吡非尼酮抗肝纤维化机制

第 30卷第 3期 2010年 6月 国际病理科学与临床杂志 � � http: / /www. g jb.l net Internat ional Jou rnal of Pathology and C lin icalM ed icine V o.l 30� No. 3 Jun. � 2010 收稿日期: 2010- 04- 10� � 修回日期: 2010- 05- 12 作者简介:李丽,硕士研究生,主要从事肝纤维化治疗的研究。 通信作者:阳惠湘, E�m ai:l yang_hx430@ 163. com 基金项目:湖南省科技厅重大课题 ( 05 sk1002�3)。Th isw ork w as supported by K ey Project of Departmen t of Scien ce and Technology, Hunan Pro� vince, P. R. C hin a ( 05 sk1002�3) . 吡非尼酮抗肝纤维化机制 李丽 � 综述 � � 阳惠湘 � 审校 (中南大学湘雅医院消化内科, 长沙 410008) [摘要 ] � 吡非尼酮是正在研发的新型广谱抗纤维化药物, 目前抗肝纤维化治疗已进入�期临床试验阶段,其作 用机制与抑制脂质过氧化、减轻炎症反应、抑制肝星状细胞活化和增殖、调节细胞外基质的合成与降解有关。本文对 吡非尼酮抗肝纤维化的研究现状及作用机制作一综述。 [关键词 ] � 吡非尼酮; � 肝纤维化; � 作用机制 do:i 10. 3969 / .j issn. 1673�2588. 2010. 03. 009 Mechanism of pirfenidone against liver fibrosis LIL ,i YANGHu ix iang (Departm ent of Ga stroen terology, X iangyaH ospital, Centra l Sou th University, Chang sha 410008, Ch ina ) [Abstract] � P irfenidone is a nove l drug of anti�fibrosis w ith broad�spectrum. Currently, p irfen idone is in the Phase� clinica l tria l stage for liver f ibrosis treatmen.t It has been shown that p irfenidone exerted the effect of anti�fibrosis through multiple mechan isms including inh ib iting lipid perox idation, inflamma� t ion, hepat ic ste llate ce ll activation and pro liferation, and regu lating the ex trace llularmatrix synthesis and degradation. Th is art icle summarized the progress of p irfenidone in treating liver fibrosis and the potent ial mechan ism s. [K ey words] � pirfen idone; � liver fibrosis; � mechan ism [ Int J Patho lC linM ed, 2010, 30( 3): 0220�06] � � 肝纤维化 ( hepatic �brosis)是指各种致病因素引 起的肝脏慢性损害,在其修复过程中所导致的胶原蛋 白等细胞外基质 ( ex tracellularmatrix, ECM )合成和降 解平衡失调, 致使肝内 ECM异常增多和过度沉积的 病理过程 [ 1]。肝纤维化是进一步发展至肝硬化的必 经途径, 而肝硬化是慢性肝病的重要致死原因。研 究 [ 2]认为肝纤维化是可以逆转的。肝纤维化病因复 杂,难以早期发现,针对肝纤维化本身的药物,如干扰 素、秋水仙碱、中药等, 它们或有副作用,或疗效不确 切,目前还没有药物被美国食品药品监督管理局 ( FDA )批准用于抗肝纤维化治疗。吡非尼酮 ( p irfeni� done, PFD)是近年来国外研究较多的一种新的具有广 谱抗纤维化作用的吡啶酮类化合物,对肺、肾、心脏、 肝脏等器官纤维化均有很好的治疗作用 [ 3�6 ]。在日 本, PFD已于2008年 11月被批准上市,用于特发性肺 间质纤维化的治疗 [ 7] , 在美国, PFD也完成了肾纤维 化和多发性硬化症的�期临床试验 [ 8]。本文主要阐述 PFD抗肝纤维化机制的研究进展。 1� 药代动力学及副作用 PFD的结构是 5�甲基�1�苯基�2( 1氢 ) �吡啶酮, 220 第 3期 李丽,等:吡非尼酮抗肝纤维化机制 第 30卷 分子式 C12H11NO,相对分子质量为 185. 2,白色结晶性 粉末。PFD为 1970年合成的小分子化合物,最初研 究发现其具有一定的抗炎作用,后来发现 PFD具有抗 纤维化作用,且不良反应小。 1995年 Iyer等 [ 9]首先报 道 PFD可显著阻止博来霉素诱导的仓鼠肺纤维化形 成,随后 PFD在多种器官纤维化中均被证实有良好的 抗纤维化作用。 多位学者 [ 10�13]在不同动物及人体内进行 PFD药 代动力学研究,发现 PFD体内吸收迅速,以肝、肾、肺 等血流丰富的部位浓度较高、脂肪组织浓度较低,最 高血药浓度与剂量呈直线相关性, 与时间无关;半衰 期短,耐受性良好;食物可显著影响其吸收量、吸收速 度及峰值浓度, 性别不影响其药代动力学变量。