紫外分光光度法测定丁卡因氯己定酊中两组分的含量_566

紫外分光光度法测定丁卡因氯己定酊中两组分的含量_566 紫外分光光度法测定丁卡因氯己定酊中两组分的含量 郑维国 (重庆市涪陵中心医院药剂科 重庆 涪陵 408000) 摘要: 目的 建立丁卡因氯己定酊的含量测定方法。方法 采用紫外分光光度法直接测定盐酸丁卡因含 量，测定波长为310nm;用系数倍率法测定醋酸氯己定含量，测定波长为254nm，转换波长为310nm。结 果 盐酸丁卡因质量浓度在2.71,10.81μg/mL范围内与吸收度线性关系良好，r=0.9999(n=7)，平均 回收率为99.91%，RSD为0.584%(n=6);醋酸氯己定质量浓度在2.51,10.04μg/mL范围内与吸收度线 性关系良好(r=0.9995)，平均回收率为99.76%，RSD=0.934%(n=6)。结论 方法简便、快速、准确，适宜 于该制剂的快速检验。 关键词:系数倍率法;丁卡因氯己定酊;盐酸丁卡因;醋酸氯己定;含量测定 Determination of the content of Tetracaine and Chlorhexidine tincture by UV spectrophotometry Zheng Weiguo (Department of Pharmacy,The Central Hospital , Fuling,,Chongqing ,China 408000) ABSTRACT:Objective To establish an assay method for determination of Tetracaine and Chlorhexidine tincture.Methods the content of tetracaine hydrochloride was detemined directly at 310 nm by UV spectrophotometry; the content of Chlorhexidine Acetate was detemined at 254nm by K-ratio spectrophotomerty, wavelength to transform is 310nm. Results The calibration curve for tetracaine hydrochloride was linear within the range of 2.71,10.81μg/mL ,r=0.9999(n=7),The average recovery was 99.91,(n=6)，and the RSD was 0.584,; The calibration curve for Chlorhexidine Acetate was linear within the range of 2.51,10.04μg/mL ,r=0.9995(n=7),The average recovery was 99.76,(n=6)，and the RSD was 0.934,.Conclusion The method is simple,rapid and accurate,and suitable for rapid assay of the preparation. Key words:K-ration method; Tetracaine and Chlorhexidine tincture; Tetracaine Hydrochloride; Chlorhexidine Acetate; content determination 丁卡因氯己定酊是我院研制的以盐酸丁卡因和醋酸氯己定为主药，以75%乙醇为溶媒制成的制剂， [1]是我院创伤科常用制剂，具有抗菌、局麻作用，主要用于创伤的消炎、止痛。单一的盐酸丁卡因和醋 [1]酸氯己定在《中国医院制剂》中，分别采用永停滴定法和吸收系数法测定含量，而该制剂为复方 制剂，若直接采用吸收系数法测定醋酸氯己定的含量，则盐酸丁卡因对测定有干扰。因此，笔者采用系 数倍率法，不经分离直接测定制剂中盐酸丁卡因和醋酸氯己定的含量，方法简便、快速、准确，符合医 院制剂快速检验的要求。 1 仪器与试药 UV-2401型紫外分光光度计(日本岛津);TG-328B型电光天平(上海分析仪器厂);盐酸丁卡 因(北京市燕京药业有限公司，批号070501，含量99.8%);醋酸氯己定(锦州九泰药业有限责任公司， 批号070302，含量99.6%);丁卡因氯己定酊以及75%乙醇溶液(本院制剂室生产)。 2 方法与结果 2.1 测定波长的选择 精密称取干燥至恒重的盐酸丁卡因和醋酸氯己定对照品适量，分别用水溶解并稀释成含5μg/mL的盐酸丁卡因溶液和5μg/mL的醋酸氯己定溶液;另取供试品和75%乙醇溶液，按照样品测定项下稀释方法进行稀释，得到供试品溶液和空白溶液。