敦煌前列宝治疗非细菌性前列腺炎的作用机制研究

收稿日期 : 2009208202; 　修订日期 : 2009212230 修订日期 :甘肃省教育厅项目 (No. 0606 - 02) 作者简介 :陈　宏 (19722) ,女 (汉族 ) ,江苏常州人 ,现任宁夏医科大学讲 师 ,硕士学位 ,主要从事中医基础理论教学及科研工作.3 通讯作者简介 :程畅和 ( 19502) ,男 (汉族 ) ,甘肃静宁人 ,现任甘肃中医 学院教授 ,学士学位 ,主要从事中医学临床和教学工作. 敦煌前列宝治疗非细菌性前列腺炎的作用机制研究 陈 　宏 1 ,朱向东 2 ,吴丽丽 3 ,程畅和 23 (1. 宁夏医科大学 ,宁夏 银川 　750004; 　2. 甘肃中医学院 ,甘肃 兰州 　730000; 　 3. 北京中医药大学 ,北京 　100029) 摘要 :目的 探讨敦煌前列宝治疗非细菌性前列腺炎的作用机制。方法 采用消痔灵注射法复制非细菌性前列腺炎大鼠 模型。实验动物随机分为模型组 ,阳性对照组 ,中药高、中、低剂量组及不加处理的空白对照组。造模各组以高、中、低剂 量敦煌前列宝煎剂、前列泰胶囊混悬液和蒸馏水进行干预 ,光镜下观察各组大鼠前列腺组织病理改变 ,以放射免疫法测 定各组大鼠前列腺组织白细胞介素 2和 8 ( IL - 2、IL - 8)的含量。结果 病理观察显示 ,模型组动物前列腺组织形态及结 构明显受损。与空白对照组比较 ,模型组大鼠前列腺组织匀浆中细胞因子 IL - 2、IL - 8高表达 ( P 0. 01)。治疗后 ,中 药高、中、低剂量组动物前列腺腺体病理变化有不同程度减轻 ;局部前列腺组织细胞因子 IL - 2、IL - 8表达显著减轻 ( P 0. 05)。结论 敦煌前列宝可明显改善实验性慢性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织的炎症状态及病理损伤 ,降低局 部相关细胞因子 IL - 2、IL - 8的表达。 关键词 :非细菌性前列腺炎 ; 　敦煌前列宝 ; 　白细胞介素 - 2; 　白细胞介素 - 8 中图分类号 : R965; R361 + 2　　文献标识码 : B　　文章编号 : 100820805 (2010) 0621434202 　　慢性非细菌性前列腺炎 ( chronic a bacterial p rostatitis, CAP) 是男性泌尿系统常见病、多发病 ,好发于青壮年男性。目前 CAP 的病因和发病机制尚不完全清楚 ,属难治性疾病 ,临床缺乏有效 的治疗方法和药物。本研究所用敦煌前列宝以敦煌出土卷子 《辅行诀脏腑用药法要 》中所载“大泻肾汤 ”为基础 ,依据 CAP临 床表现加减化裁而成 ,经临床反复应用疗效肯定。 1　 1. 1　动物 雄性 W istar大鼠 ( SPF级 ) 50只 , 3月龄 ,体质量 (240 ±20) g,由甘肃中医学院动物实验中心提供。 1. 2　药物 敦煌前列宝由茯苓、生甘草、制大黄、黄芩、赤芍、干 姜、川牛膝、益母草按特定的比例组成 ,药材由甘肃中医学院附属 医院中药房提供 ,煎煮后过滤去渣 ,水浴浓缩滤液 ,使每毫升药液 含生药 1. 72 g;前列泰胶囊 (陕西东泰制药有限公司生产 ,批号 : Z20050003)购自兰州万民药店 ,每粒含生药 0. 44 g,临用前蒸馏 水配成所需浓度 ;消痔灵注射液 (北京第四制药厂生产 ,批号 : 0710312)实验前用生理盐水配制成 25%消痔灵注射液 ,标记备 用。 2　方法 2. 1　模型复制 根据文献 [ 1 ] ,将实验大鼠用 10%水合氯醛 (250 ～300 mg·kg- 1 )麻醉 ,无菌操作下取下腹部正中切口约 1 cm,直 达腹腔 ,提出膀胱及两侧精囊 ,暴露附属于精囊内侧的前列腺背 叶 ,注入前列腺双侧背叶 25%消痔灵注射液共 0. 