PFD 的副作用轻微,主要包括胃肠道症状、光过敏、呼吸困 难、疲倦及皮疹等,减少 PFD剂量或与食物同时服用、 使用抗酸药后胃肠道症状可缓解,光过敏及皮疹等不 良反应多在停药后即消失 [ 14]。 2� PFD抗肝纤维化作用及机制 2. 1� PFD抗肝纤维化作用 PFD在多种肝纤维化动物模型中均具有明显的抗 肝纤维化作用。Tada等 [ 15]用 PFD 500mg / ( kg� d)预 防性治疗二甲基亚硝胺 ( dim ethyln itrosam ine, DMN ) 诱导的肝纤维化大鼠 4周, 发现 PFD能显著阻止 DMN所致的大鼠体质量减轻, 降低肝组织羟脯氨酸 含量, 抑制�型胶原 mRNA的表达,减轻静脉周围及 小叶中心纤维组织, 使肝纤维化程度较模型组降低 40%。Garc ia等 [ 16 ]用 PFD 500 mg / ( kg� d)治疗四 氯化碳 ( carbon tetrachloride, CC l4 )诱导的肝纤维化 大鼠 3周, 肝组织羟脯氨酸含量、�、�、�型胶原 mRNA表达水平均明显降低, 肝纤维化程度较模型 组降低 70%;他们另以 PFD 200mg / ( kg� d)治疗胆 道结扎 4周的肝纤维化大鼠, 发现 PFD可显著降低 肝脏羟脯氨酸含量, 肝纤维化程度减轻 50%。 Zhao 等 [ 17]用 PFD 250mg / ( kg� d)预防性治疗 CC l4诱导 BALB /c小鼠肝纤维化 4周,肝纤维化半定量评分及 羟脯氨酸含量较模型组分别减少 49. 8%和 44. 9%; 同时用 PFD 250 mg / ( kg� d)预防性治疗人白蛋白 诱导W istar肝纤维化大鼠 8周后, 肝纤维化半定量 评分及羟脯氨酸含量较模型组分别减少 45% 和 51%。 2. 2� PFD抗肝纤维化作用机制 不同原因诱导的肝纤维化产生机制不同, PFD 在多种肝纤维化动物模型中的抗肝纤维化作用机制 尚不完全清楚, 目前研究认为其抗肝纤维化作用与 以下几个方面有关 [ 8] : ( 1)抑制脂质过氧化; ( 2)减 轻炎症反应; ( 3)抑制肝星状细胞 ( hepat ic stellate cel,l HSC)活化、增殖; ( 4)调节 ECM的合成与降解。 2. 2. 1� 清除活性氧,抑制脂质过氧化 氧化应激指机体或细胞内活性氧 ( reactive oxy� gen species, ROS)过度产生和 /或抗氧化防御功能减 弱,两者之间平衡失调, 引起组织、细胞损伤的一种 状态。ROS包括氧自由基及其歧化产物, 如超氧阴 离子自由基 ( O2 - )、氢化氧基 ( � HO2 )、过氧化氢 (H 2O 2 )、羟自由基 ( � OH)等;其他氧化物还有脂质 过氧化物、丙二醛 ( ma lond ia ldehyde, MDA )及一氧化 氮 ( n itric ox ide, NO)等。ROS可引起脂质过氧化反 应、放大炎症反应,使体内蛋白及酶变性、DNA氧化 损伤;还是重要的细胞内信使, 活化多条信号转导通 路,间接引起组织、细胞损伤 [ 18]。研究 [ 19�22]发现: 几 乎所有临床和实验性肝纤维化都与氧化应激有关。 M isra等 [ 23]发现 PFD可抑制还原型辅酶 � ( NAD� PH )介导的羊肝微粒体脂质过氧化, 并呈剂量依赖 性,当 PFD浓度为 6 mmo l/L时,可抑制 50%脂质过 氧化反应; 另外, PFD还是强有力的羟自由基清除 剂,浓度为 2. 5 mmo l/L时, 可使羟自由基的活性下 降 50%。N akanishi等 [ 24]发现: PFD可显著抑制白 细胞介素�1� ( in terleukin�1�, IL�1�)刺激肝细胞产 生 NO, 并呈浓度依赖性, 在 5 mmo l/L时达最大效 应;同时 PFD可在 mRNA及蛋白水平降低诱生型一 氧化氮合酶 ( iNOS)的合成, 呈剂量和时间依赖性。 NO是 L�精氨酸在一氧化氮合成酶 ( NOS)作用下的 产物, 故认为 PFD主要通过抑制 iNOS转录降低 NO 的生成,减少过多 NO对组织的损伤。研究 [ 25�26]发 现: PFD可显著抑制氧化应激产物 MDA含量, 增加 清除体内自由基的酶 � � � 超氧化物歧化酶 ( superox� ide dismutase, SOD)活性, 减轻肝纤维化。 2. 2. 2� 减轻炎症反应 肝纤维化是组织对炎症损伤的一种修复反应, 大量炎症因子参与,如肿瘤坏死因子 ��( tumor necro� sis factor��, TNF��) , IL�1, IL�6及干扰素��( interfer� on��, IFN��)等,可使静息状态的肝星状细胞 (HSC ) 活化, 启动肝纤维化 [ 27�28]。TNF��是一类重要的致 炎因子,由活化的巨噬细胞、单核细胞、T细胞产生, 肝纤维化时 TNF��主要聚集炎症细胞、促进肝细胞 凋亡和坏死,激活 HSC,促进后续的组织修复和纤维 化过程。 PFD可显著降低脂多糖 ( lipopolysaccha� 221 第 3期 国际病理科学与临床杂志 � � http: / /www. g jb.l net 第 30卷 ride, LPS)刺激引起的人单核细胞 ( human monocytic cells, THP�1)及鼠巨噬样细胞 RAW264. 7细胞分泌 过多 TNF��[ 29�30 ] ;可抑制内毒素休克小鼠体内前炎 症因子 TNF��, IL�6, IL�12及 IFN��表达, 并提高抗 炎症因子 IL�10含量 [ 30�32]。