取上述溶液，以水为空白，在220,35nm波长范围内进行紫外扫描，得盐酸丁卡因、醋酸氯己定、样品溶液和空白溶液的紫外吸收光谱图(图1)。 由光谱图知，盐酸丁卡因在310nm波长处有最大吸收，且醋酸氯己定和其他辅料在此波长处无吸收，故选择310nm作为盐酸丁卡因的测定波长。醋酸氯己定在254nm和231nm波长处有最大吸收，但盐酸丁卡因在此段波长处也有吸收，根据上述两组分紫外吸收曲线的特征，确定醋酸氯己定的测定波长为254nm，并将310nm作为转换波长。 1. 盐酸丁卡因溶液 2.醋酸氯己定溶液 3.样品溶液 4.空白溶液 图1 紫外吸收光谱图 2.2 倍率系数K的测定 精密称取干燥至恒重的盐酸丁卡因适量，以水为溶媒，分别配制成系列不同浓度的溶液。以水为空白，在254nm和310nm波长处测定吸收度，以K=A/A计算，K为0.06065，RSD254310 为1.343%(n=5)。 2.3 方法学考察 线性关系考察:精密称取干燥至恒重的盐酸丁卡因25mg，醋酸氯己定25mg，置100mL量瓶中，用适量热水溶解后，再加水稀释至刻度，摇匀，精密量取稀释液0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、1.75、2.0mL，分别置50mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。以水为空白，在254nm和310nm波长处测定吸收度。以A对盐酸丁卡因质量浓度C(μg/mL)进行线性回归，得回归方程A=0.07929C-0.0019，r=0.9999(n=7)，310 结果表明盐酸丁卡因检测质量浓度在2.71,10.82μg/mL范围内与吸收度线性关系良好。由?A= A- 254A/A* A计算?A值，将?A与醋酸氯己定质量浓度C(μg/mL)进行线性回归，得回归方程?254310310 A=0.04784C-0.01415，r=0.9995(n=7)，结果表明醋酸氯己定检测质量浓度在2.51,10.04μg/mL范围内与吸收度线性关系良好。 回收率试验:精密称取干燥至恒重的盐酸丁卡因、醋酸氯己定各25mg，以及精密量取空白样品溶液5mL置100mL量瓶中，用适量热水溶解后，再加水稀释至刻度，摇匀。按“线性关系考察”项下方法操作，使其质量浓度分别为3.75，5，7.5μg/mL，每份平行操作两次，以水为空白，在254nm和310nm波长处测定吸收度，并代入回归方程计算，结果见表1。 表1 回收率试验结果 盐酸丁卡因 醋酸氯己定 序号 加入量(μg/mL) 测得量(μg/mL) 回收率(%) 加入量(μg/mL) 测得量(μg/mL) 回收率(%) 1 3.848 3.841 99.82 3.795 3.835 101.05 2 3.848 3.835 99.66 3.795 3.828 100.87 3 5.130 5.167 100.72 5.060 5.023 99.27 4 5.130 5.156 100.51 5.060 5.017 99.15 5 7.695 7.638 99.26 7.590 7.516 99.03 6 7.695 7.654 99.47 7.590 7.530 99.21 平均值(%) 99.91 99.76 RSD(%) 0.584 0.934 稳定性试验:取供试品溶液,于配制后每隔0.5h分别测定A和A。结果在3h内在254nm波长处254310 吸收度的RSD为0.816(n=7)，在310nm波长处吸收度的RSD为0.203(n=7)，表明供试品溶液在考察的3h内是稳定的。 4 样品含量测定 2. 精密量取样品溶液5mL置100mL量瓶中，加水至刻度，摇匀。 再精密量取稀释液2mL置100mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。以水为空白，在254nm和310nm 波长处测定吸收度，计算?A，代入回归方程计算盐酸丁卡因和醋酸氯己定的含量。 结果3个批号的样品中盐酸丁卡因的含量分别为标示量的100.37%，98.26%，101.32%，醋酸氯己定的含量分别为标示量的98.19%，97.35%，100.63%。 3 讨论 [2]3.1 醋酸氯己定微溶于水，故试验中要先用适量的热水溶解。 3.2 本试验结果表明，直接用紫外分光光度法测定丁卡因氯己定酊中盐酸丁卡因的含量，用系数倍率法消除盐酸丁卡因对醋酸氯己定测定的影响，方法简便、快速、准确，适宜于该制剂的快速检验。 参考文献: [1]中华人民共和国卫生部药政局.中国医院制剂规范.西药制剂[M].第2版.北京:中国医药科技出版社,1995:177—178. [2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典,二部,[M].北京:化学工业出版社2005:852