高效液相色谱法测定橘红痰咳液中柚皮苷的含量
高效液相色谱法测定橘红痰咳液中柚皮苷
的含量
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药品检验?2012年2月第9卷第5期
高效液相色谱法测定橘红痰咳液中柚皮苷的含量
李慧
山东省淄博市妇幼保健院药剂科,山东淄博255000
[摘要】目的建立测定橘红痰咳液中柚皮苷含量的高效液相色谱(HPLC)法.
色谱柱:Phenomenex—C(4.6mm~
250mm,5Ixm),流动相:甲醇一醋酸一水(38.0:0.5:62.0);检测波长:283nm;流速:1.0mL/min;柱温:40?.结果柚皮
苷在89.6,896.0g之间,线性关系良好r=0.9999),加样回收率为98.25%,RSD=1.43%(n=6).结论该方法
操作简便,准确.具有很好的重现性和稳定性,可以用于橘红痰咳液的质量控制. f关键词1高效液相色谱法;橘红痰咳液;柚皮苷;含量测定
『中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】1673—7210(2012)02(b)一0110—02
DeterminationofNaringininJuhongtankeOralSolutionbyHPLC
,日
DepartmentofPharmacy,ZiboMaternalandChildHealthHospitalinShandongProvince,Zi
bo255000,China
【Abstract】ObjectiveToestablishthemethodfordeterminationofNaringininJuhongtankeOralSolutio
nbyHPLC.
MethodsThecolumnemployedwasPhenomenex—Cl8Column(4.6mmx250mm,5Ixm);themobilephasewasmethanol— aceticacid-water(38.0:0.5:62.o);thedetectionwavelengthwassetedat283nm,theflowrate
was1.0mL/minandthecol—
umntemperaturewas40oC.ResultsThelinearrangeofNaringinwas89.6—896.0Ixg(r=0.9999),themeanrecoverywas 98.25%,RSD=1.43%n=6).ConclusionThismethodissimple,rapidandaccuratewithgoodr
eproducibility.Itissuit—
ableforthequalitycontrolofJuhonoankeOralSolution.
【Keywords】HPLC;JuhongtankeOralSolution;Naringin;Determination
橘红痰咳液为本院制剂,由化橘红,蜜炙百部,苦杏仁,
茯苓,制半夏,五味子,甘草7味药物组成,具有理气祛痰,润
肺止咳之功效,用于感冒,支气管炎,咽喉炎引起的痰多咳
嗽,气喘等.其中化橘红为君药.柚皮苷为化橘红的主要有效
成分之,,参照相关文献『1-6],本文通过系统的方法学考察,建
立了该制剂中柚皮苷的HPLC含量测定方法.并在此基础上
测定了柚皮苷的含量.
1仪器与试药
1.1仪器
高效液相色谱仪,包括LabAlliance型恒流泵,Waters966 二极管阵列检测器【活德国际贸易(上海)有限公司】,Millen nium32色谱工作站,Phenomenex—Cl8色谱柱(4.6mmx250mm, 5txm),BP211D型分析天平(德国赛多利斯),FOEA26810D型
纯水机(Millipore公司).
1.2试药
柚皮苷对照品(购自中国药品生物制品检定所,批号:110722,
200610),橘红痰咳液样品(自制,批号:100801,100802,100803), 缺少化桶红的阴性对照样品(自制);水为超纯水,甲醇为色
谱纯(国药集团化学试剂有限公司),其余试剂均为分析纯
(国药集团化学试剂有限公司).?
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱:Diamosil—CI8(4.6mmx250mill,5m);流动相: 甲醇一醋酸一水(38.0:0.5:62.0);检测波长:283nm;柱温:40?; 流速:1.0mL/min;理论塔板数按柚皮苷峰计算不低于3000. [作者简介】李慧(1971.3一),女,汉族,山东滨州人,本科,主管中药师;研 究方向:医院药学
11O中国医药导报CHINAMEDICALHERALD 2.2对照品溶液的制备
取110?减压干燥至恒重的柚皮苷对照品适量,加甲醇 制成每1mL含45g的溶液,即得.
