口服促肝细胞生长素微球在大鼠体内的药代动力学和生物利用度
口服促肝细胞生长素微球在大鼠体内的药
代动力学和生物利用度 华南国防医学杂志2{)08年第22卷第3期
口服促肝细胞生长素微球
在大鼠体内的药代动力学和生物利用度
张海松陈阳述孔祥平
?19?
【摘要1目的研究促肝细胞生长素微球在大鼠体内的药代动力学和生物利用度.方法用高效液相色谱测定大
鼠血中促肝细胞生长素浓度,3P97程序计算参数.结果促肝细胞生长素微球的药动学参数分别:Cm=(28.6()?
9.43)~g/ml,t=210min,tl,2(G)=(144.40?19.78)min,AUGl,oo=(7662.03?704.36)/xg?min/ml,相对于胶囊剂
内容物的生物利用度是238.8.结论大鼠对促肝细胞生长素微球的吸收明显优于胶囊剂内容物.
关键词促肝细胞生长素微球药代动力学生物利用度
中图分类号R965.1文献标识码A
PharmacokineticsandBioavailabilityofOralMicrospheresofHepatocyteGrowth-Promoti
ngFactorsinRat
ZHANGHai—song.CHENYang—shu,KoNGXiang—ping.CenterofHepaticDiseases,No.458HospitalofPLA,
GuangzhouGuangdong5106{)2,China [Abstract]ObjectiveTostudyonthepharmacokineticsandbioavailabilityoforalmicrospher
esofhepatocyte
growth—promotingfactor(PHGF)inrat.MethodsPHGFconcentrationofratplasmawasdeterminedb
yHighPerform—
anceLiquidChromatography(HPLC)andpharmacokineticsparameterswerecomputedwit
h3P97program.ResultsThe
pharmacokineticsparametersoforalmicrospheresofPHGFwereasfollows:=(28.6?9.43)/xg/ml,f=210min,t1/2
(B)=(144.4()?19.78)min,AUG),oo=(7662.03?704.36)g?min/ml,andbioavailabilitycomparedwithcapsulewas
238.8.ConclusionAbsorptionofPHGFinmicrosphereshasanadvantageoverthatofPHGFi
ncapsuleinrat.
[Keywords]Microspheresofhepatocytegrowth,promotingfactors;Pharmacokinetics;Bioavailability
促肝细胞生长素(hepatocytegrowthpromoting factor,PHGF)在国内应用多年,一直是静脉注射药,
2005年国家批准促肝细胞生长素胶囊上市[1].由于
促肝细胞生长素为肽类物质,口服后在胃肠道损失很
多,因此作者制备了促肝细胞生长素微球[2],观察其在
大鼠体内的药代动力学和相对于胶囊剂的生物利用
度.
1材料
促肝细胞生长素胶囊,5(}mg/粒(杭州华锦药业有
限公司);促肝细胞生长素微球(自制)E2];磷酸二氢钠,
甲醇,硫酸钠均为分析纯.Wistar大鼠,1()只,雌雄不
限,体重250,350g(南方医科大学实验动物中心).
Agilent1100高效液相色谱仪(美国Agilent公司).
2方法
2.1给药和样品采集
禁食12h的大鼠1()只,分别灌胃给予促肝细胞生
长素微球混悬液8ml(含促肝细胞生长素120mg)和促
肝细胞生长素胶囊内容物混悬液8ml(含促肝细胞生
长素120mg),分别于给药后2(),4(),6(),90,120,150,
210,270,330,480min断尾取血lml于肝素钠润湿的 离心管中,立即离心分离血浆,置冰箱(一20?)保存. 2.2色谱条件
色谱柱:C18反相柱(4.6mmX150mm,5tim);流
动相:0.05mol/LNaH:PO缓冲液(5.()):甲醇=100: 6;流速1.0ml/min;柱温35?;检测波长为268nm. 2.3样品处理
取血浆200~,1,加水1()()l,Na2SO4饱和溶液
10()肚l,旋涡混匀后置8()?水浴加热5min, 1()()(}0r/min离心5min,取上清液25tA进样测定. 2.4分析方法评价
2.4.1标准曲线的制备取空白大鼠血浆200/.{1分 别加水和不同浓度促肝细胞生长素标准溶液100t,1, 配成浓度为1.07,2.67,5.33,13.3,26.7,66.7~g/ml
促肝细胞生长素血样后,按方法中2.3项自"Na:SO4 收稿日期:2007—1()一08
基金项目:"九五"空军医药卫生科研重点课题(A56) 作者单位:解放军458医院肝病中心(广州51()6()2)
?
