为了正常的体验网站,请在浏览器设置里面开启Javascript功能!

免疫组化结果分析的判定

2017-09-28 3页 doc 13KB 16阅读

用户头像

is_614050

暂无简介

举报
免疫组化结果分析的判定免疫组化结果分析的判定 1首先要确定免疫组化技术是否合格合格的染色结果应该是背景颜色浅淡或无着色而阳性标志物清晰和定位明确。切片中的正常组织可以作为最简便的对照来判断染色结果的可靠与否例如用Vimentin抗体间质成纤维细胞利血管壁平滑肌细胞胞浆应呈阳性。肯定为阳性的对照组织却呈阴性待测组织的染色结果也就不可靠这现象常是由于抗体失效或过度稀释、组织中抗原严重丢失等。另一种现象是全片呈非特异性染色实质细胞、间质细胞和细胞外基质无区别地都呈黄色以HRP酶标法DAB为底物显色而言抗原无明确定位。造成这种现象的原因很多如抗体质量问题...
免疫组化结果分析的判定
免疫组化结果分析的判定 1首先要确定免疫组化技术是否合格合格的染色结果应该是背景颜色浅淡或无着色而阳性标志物清晰和定位明确。切片中的正常组织可以作为最简便的对照来判断染色结果的可靠与否例如用Vimentin抗体间质成纤维细胞利血管壁平滑肌细胞胞浆应呈阳性。肯定为阳性的对照组织却呈阴性待测组织的染色结果也就不可靠这现象常是由于抗体失效或过度稀释、组织中抗原严重丢失等。另一种现象是全片呈非特异性染色实质细胞、间质细胞和细胞外基质无区别地都呈黄色以HRP酶标法DAB为底物显色而言抗原无明确定位。造成这种现象的原因很多如抗体质量问题、组织固定不佳、洗涤不充分、组织中有能作用于底物的内源性酶如过氧化物酶、底物变质或显色时间过长等。上述两种情况都表明染色失败不能作为判断的依据。 2不仅要判断所检组织中有或无阳性标记物还要注意阳性信号的分布部位和形态特征。一般说来阳性信号应与被测抗原所在的部位一致。此处所说的部位包括组织和细胞的不同区域。如免疫复合物的Ig和补体可在肾小球毛细血管壁、系膜区或间质血管壁上细胞表达的抗原可在胞浆内、核内、胞膜上或细胞外基质。病理医生应对于拟测抗原分布于何处有所了解。例如Ki—67、PCNA、雌激素受体、孕激素受体、P53蛋白等定位于胞核EMA、Ki—1、LCA等为胞膜型抗原但有时也在胞质中。大部分细胞抗原位于胞质内其中亦有区别有的阳性颗粒弥散于整个细胞的胞质有的则呈斑块状局限于胞浆某处。还有些抗原同时分布于胞质和胞膜如胃肠腺癌细胞的EMA或核与胞质如S—100、HMB—45。同一种抗原在不同类型的细胞可定位不同因而分布的特点也有一定的鉴别意义在此不一一列举。 免疫组化染色结果与预期的不一致时应作具体分析不要轻易地否定或采用。病理医生应了解以下几个与判断结果有关的因素。?细胞内的阳性标志物不一定是该细胞自身表达的抗原而可能是吞噬或吞饮的抗原物质如间质中的巨噬细胞可摄入其他细胞释放的抗原物质因而常呈非特异性的阳性表现恶性肿瘤细胞侵袭破坏相邻的组织后也可摄入正常细胞的抗原如恶性纤维组织细胞瘤、恶性黑色素瘤可与邻近的正常上皮呈现相同的上皮细胞抗原甲状腺内的转移癌细胞可以呈甲状腺球蛋白阳性反应固而可能被误认为甲状腺原发癌但肿瘤细胞的吞噬只是近距离的阳性细胞位于残存的正常组织附近?肿瘤细胞和其相应的正常细胞在抗原表达的质和量方面都可有所不同抗原的定 位也可偏离一般规律如正常细胞的膜型抗原在癌细胞却可定位于胞质内。肿瘤细胞可出现异常的免疫表型有时表达其它类型细胞的抗原例如偶尔可见恶性淋巴瘤细胞在T细胞性免疫标志物阳性的同时呈B细胞的标志物SIg.还可由于基因突变导致其编码蛋白不表达或某些抗原决定簇缺失可造成代表细胞分化特征的抗原的不表现。这些现象不少见使得对肿瘤免疫组化染色结果的解释复杂化。为解决这问题可选用多种抗体以增加证实或否定的依据此外也要求病理医生积累经验和相关的知识?同一肿瘤中的瘤细胞是异质性的这也反映在免疫标记阳性细胞在肿瘤内的分布是不均匀的甚至同一细胞巢中阴性和阳性细胞并存?同一种抗原的多克隆抗体和单克隆抗体的反应结果可能是不同的。一般说来多克隆抗体的敏感性较高但特异性较差而单克降抗体则相反。这是由于单克隆抗体对抗原决定簇的专一性强由不同克隆的杂交瘤细胞所产生的抗体即使都作用于同一种抗原但所结合的抗原决定簇不同使用时可能出现不同的反应结果例如在福尔马林固定的石蜡包埋组织中部分抗原决定簇被掩蔽就可能出现用A克隆的单抗结果为阳性而用B克隆的单抗结果为阴性。因此采购和使用新的单克隆抗体时要注意其克隆代号 3判断标志物阳性程度的方法一是依着色强度二是依阳性细胞数 在同类细胞中所占比例多少二者亦可结合应用。阳性程度的分等一般是粗略的如仅为诊断目的而非为研究作的免疫组化判断结果常以定性为主。应了解着色程度不仅取决于抗原的含量和分布密度还与抗体的敏感性、切片厚度、显色时间等多种技术因素有关。但是在固定的技术条件下比较染色反应的强度对鉴别诊断仍有一定的参考意义例如前述腺癌与间皮瘤均可呈Vimentin阳性但通常腺癌细胞弱阳性或部分细胞阳性而间皮细胞常为明确的阳性。
/
本文档为【免疫组化结果分析的判定】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑, 图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。 本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。 网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。

历史搜索

    清空历史搜索