2.3供试品溶液的制备
精密量取供试品1mL,加甲醇稀释并定容至25mL.摇 匀,滤过,取续滤液,即得.
2.4阴性溶液的制备
按照供试品溶液的制备方法,取缺少化橘红的阴性对照 样品,制备成阴性对照溶液.
2.5干扰试验
按照"2.1"项下的色谱条件,吸取供试品溶液,对照品溶 液,阴性对照溶液各10L,注入液相色谱仪,
色谱图. 供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,有色谱峰出 现,而阴性对照液无相应峰出现,
明阴性无干扰.见图1. 2.6线性关系考察
分别吸取柚皮苷对照品溶液(44.8Ixg/mL)2,4,6,8,10,
12,16,20L,注入高效液相色谱仪,记录色谱图,测定峰面 积.以峰面积(1,)为纵坐标,进样量()为横坐标,绘制标准 曲线,计算回归方程为:Y=12162X一27556,r=0.9999.表 明柚皮苷在89.6-896.0g范围内,峰面积值与进样量(g) 之间线性关系良好.
2.7精密度试验
精密吸取柚皮苷对照品溶液(44.8p~g/mL)10L,按
"2.1"项下色谱条件,重复进样6次,测得柚皮苷峰面积积分 值分别为5400267,5413236,5440989,5455261,5454005,
5411008,平均5429128,RSD=0.44%(n:6),表明仪器
的精密度良好.
2012年2月第9卷第5期
mIn
A.柚皮苷对照品溶液色谱图;B.供试品溶液色谱图:C.阴性对照溶液色谱图 1.柚皮苷
图1柚皮苷对照品,供试品阴性对照溶液,样品色谱图 2.8稳定性试验
取同一供试液(批号:100801),分别于制备后0,1,2,3, 4,5,6h进样,测得样品中柚皮苷峰面积值分别为4886932, 4846555,4855303,4830029,4831674,4815527,4801096,
平均4838159,RSD=0.58%,表明供试品溶液在制备后6h 内基本稳定.
2.9重现性试验
对同一批样品(批号:100801)分别制备6份供试品溶 液,按照"2.1"项下色谱条件测定,计算含量分别为0.991, 1.003,0.996,1.007,0.992,0.997rag/mE,平均0.998rag/mE, RSD=0.63%(n=6),表明方法的重现性良好.
2.10加样回收率试验
取已知含量的样品6份(柚皮苷含量0.998rag/mE),分 药品检验?
别精密加入柚皮苷对照品0.896mg,按"2.3"项下供试品溶液 制备方法操作,按公式计算回收率,回收率(%)=[测得量(mg)一 制剂中含量(mg)1/加人对照品量(mg)×100%.回收率试验结 果见表1.
表1回收率试验结果
2.11样品含量测定
取三批橘红痰咳液样品,按"2.3"项下供试品溶液制备
方法操作,按"2.1"项下色谱条件,依法测定.样品含量测定
结果见表2.
表2橘红痰咳液中柚皮苷的含量测定结果(n=3)
3讨论
化橘红是本制剂中的主要药材之一.柚皮苷是化橘红的
主要活性成分,具有抗炎,镇痛,抗病毒,抗过敏,抑菌及抑制 醛糖还原酶等药理作用,为本制剂的主要有效成分之一, 因此以柚皮苷含量作为制剂质量控制的指标是较为科学合 理的
本试验结果表明,高效液相色谱法测定橘红痰咳液中柚
皮苷的含量,操作简便,准确,具有很好的重现性和稳定性, 可用于该制剂的质量控制.
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(收稿日期:2011-06—27本文编辑:卫轲)
CHINAMEDICALHERALD中国医药导报111