2 m l,缝合肌 肉、皮肤。创口处喷庆大霉素注射液以防感染。造模期 7 d。 2. 2　分组与给药 将 50只大鼠称重 ,依体质量编号 ,按随机数字 表法选取 8只为空白对照组 ;其余动物造模后选取 40只称重后 按随机数字表法分为 5组 :病理模型对照组 ,阳性对照组 ,敦煌前 列宝高剂量组、中剂量组、低剂量组 ,各 8只。病理模型组、空白 对照组按用药组的方法 ,每日灌服蒸馏水 ;敦煌前列宝高、中、低 剂量组予宝汤液 10m l/δ 灌胃 ,分别相当于 17. 2, 8. 6, 7. 3 g/kg 生药 ,是临床用量的 2, 1, 0. 5倍。阳性对照组以前列泰胶囊用蒸 馏水配制成混悬液 10 m l/δ 灌胃 ,相当于 0. 66 g/kg生药 ,是临床 用药量 1倍。各组大鼠每日给药 1次 ,连用 4周。 3　结果 3. 1　大鼠前列腺组织病理学改变 见图 1～图 6。光镜观察可 见 :正常对照组前列腺间质无肿胀 ,间质内偶见炎症细胞浸润和 成纤维细胞 ;腺腔大小不一 ,腺泡上皮多为单层柱状或立方 ,个别 呈假复层 ;腺腔内可见大量深粉染色的分泌物。模型组前列腺间 质内可见大量淋巴、单核细胞等炎细胞浸润 ,纤维组织增生明显 ; 血管扩张 ,充血明显 ;部分腺腔萎缩 ,腺腔内分泌物明显减少 ,呈 淡红染色 ,部分腺腔内有出血。 敦煌前列宝各剂量组前列腺间质内炎细胞浸润减少 ,间质内 成纤维细胞增生减轻 ,腺泡上皮多恢复正常 ,腺腔内分泌物明显 增多 ,且低剂量组较高、中剂量组明显。阳性对照组前列腺组织 病理改变与敦煌前列宝中剂量组相似。 图 1　空白对照组　　　　　　图 2　模型组 (HE染色 , 100 ×) 　　　　 (HE染色 , 100 ×) 图 3　阳性对照组　　　　图 4　敦煌前列宝低剂量组 (HE染色 , 100 ×) 　　　　 (HE染色 , 100 ×) ·4341· 时珍国医国药 2010年第 21卷第 6期 L ISH IZHEN MED IC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2010VOL. 21 NO. 6 图 5　敦煌前列宝中剂量组　　　　图 6　敦煌前列宝高剂量组 (HE染色 , 100 ×) 　　　　 (HE染色 , 100 ×) 3. 2　对大鼠前列腺组织匀浆 IL - 2含量的影响 结果见表 1。 表 1　各组大鼠前列腺组织匀浆 IL - 2含量的比较 ( €x ±s) pg·m l - 1 组别 IL - 2 空白对照 18. 696 3 ±4. 536 8 模型 26. 928 8 ±3. 040 93 3 阳性对照 20. 675 0 ±4. 582 5△△ 敦煌前列宝高剂量 19. 108 8 ±4. 268 7△△#★ 敦煌前列宝中剂量 20. 957 5 ±3. 493 1△★ 敦煌前列宝低剂量 23. 906 3 ±2. 838 0★ 　　与正常对照组相比 , 3 P < 0. 05, 3 3 P < 0. 01;与模型组相比 ,Δ P < 0. 05, △△P < 0. 01;与阳性对照组相比 , # P < 0. 05;前列宝 3个剂量组两两 相比 , ★P < 0. 05; n = 8 3. 3　对大鼠前列腺组织匀浆 IL - 8含量的影响 见表 2。 表 2　各组大鼠前列腺组织匀浆 IL - 8含量的比较 ( €x ±s) pg·m l - 1 组别 IL - 8 空白对照 0. 315 0 ±0. 142 2 模型 0. 542 5 ±0. 111 33 3 阳性对照 0. 380 0 ±0. 089 6△ 敦煌前列宝高剂量 0. 355 0 ±0. 124 9△ 敦煌前列宝中剂量 0. 357 5 ±0. 