肝脏缺血再灌注模型 中,在一些炎症因子的诱导下,如细胞因子诱导的中 性粒细胞趋化因子 ( cy tok ine�induced neutroph il che� moattractan t , CINC )、巨噬细胞炎症蛋白�2 ( macro� phage inflamm atory pro tein�2, M IP�2) , 大量的中性粒 细胞在肝脏浸润, 导致肝脏炎症损伤, 启动肝纤维 化。K aibori等 [ 33]用 IL�1�刺激原代培养肝细胞释 放 C INC和 M IP�2, PFD干预后可显著降低二者的蛋 白表达,减少其诱导的中性粒细胞向肝脏炎症区域 趋化而造成的肝损伤。多位研究者 [ 34�36 ]采用 70% 肝切除或缺血再灌注大鼠, LPS刺激诱导肝损伤, PFD干预后, 可显著降低受损肝脏组织及血清中 TNF��, IL�1, IFN��, IL�6, C INC及 iNOS的产生,减轻 LPS诱导的中性粒细胞等炎症细胞在肝内浸润造成 的肝损伤,显著降低血清丙氨酸氨基转移酶 ( a lanine am inotransferase, ALT )、天门冬氨酸氨基转移酶 ( as� partate am inotransferase, AST)、总胆红素及乳酸脱氢 酶 ( lacta te dehydrogenase, LDH )含量, 提高大鼠生存 率。各种原因所致肝脏炎症反应是肝纤维化的启动 阶段, PFD可抑制炎症反应, 阻断肝纤维化于早期 阶段。 2. 2. 3� 抑制 HSC活化与增殖 肝纤维化的主要特征是 ECM过度沉积,活化的 HSC是产生 ECM的主要细胞, HSC激活并转化为肌 成纤维细胞 ( myo fibroblas,t M yoF )是肝纤维化发生、 发展的核心环节,活化并发生转分化的 HSC特异性 表达 ��平滑肌肌动蛋白 ( ��smoo th muscle actin, �� SMA ),抑制 HSC活化或增殖均可减轻肝纤维化 [ 37]。 Tada等 [ 15 ]发现: PFD可显著降低 HSC合成的 I型胶 原含量,且呈剂量依存关系, 浓度在 5 mmo l/L时即 能降低约 50%的胶原沉积,且大于 90%的细胞仍然 存活, 认为 PFD通过抑制 HSC合成分泌 I型胶原而 减轻肝纤维化。 D i等 [ 38]从成熟 SD大鼠肝脏中分 离 HSC培养 24 h后,以血小板源性生长因子 ( plate� let�derived g row th factor, PDGF ) 25 ng /mL诱导 HSC 增殖, 给 与 不 同 浓 度 PFD ( 0. 1, 1, 100 和 1 000 �mo l/L ) 干 预 24 h, 结果 显 示: PFD 从 1 �mol/L至 1 000 �mo l/L均可抑制 HSC增殖,并呈 剂量依赖性;当浓度达到 1 000 �mo l/L可完全抑制 HSC的增殖,不影响 HSC的活性,亦不诱导 HSC凋 亡,同时发现 PFD可抑制蛋白激酶 C ( PKC )及 N a+ � H +泵活性, 但不影响 PDGF受体、细胞外信号调节 激酶 1 /2 ( extracellular signa l�regulated kinase 1 /2, ERK1 /2 ) 及磷酸化 p70 核糖体蛋白 S6 激酶 ( pp70 S6K )蛋白。N a+ �H +泵在氧化应激产物下可诱 导 HSC的增殖及 �型胶原的沉积, 此次实验表明: PFD抑制 PDGF诱导的 HSC增殖, 不是通过抑制其 PDGF受体自磷酸化作用及 ERK1 /2和 pp70S6K活 性,而是通过抑制 PKC的活性来抑制 N a+ �H +泵的 活性。Garc ia等 [ 16] 用 500 mg / ( kg� d) PFD治疗 CC l4诱导的肝纤维化大鼠 3周后, ��SMA及增殖细 胞核抗原 ( PCNA )阳性程度均明显降低, 提示 HSC 活化和增生减少。 Zhao等 [ 17] 用转化生长因子 � ( transform ing grow th factor��, TGF��) 8 ng /mL刺激 人类 HSC 永生化细胞株 ( LX�2 ) , 并给与 PFD 100 �mo l/L及 1mmol /L干预 24 h,发现 PFD可显著 降低 ��SMA及�型胶原 mRNA含量, 且呈剂量依赖 性。阳惠湘等 [ 39]用 500 mg / ( kg� d) PFD预防性治 疗二甲基亚硝胺 ( DMN )诱导肝纤维化大鼠 4周, 无 论免疫组织化学法还是 Rea l�tim e PCR均显示 PFD 可显著降低 H SC活化指标 ��SMA表达,肝脏纤维化 评分、羟脯氨酸含量、�、�型胶原蛋白及 mRNA均 明显下降。 2. 2. 4� 调节 ECM的合成和降解 参与肝纤维化进程的细胞因子复杂,其中 TGF� �1是目前所知最强的促肝纤维化因子, 它能激活 HSC并促进其合成分泌大量 ECM,抑制基质金属蛋 白酶 ( matrix metalloprote inase, MMPs)合成, 同时促 进 HSC分泌组织金属蛋白酶抑制剂 ( t issue inhibitor of m etalloproteinase, TIMPs), 抑制 ECM 降解 [ 40�41] ; PDGF是 HSC增殖最有效的丝裂原, 肝纤维化时表 达增加,显性失活可溶性 PDGF��受体可减轻肝纤 维化 [ 42�44]。肝脏中 ECM 的降解主要由 MMPs与其 特异性抑制物� T IM Ps两个作用相反的家族调节。 MMPs是参与 ECM 降解的重要酶系, T IMPs可与 MMPs酶原以 1�1非共价键结合抑制酶原活化,并能 灭活活化的 MMPs,从而使 MMPs失去降解功能 [ 45]。 肝纤维化时 TIMPs增加, 抑制 MMPs活性, 使 ECM 降解减少, 胶原沉积增加。