20?
饱和溶液lOOt,1"起,依法测定,记录样品色谱峰面积. 2.4.2回收率试验取空白大鼠血浆200~1,分别加 水和高,中,低浓度促肝细胞生长素标准溶液100~1, 按方法中2.3项自"Na2SO4饱和溶液100F1"起,依法 测定,记录样品色谱峰峰面积,由标准曲线求得的浓度 与实际加入浓度之比得到回收率,每一浓度测定5个 样本.
2.4.3精密度试验按方法中2.4.2项方法分别配
制高,中,低三种浓度的促肝细胞生长素血样,测定日 内,日间精密度.
3结果
3.1色谱行为
促肝细胞生长素为多组份混合物,在本文色谱条 件下可分离出多个色谱峰.对所有色谱峰均进行测 定,选择其中具有良好分离效果,且标准曲线线性良 好,回收率和精密度均较好的色谱峰(保留时间 5.03min~右)进行定量.
3.2标准曲线和线性范围
以峰面积y为纵坐标,促肝细胞生长素浓度C为 横坐标进行直线回归,标准曲线方程为:Y=1.6× 10C+1.23,r=0.997,结果表明血浆中促肝细胞生 长素浓度在1.07~66.7Fg/ml范围内浓度与峰面积有 良好的线性关系.
3.3回收率和精密度
结果见表1,2.
表1方法回收率测定结果(=5)
Table1Recoveryrateofmethodin determiningPHGFinserum(=5) 表2方法精密度测定结果(=5)
Table2Precisionofmethodin determiningPHGFinserum(=5) 3.4样品测定结果
根据回归方程计算出2.1项下各样品保留时间为 5.03rain时组份的浓度,见表3.
华南国防医学杂志2008年第22卷第3期
S,=5) 表3不同时间点血中促肝细胞生长素组份浓度(?Table3ConcentrationsofPHGFs
inserumatdifferenttimepoints(?S,5)
时间
(min)
浓度(pg/m1)
促肝细胞生长素微球促肝细胞生长素胶囊 3.5药代动力学参数
药物浓度一时问数据经3P97程序处理药代动力学 参数的平均值见表4.促肝细胞生长素微球对促肝细 胞生长素胶囊的相对生物利用度为238.8. 表4促肝细胞生长素不同剂型的
药代动力学参数(?s././:5)
Table4Pharmacokineticsparametersof
PHGFwithdifferentdoses(?S.=5)
参数促肝细胞生长素微球促肝细胞生长素胶囊 4讨论
在本实验条件下,促肝细胞生长素的多组份色谱 中,只有保留时间5.03rain的组份峰面积与浓度有较 好的线性关系.因此,本文所述方法的精密度试验,回 收率试验,血药浓度值和药代动力学参数的结果均是 以该组份作为代表计算得到.实验结果表明,大鼠灌 胃给予促肝细胞生长素微球和促肝细胞生长素内容物 后,微球的血药浓度,曲线下面积均大于胶囊,消除半 衰期延长,生物利用度显着提高,这与国外文献报道的 类似产品的结果一致[4],为促肝细胞生长素微球产品 的开发提供了科学依据.
参考文献
1张海松,陆彬,张宜俊,等.促肝细胞生长素口服肠溶微球的制备 [J].中国医药工业杂志,1999,30(1):12—14 2张宜俊,章谷生.乙型肝炎生物治疗EM].第11版.上海:上海科学
技术出版,2001.159—160
3张海松,陈得光,张宜俊,等.HPLC分离测定大鼠血中促肝细胞生 长素l-J].西北药学杂志,1997,12(2):51—52
4倪宏,孟祥顺,赵芳.胸腺素口服对小鼠免疫功能的影~INEJ].中 国生化药物杂志,1996,17(2):59—62