087 1△ 敦煌前列宝低剂量 0. 371 3 ±0. 127 7△# 　　与正常对照组相比 , 3 P < 0. 05, 3 3 P < 0. 01;与模型组相比 ,Δ P < 0. 05, △△P < 0. 01;与阳性对照组相比 , # P < 0. 05;前列宝 3个剂量组两两 相比 , ★P < 0. 05; n = 8 4　讨论 CAP是以骨盆生殖区疼痛和排尿异常为主要表现的临床症 候群 ,它严重影响患者的身心健康 ,同时也是许多其它男科疾病 的根源之一。现代医学针对本病提出了许多假说 ,但任何单一因 素或发病机理都不能完全很好地解释该病的发生 ,导致临床治疗 效果多不能尽如人意。中医典籍中虽无前列腺炎病名 ,但中医临 床以其关注“整体 ”,“辨证论治 ”的诊疗特色 ,在慢性非菌性前列 腺炎治疗中已显现出良好的应用前景。本研究所用敦煌前列宝 方是在敦煌出土卷子《辅行诀脏腑用药法要 》所载“大泻肾汤 ”的 基础上 ,依据慢性前列腺炎“肾虚为本 ,湿热、血瘀为标 ”的病机 本质 ,加减化裁而成。“大泻肾汤 ”以茯苓为君 ,“淡以利窍 ,甘以 助阳 ”;重用大黄为臣 ,以清泄湿热 ,活血化瘀之用 ;辅以黄芩 ,清 热燥湿 ,泻火解毒 ;独特之处 ,在荡涤袪实之中 ,妙用芍药护阴 ,佐 以干姜温阳辛开 ,阴阳并调 ,气化以行。敦煌前列宝方中又酌加 川牛膝 ,益母草以备活血化瘀、利尿通淋之效。 本研究采用传统的前列腺内注射消痔灵注射液方法成功复 制了慢性非细菌性前列腺炎动物模型 ,并且以促炎症细胞因子白 介素 ( IL - 2) ,白介素 ( IL - 8)为观察指标 ,研究敦煌前列宝的组 方配伍基础和对实验性非细菌性前列腺炎的作用机制 ,为临床治 疗慢性前列腺炎的理论依据 ,也为敦煌古方的临床开发提供基础 技术资料。例如通过对本研究中观测指标的分析可知 :前炎症细 胞因子 IL - 2水平在非细菌性前列腺炎大鼠的前列腺内明显增 高 ,而敦煌前列宝可降低 CAP模型大鼠局部 IL - 2的表达 ,并发 挥其治疗作用 ,而且高剂量组的治疗效果明显优于阳性对照药前 列泰 ;前炎症细胞因子 IL - 8水平在慢性细菌性前列腺炎的前列 腺内明显增高 ,与相关的研究结果 [ 2 ]一致 ,经过敦煌前列宝治疗 后 ,大鼠局部组织 IL - 8接近正常水平 ,再次证实了 IL - 8直接 参与了前列腺炎的发病机制以及敦煌前列宝的疗效 ,而且低剂量 组的疗效更优于前列泰。通过光镜观察发现 ,造模后前列腺组织 以慢性炎症的病理变化为主 ,以上皮细胞和腺体的增生与间质部 分的纤维化增生为主要特点 ,敦煌前列宝汤剂可以影响组织的渗 出、增生、变质过程 ,改善前列腺组织的病理变化。据此推测敦煌 前列宝作用的可能机制是 :抑制前炎症细胞因子 ( IL - 2和 IL - 8)的产生 ,通过复杂的分子机制 ,降低了白细胞在炎症部位的聚 集 ,从而减轻炎细胞浸润。另据研究结果提示 :敦煌前列宝低剂 量组在炎细胞浸润、上皮细胞变形、间质纤维增生等方面的改善、 减轻情况好于高剂量组 ,亦即剂量并非与疗效成正比。反观中医 临床治疗此病多以大剂苦寒药袪热除湿在先 ,而效果往往并非所 愿 ,其中原委尚待研究。 参考文献 : [ 1 ]　翟亚春. 非细菌性前列腺炎的中医证治研究 [ J ]. 江苏中医 , 2001, 22 (9) : 9. [ 2 ]　李宏军 ,商学军 ,黄宇烽. IL - 10、IL - 8在慢性前列腺炎中的改变 及意义 [ J ]. 中华男科学杂志 , 2004, 10 (7) : 486. ·5341· L ISH IZHEN MED IC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2010VOL . 21 NO. 6 时珍国医国药 2010年第 21卷第 6期