D i等 [ 46]用含 0. 5% PFD 食物治疗 DMN诱导的肝纤维化大鼠 3周,发现 PFD 可以降低 TGF��1, TIMP�1及 MMP�2 mRNA含量, 同 222 第 3期 李丽,等:吡非尼酮抗肝纤维化机制 第 30卷 时降低 �型胶原, 减轻肝纤维化程度。在肝纤维化 早期, 基底膜的降解有利于 HSC的激活, 而促进纤 维化的发生, MMP�2主要降低基底膜胶原, 故在肝纤 维化早期 MMP�2常增高, 抑制 MMP�2 mRNA的表 达可以抑制肝纤维化的发展,以上结果表明, PFD通 过抑制 TGF��1和 MMP�2来抑制 ECM的沉积;同时 PFD可以降低 T IM P�1 mRNA水平, 促进已沉积的 ECM的降解, 在一定程度上逆转已经形成的纤维 化。Garcia等 [ 16]用 500 mg / ( kg� d) PFD治疗 CC l4 诱导的肝纤维化大鼠 3周,发现 PFD可显著降低肝 组织中 TIMP�1, TGF��1及纤溶酶原激活物抑制剂 ( PA I�1)mRNA表达水平, 从而降低 �、�、�型胶原 mRNA含量,减轻肝纤维化,该实验表明 PFD通过抑 制促纤维化因子 TGF��1的表达而降低 ECM 的沉 积,抑制 TIMP�1和 PA I�1而促进 ECM的降解。阳 惠湘等 [ 39]研究证实: PFD可在转录及翻译水平抑制 TGF��1表达及其下游因子结缔组织生长因子 ( con� nective t issue grow th factor, CTGF)水平, 同时可抑制 TIMP�1蛋白表达。杜磊等 [ 47 ]用 PFD预防性治疗 DMN诱导肝纤维化大鼠 4周, 发现 PFD可显著降低 大鼠血清 TGF��1水平, 同时血清肝纤维化指标透 明质酸 (HA )、层粘连蛋白 ( LN )、�型前胶原 ( PC � )、IV型胶原 ( IV�C)均降低。 3� PFD的临床应用前景 2002年就有 PFD用于抗肝纤维化的临床试验 报道, Angulo等 [ 48]用 2 400 mg / ( kg� d) PFD口服 治疗 24名原发性胆管炎 ( P rimary sc lerosing cho lang i� t is, PSC)患者 1年,仅 11名患者完成了试验,发现患 者血清指标、肝组织病理炎症、纤维化分级及胆管造 影结果均未见明显改变。虽然此次小样本试验中 PFD未能明显改善 PSC患者病情, 但仍为后续临床 研究提供了经验。近年学者 A rmendariz�Borunda 等 [ 49]用 1 200 mg /d PFD治疗 15位无饮酒史, 也未 进行抗病毒治疗的慢性丙型肝炎肝纤维化患者 1 年,在第 6个月时 HCV RNA水平, 显示 9人病 毒量下降, 2人无变化, 4人有所增加;随治疗时间变 化 ALT检测显示 4人一直正常, 7人下降, 1人无变 化, 3人有轻度增加,彩色超声波显示脾脏大小没有 显著变化,肝回声强度减弱,门静脉直径没有显著变 化而门静脉血流量显著增加; 53. 3%患者的组织学 活动指数 ( histo log icalactiv ity index, HA I)评分显示 炎症坏死分数下降 2分甚至更多; 30%患者的肝纤 维化程度减轻; 60%患者肝脂肪变性减轻; 70%患者 肝细胞有再生表现; Rea l�tim e PCR检测 �型胶原、 TGF��、T IM P�1mRNA均有明显降低。这次试验虽然 患者不多,需大样本的临床试验来证实,但该实验证 实 PFD有抗炎和抗纤维化作用,能改善患者的生活 质量, 并且副作用很小, 为 PFD应用于临床提供了 广阔前景。 4� 结 � 语 吡非尼酮是一种具有广谱抗纤维化和抗炎作用 的新药, 目前认为 PFD是通过减轻炎症反应、抗氧 化应激、调节参与纤维化的多种细胞因子 (主要是下 调 TGF��和 PDGF等 )、抑制 HSC活化增殖、减少 ECM的沉积, 以及通过下调 TIMP�1在一定程度上 促进 ECM的降解等方面来达到的抗肝纤维化作用。 目前 PFD治疗肝纤维化的研究大都处在体外试验 和动物试验上,有小规模的临床试验,但治疗 PSC的 临床试验效果不明显,对于其抗肝纤维化的远期疗 效、机制、副作用尚需深入研究, 虽然如此, 对 PFD 的研究无疑为治疗慢性肝纤维化疾病提供了新的 希望。 参 � 考 � 文 � 献 [ 1] � Bataller R, Brenner DA. L iver fib rosis[ J] . J C lin Invest, 2005, 115( 2) : 209�218. [ 2] � Ism ailMH, P inzan iM. Reversal of liver fibrosis[ J]. S aud i JGas� troentero,l 2009, 15 ( 1) : 72�79. [ 3] � A l�Bayat iMA, X ie Y, Mohr FC, et a.l E ffect of pirfen idone a� gain st vanadate� indu ced k idney fib rosis in rats[ J] . B ioch em Phar� m aco,l 2002, 64( 3) : 517�525. [ 4 ] � V an E rp C, Irw in NG, H oey A J. Long�term adm in istrat ion of pir� fen idone imp roves card iac function in mdx m ice [ J ] . Muscle N erve, 2006, 34 ( 3) : 327�334. [ 5] � Oku H, Sh im izu T, Kaw ab ata