济南显微外科医院自体髂骨膜游离移植股骨头再生软骨的形态学观察

济南显微外科医院自体髂骨膜游离移植股骨头再生软骨的形态学观察 自体髂骨膜游离移植股骨头再生软骨的形态学观察 济南显微外科医院 中医科 周训坤 导读:济南显微外科医院是以外科，内科，中医科，美容整形科，康复医学科等为特色的经济南市卫生局批准成立的二级专科医院，山东省非营利性定点医疗机构、山东省医疗救助定点医疗机构、济南市城镇职工基本医疗保险定点医疗机构、多家商业保险公司定点医疗机构、新型农村合作定点医疗机构。 观察大面积自体游离髂骨膜移植于狗股骨头后的形态学变化。方法 16只成年健康杂种狗随机分为2组，实验组12只，对照组4只。咬除右侧股骨头关节软骨近端2/3，用纤维蛋白粘合剂将髂骨膜粘附于修整好的股骨头上并固定4,6针;对照组仅咬除软骨。术后2、4、8、12周分批处死动物，移植部位取材作光镜、电镜观察。结果 实验组术后 2周移植骨膜内面细胞增殖活跃，8,12周形成透明软骨，表面光滑;对照组缺损区为纤维样组织充填。结论 大面积自体骨膜游离移植在关节内环境中可以形成透明软骨。 Morphologic observation of regenerative cartilageonthedog’sfemoral head with autogenous freely grafted iliac periosteum Wang Yijin, Zhang Shengming,Guan Chunhe,Li Zhongyu,Wu Hongjuan,Zhou Shijun (Department of Orthopaedics, Affiliated Hospital of Weifang Medical College, Weifang, Shandong 261031) 【Abstract】 Objective To observe morphologic change of regenerative cartilage of the dog s femoral head with large area autogenous freely grafted iliac periosteum. Methods 16 adult healthy hybrid dogs were divided into 2 groups:12 in experimental and 4 in control group. 2/3 near end of cartilage of right femoral head of each dog was removed and covered by the iliac periosteum adhered to the mended femoral head with fibrin adhesive and sewed with 4 to 6 stitches in experimental group. The 2/3 near end of cartilage of right femoral head of each dog was removed only in control group. The dogs were killed in batches in 2,4,8 and 12 weeks after operation. The histological observation of grafted sites were made with light and electronic microscope. Results In the second week after operation, the inner line cells of periosteum were reproduced actively, hyaline cartilage was formed and its surface was smooth at 8 to 12 weeks after operation. The cartilage removed sites were filled with fibroid tissues in control group. Conclusion The graft can form hyaline cartilage in the joint. 【Key words】 iliac periosteum; femoral head; periosteum transplantation; cartilage,articular; regeneration; dogs 游离骨膜移植形成骨或软骨已经从形态学和生化等方面得到证实〔1〕，但仅局限在较小面积。临床上18,30岁强直性脊柱炎患者髋关节接近强直或已纤维强直的病例较常见，恢复这类患者的髋关节功能，避免过早地进行人工关节置换，是临床治疗中的一大难题。对此，我们进行了大面积自体游离骨膜移植的动物实验研究，以期进一步为临床开展重建髋关节功能起到指导作用。 1 材料与方法 1.1 实验动物及分组 选用10,12个月龄健康杂种狗16只，每只10,12 kg，??不限，随机分为2组，实验组12只，对照组4只，均选右侧为术侧。 1.2 手术方法 实验动物采用硫贲妥钠(35 mg.kg-1)腹腔注射麻醉。在无菌条件下，作髋关节前外侧切口，沿髂嵴切开皮肤，分离皮下组织，在骨膜外用眼科剪刀锐性分离，范围3 cm×3.5 cm，用骨刀以45°角朝向髂骨面锐性分离骨膜备用，显露髋关节，脱出股骨头，咬除股骨头关节软骨近端2/3，深达出血的松质骨，挫至平整圆滑，用临时融化的冻存纤维蛋白粘合剂(上海生物制品研究所出品)将骨膜粘附于修整好的股骨头上，生发层朝向关节腔。为防止撕脱，用3-0无创缝线将骨膜与周边软骨缝合固定4,6针，用庆大霉 素液冲洗，还纳股骨头，逐层缝合。对照组仅去除关节软骨，不作骨膜移植。术后肌注庆大霉素2次，每次16万U。 1.3 观察方法 术后注意观察实验动物髋关节活动及切口愈合情况，并分别于术后2、4、8、12周分批处死动物，每批实验组3只，对照组1只。于股骨头近2/3中间部位取材，按常规方法制作组织切片和超薄切片，HE和甲苯胺蓝染色，光镜观察。铀-铅双重染色，JEM-1200透射电镜观察。 结果 2 2.1 实验动物一般情况 术后1周内，实验动物手术侧活动受限，呈自我保护状态，跳跃步态。 2周后基本活动自如，切口均一期愈合。 2.2 肉眼观察 实验组:术后2周移植骨膜无滑脱，但有皱折形成，骨膜移植部位为白色，质软的纤维样组织充填，表面不光滑，移植骨膜仍能撕脱。术后 4周移植骨膜部位呈白色质韧的软骨样组织，有的部位高于正常软骨。术后 8,12周移植区颜色类似正常软骨，质硬光滑，股骨头曲度良好。对照组:缺损区见白色质软的纤维样组织充填，表面不光滑。 2.3 形态学观察 对照组:股骨头光镜下呈致密的胶原纤维束，排列不，束间有扁平的细胞核。近软骨面组织致密，外层组织疏松且分界明显。电镜下细胞呈梭形，有突起，胞质内有少量粗面内质网和核蛋白体(图1，2)。 图1 对照组光镜图 致密结缔组织 图2 对照组电镜图 呈梭形的成纤维细胞，胞质内有少量粗面内质网，胶原原纤维横断面 实验组:术后第14天， 骨膜内面细胞增殖活跃，甲苯胺蓝染色显示增殖的骨膜呈蓝色，骨膜与受区骨创面纤维变疏松。术后第28天移植骨膜在光镜下见受区骨创面细胞由扁平变为圆形或椭圆形，且密集(图3)。电镜下细胞多呈不规则形，胞质内有大量的粗面内质网、多聚核蛋白和游离核蛋白体，有的细胞核内见有2个核仁(图4，5)。术后第56天已形成透明软骨，光镜下见浅层软骨细胞较小，深层有同源细胞群。电镜下软骨呈不规则形，有大量微绒毛。胞质内见有大量扩张的粗面内质网(图6，7)。术后第84天，光镜、电镜下形态变化同第56天。 图3 术后第28天移植骨膜受区光镜图 细胞呈圆形或椭圆形 济南显微外科医院