方.继续注完剩余 药液,患者13述无上述不适症状,注药用时约3rain,共注入 0.5%罗哌卡因21ml.拔针后发现裸的患肢及颈部有散在 的苍白荨麻疹.观察头面部,躯干,四肢也相继出现,并迅速 转红色并连成片,呈鸡皮状.患者精神紧张,心电监护仪示 心率100次/min,血压110/60JnmHg,呼u发24次/rain,自述呼 u发不畅,胸闷,立即给予吸氧,地塞米松10rag静脉注射,异丙 嗪25rag肌肉注射抗过敏治疗.30min后荨麻疹逐渐消退.麻 醉阻滞完善.手术历时2.5h.术巾生命体征正常.麻醉后12h 臂丛神经阻滞仍末恢复,患者自述患肢尤知觉,肌力0级.给 予精神安慰,保持患肢功能位,注意保暖,末做特殊处理.注 意观察患肢功能恢复情况.麻醉后14h,仍尢痛觉.肌力0 级,触环,小指行轻微麻小感.麻醉后16h._尢痛觉.肌力I 级,手指能屈曲.17h,肌?级,但仍感轻微麻小.麻醉后 l8h,患肢神经功能完全恢复. 罗哌卡神经阻滞时.一般作用4—6h.K达l8h较少 见.本例患者术l尢神经功能障碍,在臂丛神经阻滞叫',穿刺 顺利,也不存在多次穿刺损伤神经情况.其神经阻滞恢 复延迟-n『能与以下原因有关:?针尖直接损伤神经:?针尖 刺入神经内膜.注药后造成了神经内膜水肿.造成神经缺血 缺氧,减慢了药物代谢;?罗哌卡的外周神经毒性:?Ij变 态反应行关.此,笔者认为在罗哌卡I用于神经阻滞麻醉 叫应注意:?在神经阻滞穿刺时,最好使用神经刺激仪:?穿 刺进针应缓慢,有异感时即停止进针,必须少许退针,注 药;?防注药压力过大;?防罗哌卡因浓度过高,一般不官超 过0.5%;?出现神经阻滞恢复延迟,应做好解释工作,注意 对患肢的保护和护理,防止并发症的发生. 川史稿日期:2007—05—18lI4:文编辑:李青l