T, et a.l Ant ifib rotic act ion of pir� fen idone and predn isolon e: d ifferent ef fects on pu lmonary cytok ines and grow th factors in b leomycin� induced m urine pu lm onary fib rosis [ J]. Eu r J Pharm aco,l 2008, 590( 1�3 ): 400�408. [ 6] � G rizz i F. P irfen idon e: a poten t ial therapeu tic op tion in the treat� m en t of liver f ibrosis[ J] . C l in E xp Pharm acol Physio,l 2009, 36 ( 10) : 961�962. [ 7] � Regu latory w atch: First d rug for id iopath ic pu lm onary f ibrosis ap� p roved in Japan [ J] . Nat Rev D rug D iscov, 2008, 7 ( 12) : 966� 967. [ 8] � Lasky J. P irfen idon e[ J] . IDrugs, 2004, 7( 2 ): 166�172. [ 9] � Iyer SN, W i ld JS, S ch ied tM J, et a.l D ietary intak e of p irfen idone am eliorates bleom ycin� indu ced lung f ibros is in ham sters[ J] . J Lab 223 第 3期 国际病理科学与临床杂志 � � http: / /www. g jb.l net 第 30卷 C linM ed, 1995, 125 ( 6) : 779�785. [ 10 ] M irkov ic S, S eym ou rAM, Fenn ing A, et a.l A ttenuat ion of card i� ac fib ros is by p irfen idone and am iloride in DOCA�salt hyperten sive rats[ J]. B r J Pharm aco,l 2002, 135 ( 4) : 961�968. [ 11 ] G iriSN, W ang Q, X ie Y, et a.l Pharm acok in et ics andm etabolism of a novel ant if ibrot ic drug pirfen idone, in m ice follow ing in trave� nou s adm in istration[ J] . B iopharm D rug D ispos, 2002, 23 ( 5 ): 203�211. [ 12 ] Bru ssML, M argolin SB, G iri SN. Pharmacok in et ics of orally ad� m in istered p irfen idone inm ale and fema le beag les[ J] . JVet Phar� m acolTher, 2004, 27( 5) : 361�367. [ 13 ] Sh i S, Wu J, ChenH, et a.l S ingle� andm u ltip le�dose ph arm aco� k inet ics of p irfen idone, an an tifib rotic agent, in h ealthy Ch inese volun teers[ J] . J C lin Ph arm aco,l 2007, 47( 10) : 1268�1276. [ 14 ] Raghu G, John sonWC, LockhartD, et a.l Treatm en t of idiopath ic pu lm onary fib rosis w ith a new ant ifib rotic agen t, p irfen idone: re� su lts of a prosp ective, open�label Phase II study[ J] . Am JResp ir C rit C areM ed, 1999, 159( 4 Pt 1) : 1061�1069. [ 15 ] Tada S, Nakam u ta M, En jojiM, et a.l P irfen idone inh ib its d im e� thy ln itrosam ine�induced hepat ic f ibros is in rats[ J] . C lin Exp Phar� m acol Physio,l 2001, 28( 7) : 522�527. [ 16 ] G arcia L, H ern andez I, SandovalA, et a.l P irfen idon e effectively reverses exp erim en tal liver fib rosis[ J] . JH ep ato,l 2002, 37( 6 ): 797�805. [ 17 ] Zhao XY, Zeng X, L iXM, et a.l P irfen idone inh ib its carbon tetra� chloride� and album in comp lex�induced l iver fib rosis in roden ts by p revent ing activation of h epatic s tel late cells [ J ]. C lin Exp Phar� m acol Physio,l 2009, 36( 10 ) : 963�968. [ 18 ] 张晓岚, 王占魁, 姜慧卿. 氧化应激与肝纤维化 [ J] . 临床肝 胆病杂志, 2007, ( 3) : 226�229. ZHANG X iao lan, WANG Zhanku,i JIANG H u iq ing. Oxidat ive stress and liver fib rosis[ J] . Journal of C lin icalH epato logy, 2007, ( 3) : 226�229. [ 19 ] L jubuncic P, Tanne Z, Bom zon A. Evidence of a system ic phe� nom enon for oxidative stress in choles tat ic liver d isease[ J] . Gut, 2000, 47( 5) : 710�716. [ 20 ] Parola M, Rob ino G. Ox idative stress�related m olecu les and liver f ibros is[ J] . JH epato,l 2001, 35( 2 ) : 297�306. [ 21 ] V endem iale G, G rattagliano I, C aru soM L, et a.l In creased ox ida� t ive stress in d im ethyln itrosam ine� induced liver fib ros is in th e rat: effect of N�acetylcystein e and interferon�alpha [ J ] . Tox icol App l Pharm aco,l 2001, 175 ( 2) : 130�139. [ 22 ] Reeves HL, Friedm an SL. A ctivation of hepatic stellate cells��a key issue in liver f ibros is[ J] . Fron t B iosc,i 2002, 7: d808�826. [ 23 ] M isra HP, Rab id eau C. Pirfen idone inh ib its NADPH �dep endent m icrosom al lip id peroxidat ion and scavenges hydroxy l rad icals[ J]. M ol Cell B iochem, 2000, 204( 1�2) : 119�126. [ 24 ] Nakan ishi H, KaiboriM, Tesh im a S, et a.l P irfen idone inh ib its the induction of iNOS st imu lated by in terleuk in�1beta at a step of NF�kappaB DNA b ind ing in hepatocytes[ J]. JH epato,l 2004, 41 ( 5 ): 730�736. [ 25 ] W ang F, W en T, Chen XY, et a.l Protect ive effects of p irfen idone on D�galactosam in e and lipopolysaccharide� induced acute hepato� tox icity in rats[ J] . In flamm Res, 2008, 57 ( 4) : 183�188. [ 26] S alazar�M on tesA, Ru iz�Corro L, Lopez�ReyesA, et a.l Poten t an� t iox idan t role of p irfen idone in experim ental cirrhos is [ J ] . E ur J Pharm aco,l 2008, 595( 1�3) : 69�77. [ 27 ] Gut ierrez�Ruiz MC, Robles�D iaz G, K ershenob ich D. Emerging concep ts in in flamm ation and f ibros is[ J] . A rch M ed Res, 2002, 33 ( 6) : 595�599. [ 28 ] Wynn TA. C ellu lar and m olecu lar m echan ism s of fib rosis[ J] . J Patho,l 2008, 214( 2 ) : 199�210. [ 29] Grat tend ickK J, N akash im a JM, Feng L, et a.l E ffects of th ree an� t i�TNF�alpha drugs: etanercept, inf lix imab and p irfen idone on re� lease ofTNF�alpha in m edium and TNF�alph a associated w ith the cell in vitro[ J] . In t Imm unopharmaco,l 2008, 8( 5) : 679�687. [ 30] N akazato H, Oku H, Y am ane S, et a.l A novel an ti�fibrot ic agent p irfen idone supp resses tum or necros is factor�alpha at th e transla� t iona l level[ J] . Eu r J Ph arm aco,l 2002, 446( 1�3) : 177�185. [ 31 ] Oku H, N akazato H, H orikaw a T, et a.l P irfen idon e suppresses tumor necros is factor�alph a, enh ances in terleuk in�10 and p rotects m ice from endotoxic shock [ J] . E ur J Ph arm aco,l 2002, 446 ( 1� 3) : 167�176. [ 32] H aleML, M argol in SB, Krakauer T, et a.l P irfen idon e b locks the in vitro and in vivo effects of staphy lococcal enterotox in B [ J]. In� fect Immun, 2002, 70( 6 ) : 2989�2994. [ 33 ] K aiboriM, Y anagidaH, Yokoigaw a N, et a.l E f fect of p irfen idone on induction of chem ok ines in rat hepatocytes [ J ]. Transp lant P roc, 2004, 36 ( 7) : 1980�1984. [ 34 ] Tsu ch iya H, Kaib oriM, Yanag ida H, et a.l P irfen idone p revents endotoxin�induced liver in ju ry after partialh epatectom y in rats[ J]. JH ep ato,l 2004, 40 ( 1) : 94�101. [ 35 ] Ka iboriM, Yanagida H, Uch id aY, et a.l Pirfen idone protects en� dotox in� induced liver in ju ry after h epatic ischem ia in rats [ J ]. T ransp lan t Proc, 2004, 36( 7 ): 1973�1974. [ 36 ] KaiboriM, Yanagida H, Yokoigaw a N, et a.l E ffects of p irfen i� done on endotox in�indu ced liver in ju ry after partial hepatectom y in rats[ J] . T ran sp lant Proc, 2004, 36( 7) : 1975�1976. [ 37 ] Bataller R, B renner DA. H epat ic stellate cells as a target for the treatm en t of liver f ibros is[ J] . S em in L iver D is, 2001, 21 ( 3) : 437� 451. [ 38] D iSA, Bend ia E, S veg liati BG, et a.l E f fect of p irfen idone on rat hepat ic stellate cell pro liferat ion and collagen p roduction [ J ]. J H epato,l 2002, 37( 5 ): 584�591. [ 39 ] 阳惠湘. AKF�PD对 DMN诱导大鼠肝纤维化预防性治疗的实 验研究 [ D] .长沙:中南大学湘雅医院, 2008. YANG H u ix iang. An experim ental study on the p reventative treat� m en t effects ofAKF�PD on rat liver fib rosis induced by dim ethyln i� trosam ine [ D ] . Changsh a: X iangya H osp ita l of C entral South Un ivers ity, 2008. 224 第 3期 李丽,等:吡非尼酮抗肝纤维化机制 第 30卷 [ 40 ] G ressner AM, W eisk irchen R, Breitkop fK, et a.l Roles of TGF� beta in hepatic f ibros is[ J] . Fron t B iosc,i 2002, 7: d793�807. [ 41 ] Tsukada S, Parsons C J, R ippe RA. M ech an ism s of liver fibros is [ J] . C lin Ch im A cta, 2006, 364( 1�2 ): 33�60. [ 42 ] P inzan iM, G esualdo L, Sabbah GM, et a.l E ffects of p latelet�de� rived grow th factor and other polyp ept ide m itogens on DNA synthe� s is and grow th of cu ltured rat liver fat�s toring cells[ J] . J C lin In� vest, 1989, 84( 6 ) : 1786�1793. [ 43 ] Sh iraish iT, M orim oto S, Koh E, et a.l Increased release of p late� let�derived grow th factor from p latelets in ch ron ic liver d isease[ J]. Eur JC lin Ch em C lin B ioch em, 1994, 32( 1) : 5�9. [ 44 ] Borkham�K amphorst E, H errm ann J, S toll D, et a.l Dom inan t� negative solub le PDGF�beta recep tor inh ib its hepat ic stellate cel l activation and attenuates l iver f ibrosis [ J] . L ab Invest, 2004, 84 ( 6) : 766�777. [ 45 ] A rthur M J, Ireda le JP, M ann DA. T issue inh ib itors ofm etal lop ro� teinases: ro le in liver fib rosis and a lcoh olic liver d isease[ J] . A lco� hol C lin Exp Res, 1999, 23 ( 5) : 940�943. [ 46 ] Di SA, B end ia E, M acarriG, et a.l Th e ant i� fibrotic effect of pir� fen idone in rat liver fibrosis is m ed iated by dow n regu lat ion of p ro� collagen alpha1 ( I), T IMP�1 and MMP�2 [ J] . D ig L iver D is, 2004, 36 ( 11) : 744�751. [ 47 ] 杜磊, 王昌源, 张立华, 等. 吡非尼酮对实验性大鼠肝纤维化 的作用 [ J] . 山东大学学报:医学版, 2009, 47( 11 ): 50�54. DU L e,i WANG Changyuan, ZHANG Lihu a, et a.l S tud ies on ef fects of p irfen idone for hepat ic fib rosis in experim ental rats [ J ]. Journal of Sh andong Un iversity. M ed ical S cien ces, 2009, 47 ( 11 ): 50�54. [ 48 ] Angu lo P, M acC arty RL, Sy lvestre PB, et a.l P irfen idone in the treatm ent of prim ary sclerosing cholang it is[ J] . D ig D is Sc,i 2002, 47( 1) : 157�161. [ 49 ] A rm endariz�Borunda J, Islas�CarbajalMC, M eza�Garcia E, et a.l A p ilot study in patientsw ith estab lished advanced liver f ibrosis u� sing p irfen idone[ J] . Gu t, 2006, 55 ( 11) : 1663�1665. 欢迎订阅 2010年 �中南大学学报 (医学版 ) � �中南大学学报 (医学版 ) �原名�湖南医科大学学报 �, 创刊于 1958年,为教育部主管、中南大学主办的 医药卫生类综合性学术期刊。是中国科技论文统计源期刊、中国生物医学核心期刊及中国期刊方阵的 �双 效 �期刊;多次被国家和省部级新闻和出版部门评为优秀科技期刊, 2008年又被评为 �第二届中国高校精品 科技期刊�和 �中国精品科技期刊 �; 并被美国医学文献分析和联机检索系统 (M EDLINE)及其 �医学索引 � ( IM ), 荷兰 �医学文摘 � (EM ) ,美国�化学文摘 � (CA ) ,俄罗斯�文摘杂志� (AJ, VIN ITI) ,中国科学引文数据 库 (核心库 ) ( CSCD)等国内外多家重要数据库和权威文摘期刊收录。 本刊为月刊,国际开本 ( A4幅面 ), 每期 96页, 每月月末出版。内芯采用进口亚光铜版纸印刷, 图 片彩色印刷,封面美观大方。定价 10. 0元 /册, 全年 120元。国内外公开发行。国内统一刊号: CN43�1427 / R, 国际标准刊号: ISSN 1672�7347; 国内邮发代号: 42�10,国外邮发代号: BM 422;欢迎新老用户向当地邮局 (所 )订阅,漏订或需增订者也可直接与本刊编辑部联系订阅。 欢迎投稿 � � � 欢迎订阅 地址:湖南省长沙市湘雅路 110号湘雅医学院 75号信箱 � � � � 邮编: 410078 电话: 0731�84805495; 0731�84805496 传真: 0731�84804351 E�ma i:l xyxb2005@ V IP. 163. com; xyxb2005@ 126. com H ttp: / /xbyx. xysm. net �中南大学学报 (医学版 ) �编辑部 225